毒蕈碱乙酰胆碱受体通过 Ras-ERK-1/2 信号通路上调 Bcl-2 和磷酸化 Bad 的表达

一、毒蝇碱型乙酰胆碱受体经Ras-ERK-1/2信号通路上调Bcl-2和磷酸化Bad表达(论文文献综述)

臧树成[1](2019)在《miR-383在急性冷暴露诱导大鼠肝脏氧化应激中的作用》文中研究表明冷刺激是我国北方冬季普遍的应激因素,动物长时间在低温环境下生存,肝脏组织损伤较为严重,主要表现在形态和功能的异常,但是具体的损伤机制还不清楚。miRNA是一类小分子非编码RNA,广泛参与机体的各种生物进程。实验室前期工作发现miR-383在急性冷应激大鼠肝脏组织中表达显着下调,而且通过对文献的查询发现miR-383是细胞增殖、凋亡等生物进程中重要的调节因子,但是当前关于其介导肝脏组织冷应激反应的研究仍较少。所以本研究的目的是在体外通过H2O2诱导大鼠肝细胞发生氧化应激,模拟体内大鼠肝脏组织冷应激状态,初步揭示miR-383在冷应激大鼠肝脏中的功能,为大鼠冷应激形成机理奠定前期基础,为应激调节机制的研究和进一步研发应激调节剂提供理论参考依据。首先通过Western Blot、试剂盒和qRT-PCR分别对大鼠肝脏组织中氧化应激指标、凋亡指标以及miR-383的表达量进行了检测,然后又通过生物信息学方法对miR-383功能进行了预测。在体外对miR-383的功能进行了研究并验证了miR-383的靶点。研究结果显示,冷刺激后大鼠肝脏组织中MDA含量,Caspase 3和Cyto C蛋白水平显着上升(p<0.05);GPx活力和SOD1蛋白水平显着下降(p<0.05)以及miR-383表达极显着下调(p<0.01)。通过在大鼠肝细胞中研究miR-383生物学功能发现,随着H2O2的增加大鼠肝细胞凋亡率、ROS水平和miR-383表达都显着上升(p<0.01),并且通过qRT-PCR技术确定了miR-383过表达最佳条件为转染mimic 100pmol,时间为24 h;抑制最佳条件为转染inhibitor 60 pmol,时间为24 h。在H2O2刺激的条件下,抑制miR-383的表达后大鼠肝细胞凋亡率、线粒体膜电位水平、Caspase 3和Cyto C蛋白水平都显着下降(p<0.05),但是ROS水平和Nrf2蛋白表达没有显着变化(p>0.05)。在大鼠肝脏组织和肝细胞中发现,miR-383的表达和Bcl2的表达呈现负相关趋势,同时双萤光素酶报告基因试验也证实了Bcl2是miR-383的靶标。结论:氧化应激大鼠肝细胞中抑制miR-383的表达,可能会通过靶向促进Bcl2的翻译,保护H2O2诱导大鼠肝细胞凋亡;miR-383在冷应激大鼠肝脏组织中的下调,可能是机体保护肝脏组织低温损伤的一种方式。

许明敏[2](2016)在《针刺对抑郁模型大鼠前额叶皮质ERK1/2-CREB-BDNF信号通路的影响》文中提出目的抑郁症是一种严重危害人类身心健康的情绪障碍综合征,具有较高的致残致死率,给家庭和社会带来极大的经济和精神负担。抑郁症发病机制复杂,与应激密切相关,长期的慢性应激会导致相关脑区的神经元细胞损伤和凋亡,其中海马和前额叶皮质等脑区尤为明显。’因此修复这些脑区的神经元损伤及促进它们的营养再生是治疗抑郁症的关键之一。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路中的细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)通路与细胞的增殖生长密切相关,其主要通过促进脑源性神经营养因子(BDNF)对神经元细胞发挥抗损伤和促生长的作用。本课题组前期研究证实针刺能通过激活慢性应激抑郁模型大鼠海马ERKl/2信号通路,促进海马神经元细胞的营养再生发挥抗抑郁的作用。由于额叶皮质是情绪调控的高级中枢,而且对认知、感觉和运动等方面具有多级协调作用,在抑郁症的发病过程中是具有重要的地位,但关于针刺是否能通过调控前额叶皮质ERK1/2信号通路发挥抗抑郁效应的相关研究甚少。因此,本研究特异性抑制ERK1/2信号通路,观察慢性应激抑郁模型大鼠额叶皮质ERK1/2-CREB-BDNF信号通路上的关键效应因子p-ERK1/2、 p-CREB、BDNF蛋白表达水平的改变,对课题组前期研究推断进行验证的同时,继续深入探讨,以期完善针刺通过调节ERK/CREB/BDNF信号通路的抗抑郁作用机制。方法1分组将64只SD雄性大鼠,随机分为8组,每组8只:空白组、模型组、模型+针刺组(针刺组)、模型+氟西汀组(氟西汀组)、模型+DMSO组、模型+PD98059组(模型+PD组)、模型+针刺+PD98059组(针刺+PD组)、模型+氟西汀+PD98059组(氟西汀+PD组)。2造模方法采用孤养结合慢性轻度不可预见性应激方法制备抑郁大鼠模型,应激方法包括:断食24h;断水24h;束缚2h;振荡30min;夹尾3 min;潮湿垫料24h;夜间光照12h。实验过程中每种应激刺激平均3次,不连续使用同一种应激方式,共造模21天。在造模前一周,模型+DMSO组、模型+PD组、针刺+PD组和氟西汀+PD组进行侧脑室套管埋置手术。3干预方法针刺干预选取“百会”和“印堂”穴,“百会”穴进针方向向后头部,“印堂”穴进针方向向鼻尖,进针后捻转刺激2min,频率为2次/s,针刺深度为0.5-1cm,留针10min,每天一次;氟西汀用蒸馏水配成0.2mg/ml的混悬液,以1.8mg/kg灌胃给药。以上操作时应注意尽量减少额外刺激。4处理方法正常组不给予任何刺激,正常群居饲养。其余各组均接受21天慢性应激刺激并单笼饲养。同时,针刺组在每天造模前30min进行针刺治疗;氟西汀组在每天应激前30min进行氟西汀灌胃给药;模型+DMSO组在应激前1h给予10ul/ld DMSO侧脑室注射;模型+PD组在应激前1h给予10ul/1 d阻断抑制剂PD98059稀释液侧脑室注射;针刺+PD组、氟西汀+PD组在应激前1h给予10ul/ld阻断抑制剂PD98059稀释液侧脑室注射,然后应激前30min分别给予针刺干预和氟西汀灌胃给药。5检测方法采用体质量(Body Weight)测量、糖水消耗实验(Sucrose Intake Test)、旷场试验(Open-field Test)评价抑郁模型大鼠行为学改变情况。采用Western blot法检测前额叶皮质ERK、p-ERK、p-CREB、BDNF蛋白表达情况。结果1行为学变化造模前:各组大鼠之间的糖水消耗量、旷场试验均无统计学意义(均P>0.05);非手术组(空白组、模型组、针刺组、氟西汀组)各组大鼠之间的体质量无显着差异(均P>0.05);手术组(模型+DMSO组、模型+PD98059组、针刺+PD98059组、氟西汀+PD98059组)各组大鼠之间的体质量无显着差异(均P>0.05)。造模结束后:(1)与空白组相比,模型组大鼠的体质量、糖水消耗量、旷场试验均显着下降(P<0.01),说明造模成功;(2)与模型组相比,针刺组和氟西汀组大鼠的体质量、糖水消耗量、旷场试验均显着上升(均P<0.01),说明针刺和氟西汀干预能显着改善抑郁模型大鼠的抑郁行为,模型+DMSO组大鼠的糖水消耗量、旷场试验均没有显着性差异(均P>0.05),说明侧脑室套管埋置术对模型大鼠影响较小,模型+PD组大鼠的糖水消耗量、旷场试验均下降(均P<0.05),说明阻断剂PD98059加重了模型大鼠的抑郁行为;(3)与针刺组比较,针刺+PD组大鼠的糖水消耗量、旷场试验均显着下降(均P<0.01夕,说明阻断剂PD98059抑制了针刺对抑郁大鼠的改善作用,氟西汀组大鼠的糖水消耗量、旷场试验均没有显着性差异(均P>0.05)(4)与氟西汀组相比,氟西汀+PD组的糖水消耗量、旷场试验也显着降低(均P<0.01),说明阻断剂PD98059抑制了氟西汀对抑郁大鼠的改善作用;(5)与模型+PD组比较,糖水消耗量方面,氟西汀+PD组上升伊<005),但针刺+PD组无显着性差异(P>0.05),旷场试验方面,针刺+PD组、氟西汀+PD组均显着增加(均P<0.01),说明针刺和氟西汀可能通过其它通路改善模型大鼠的抑郁行为,而针刺可能主要是通过调节前额叶皮质ERK1/2信号通路改善大鼠的糖水消耗量。2前额叶皮质ERK1/2信号通路关键指标的变化实验结束后,取大鼠前额叶皮质进行Western blot检测,各组大鼠之间前额叶皮质ERK1/2蛋白表达均无显着性差异(均P>0.05)。(1)与空白组相比,模型组大鼠前额叶皮质中p-ERK1/2、p-CREB、BDNF蛋白含量均显着降低(P<0.051),说明慢性应激刺激可能抑制了大鼠前额叶皮质ERK1/2信号通路的活性;(2)与模型组相比,针刺组和氟西汀组大鼠前额叶皮质中p-ERK1/2、p-CREB蛋白含量均显着升高(均P<0.01),针刺组大鼠前额叶皮质中BDNF表达升高(P<0.05),氟西汀组升高更显着(P<0.01),说明针刺组和氟西汀干预可上调大鼠前额叶皮质ERK1/2信号通路的活性,模型+DMSO组、模型+PD组大鼠前额叶皮质中p-ERK1/2、p-CREB、 BDNF蛋白含量均无显着差异(均P>0.05),说明侧脑室套管埋置术和阻断剂PD98059对模型大鼠前额叶皮质ERK1/2信号通路影响较小;(3)与针刺组比较,针刺+PD组大鼠前额叶皮质中p-ERK1/2.p-CREB蛋白表达均显着降低(均P<0.01),而BDNF表达无显着性差异(P>0.05),说明阻断剂PD98059抑制了针刺对大鼠前额叶皮质ERK1/2信号通路的上调作用,但是对BDNF表达无影响,氟西汀组大鼠前额叶皮质中p-ERK1/2、p-CREB、BDNF蛋白表达无显着性差异(均P>0.05);(4)与氟西汀组相比,氟西汀+PD组大鼠额叶中p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05), p-CREB表达显着降低伊<P<0.01),而BDNF表达无显着性差异(P>0.05),说明阻断剂PD98059抑制了氟西汀对大鼠前额叶皮质ERK1/2信号通路的上调作用,但是对BDNF表达无影响;(5)与模型+PD组相比,p-ERK1/2、BDNF蛋白表达方面,针刺+PD组和氟西汀+PD组均无显着差异(均P>0.05),p-CREB蛋白表达方面,针刺+PD组升高(P<0.05),氟西汀+PD组升高更显着(P<0.01),说明针刺和氟西汀干预可通过其他通途来上调CREB的磷酸化,而氟西汀可能更多的通过其他通路来调节。结论1孤养结合慢性应激刺激可以显着抑制大鼠前额叶皮质ERKl/2信号转导通路的激活,导致大鼠体质量下降、探究行为减少及快感缺失。2针刺干预能显着改善模型大鼠的抑郁样行为,可能是通过上调大鼠前额叶皮质ERK1/2蛋白的磷酸化水平,激活CREB蛋白活性,扩大了最终效应蛋白BDNF的表达。3针刺干预也可能是直接上调了大鼠前额叶皮质BDNF的蛋白表达发挥抗抑郁作用。4针刺的抗抑郁作用可能更多是通过激活前额叶皮质ERK1/2信号通路实现。

孙阳[3](2016)在《硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞放射损伤分子机制的研究》文中研究说明目的:探究经4Gy X射线照射后的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),硫酸镁对其细胞周期、细胞凋亡率的影响,而且探讨分析其可能的分子机制。同时研究硫酸镁对HUVEC中抗凋亡蛋白Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平的影响。方法:1.选取符合实验要求的HUVEC,采用流式细胞仪检测硫酸镁对经X射线照射后不同时间HUVEC细胞周期分布的影响;周期蛋白CyclinB1采用流式细胞术和免疫印迹法检测。2.HUVEC细胞凋亡率的测定,采用膜联蛋白双染法(Annexin V/PI);Bcl-2、P53蛋白采用免疫印迹法检测;Bcl-2 mRNA的检测则采用Real Time-PCR法。3.IκB-α蛋白的表达,使用免疫印迹法测定其变化;IκB-αmRNA的表达,使用Real Time-PCR法测定其变化。4.数据均选用均数±标准差表现,使用SPSS 19.0统计学软件,t检验对比组间差异。P<0.05为差别有统计学意义。结果:1.前期试验结果显示:对人脐静脉血管内皮细胞而言,硫酸镁的浓度为1.25mg/mL时,是无毒性的,且X射线照射后,该浓度的硫酸镁能使细胞的存活率增加[26]。2.经X射线照射后,HUVEC会出现G2/M期阻滞,而1.25mg/mL硫酸镁能使其阻滞程度降低。流式细胞术和western blot检测均提示:较单纯照射组相比,照射加药组24h CyclinB1蛋白表达量有一定的升高。3.与空白对照组相比,X射线照射组细胞凋亡率均有不同程度的增加,照射加药组与单纯照射组比较,HUVEC细胞凋亡率增加,提示硫酸镁的浓度在1.25mg/m L时,对X射线照射后的HUVEC,可能促进其凋亡。4.Real-Time PCR结果显示,X射线增加抗凋亡蛋白Bcl-2 mRNA的表达,而1.25mg/ml硫酸镁能降低其表达水平;免疫印迹法提示单纯照射48h、72h后,Bcl-2蛋白的表达增加,1.25mg/mL硫酸镁能降低Bcl-2蛋白的表达;免疫印迹法检测提示单纯照射72h后,蛋白P53表达量明显增加;与单纯照射组相比,照射72h后HUVEC的P53蛋白的表达,硫酸镁可以促进其蛋白水平的增加。5.Real Time PCR检测提示,X射线能促进HUVEC中IκB-αmRNA的表达,而1.25mg/m L硫酸镁作用后,能促使其表达减少;western blot法提示单纯照射24h、48h后,IκB-α蛋白的表达增加,72h IκB-α的表达下降,1.25mg/mL硫酸镁能降低IκB-α蛋白的表达。结论:1.1.25mg/mL硫酸镁能缓解经X射线照射后HUVEC的G2/M期阻滞;2.HUVEC经X射线照射后,1.25mg/mL硫酸镁能使细胞凋亡率比例增多;3.硫酸镁可能通过抑制IκB-αmRNA的表达,抑制NF-κB的激活,从而阻止NF-κB的核转位来降低Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平,从而促进不能修复的细胞凋亡。

刘琪[4](2014)在《饱和氢气生理盐水对吸入性肺损伤的保护作用》文中研究指明目的:探讨不同剂量氢气饱和生理盐水(hydrogen-rich saline, HS)对烟雾吸入性损伤大鼠急性肺损伤(acute lung injury, ALI)的保护作用。方法:将30只成年清洁级雄性SD大鼠随机分为5组:空白对照组(C)、吸入性损伤组(Ⅰ)、氢气饱和生理盐水组(HS)其中包括:氢气饱和生理盐水低剂量组(2.5ml/kg, HSL)、氢气饱和生理盐水中剂量组(5ml/kg, HSM)、氢气饱和生理盐水高剂量组(10ml/kg, HSH)。空白对照组不做任何处理,吸入性损伤组造成吸入性损伤模型后不做处理,氢气饱和生理盐水组造成吸入性损伤模型后给予腹腔注射富氢水治疗(3组的注射剂量分别为2.5ml/kg、5ml/kg、10ml/kg)。各组于致伤后24h后腹主动脉取血2ml,处死。动脉血离心后检测血清中肿瘤坏死因子a (tumor necrosis factor α, TNF-α);取右肺组织做成病理切片,光镜及透射电镜下观察肺组织病理学变化。取左肺组织匀浆检测组织中丙二醛(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性;免疫组织化学法测定肺组织核因子-KBp65(nuclear factor-KB, NF-KBp65)的表达;TUNEL法检测肺组织凋亡情况。结果:①光镜下:空白组大鼠肺泡腔结构完整,壁光滑,肺泡隔均匀一致,未见水肿,肺泡腔清晰,其内无渗出液或渗出的白细胞;吸入性损伤组表现为肺泡间隔明显增厚、水肿,肺泡间质小血管充血,管腔内中性粒细胞积聚、微血栓形成。肺泡扩张或萎陷,肺泡组织结构难以辨清,肺泡腔内和小气道内有大量红细胞及炎性细胞浸润;中、高剂量氢气生理盐水组肺组织水肿减轻,浸润的白细胞数量减少,肺泡扩张和萎陷程度有所改善,而低剂量组改善不明显。②电镜下:空白对照组肺泡清亮,血管畅通,Ⅰ型上皮细胞(alveolartype Ⅰ cells, AT-Ⅰ)正常,肺泡Ⅱ型上皮细胞((alveolartype Ⅱ cells, AT-Ⅱ)结构正常,粗面内质网带状,附着核糖体丰富,胞质内板层小体堆积,肺泡表面活性物质(pulmonary surfactant, PS)小泡丰富。毛细血管内皮细胞基本正常。呼吸膜结构正常;吸入性损伤组肺泡腔内有红细胞、细胞碎片,肺泡毛细血管充血。肺泡上皮细胞微绒毛脱落,有的上皮细胞坏死、脱落。呼吸膜肿胀增厚。血管皱曲,红细胞瘀滞,粘附于血管内壁。有大量髓鳞体样结构产生。Ⅰ型上皮细胞核周池扩张,核染色质电子密度减低,粗面内质网池扩张,伴有脱颗粒,线粒体结构部清晰。Ⅱ型肺泡上皮细胞结构松散,细胞表面有少量微绒毛或无微绒毛,有的可见微绒毛的脱落,胞浆内板层小体结构较少,线粒体基质深、模糊、嵴不清楚,少数线粒体有空泡变,粗面内质网扩张,所含表面活性物质大部分排出。部分毛细血管内皮细胞肿胀,凸向血管腔;HSL组较Ⅰ组变化不大;HSM、HSH组电镜下病理改变较Ⅰ组明显减轻,且HSH组较HSM组效果明显。③血清TNF-α含量对比:HSM、HSH组TNF-α含量较Ⅰ组降低(P<0.05),且HSH组TNF-α较HSM组降低明显(P<0.05),HSL组与Ⅰ组间差异无统计学意义(P>0.05)。④肺组织SOD、MDA活性对比:HSM、HSH组SOD含量高于Ⅰ组(P<0.05),且HSH组高于HSM组,差异有统计学意义(P<0.05),HSL组与Ⅰ组差异不明显(P>0.05)。HSM、HSH组MDA水平低于Ⅰ组(P<0.05),且HSH组低于HSM组,差异有统计学意义(P<0.05),HSL组与Ⅰ组差异无统计学意义(P>0.05)。⑤肺组织细胞NF-κB表达程度的对比:空白对照组大鼠肺组织内存在散在的NF-κB阳性染色细胞,主要位于胞浆(对照组NF-KBp65不表达或表达极弱)。吸入性损伤组有深染的NF-κB阳性细胞,其染色以细胞核为主。而氢气饱和生理盐水各组细胞核及胞浆NF-κB染色普遍淡于Ⅰ组,以HSM、HSH为着,HSL变化不大。各组平均光密度值(MOD)统计结果显示与上述表述致,且HSH组MOD值低于HSM组(P<0.05)。⑥肺组织凋亡情况对比:TUNEL染色结果显示,空白组有少许细胞被染成棕色,吸入性损伤组可见大量被染成棕色的阳性细胞,然而HSm、HSH组阳性细胞较吸入性损伤组明显减少,HSL组变化不明显。各组凋亡指数(AI)统计结果显示与上述表述一致,HSH组低于HSM组(P<0.05)结论:本实验中、高剂量氢气饱和生理盐水(5ml/kg、10ml/kg)通过影响细胞炎症反应、氧化应激及凋亡方面减轻吸入性损伤大鼠的急性肺损伤,且高剂量组(10ml/kg)较中剂量组(5ml/kg)效果更好,而低剂量组(2.5ml/kg)治疗效果不明显。

孙志敏[5](2014)在《Bcl2、Caspase3在人脑胶质瘤中的表达及意义》文中指出目的:人脑胶质细胞瘤脑简称胶质瘤,是人类中枢神经系统中最常见的恶性肿瘤之一。由于它呈侵袭性生长,使得临床治疗困难,是导致病人死亡的主要原因。我国是胶质瘤的高发国家,每年的发病人数和因胶质瘤而死亡人数都位居各种恶性肿瘤的前列,由于它的侵袭性生长,在治疗上成为一个世界性难题。肿瘤的发生和发展是多因素、多基因、综合作用的结果。胶质瘤是颅内主要的原发性肿瘤[1],与多种凋亡基因,原癌基因,抑癌基因与胶质瘤的发生有关,这些基因作用在肿瘤细胞增殖和凋亡的不同环节,凋亡抑制或平衡失调,可导致肿瘤细胞过度增殖,决定肿瘤的生长、转移和预后。目前研究证实,在多种肿瘤的发生、发展,侵袭和转移的机制中,许多细胞粘附分子和水解蛋白酶发挥重要作用,其作用机制也陆续被阐明,但与胶质瘤的关系报道并不多,因此,关于胶质瘤的发生、发展,浸润生长等机制的研究有必要从分子水平着手。细胞凋亡是细胞在各种死亡信号刺激后发生的一系列瀑布式的主动性死亡过程,受多种基因调控。与caspase3家族和bcl2家族密切相关。肿瘤细胞的凋亡,增殖和抗凋亡的相互作用,决定肿瘤生物学行为的恶性进展程度。目前研究较多的是caspase3与bcl2在消化道肿瘤(如胃癌、肝癌、结肠癌、胰腺癌等)和泌尿生殖系肿瘤(如乳腺癌、子宫癌、卵巢癌、肾癌、膀胱癌等)中的表达,而在脑胶质瘤中的表达研究还比较少。脑胶质瘤为常见的颅内肿瘤,深入研究caspase3和bcl2在脑胶质瘤中的表达及其与脑胶质瘤临床病理分型之间的关系,可能成为脑胶质瘤的诊断、预后、治疗的一条新途径。本课题通过检测caspase3,Bcl2在不同级别脑胶质瘤中的表达以探讨caspase3,Bcl2对脑胶质瘤发生、发展及预后的意义。方法:收集2012年12月至2013年4月于河北医科大学第二医院神经外科手术切除的人脑胶质瘤标本60例。按照WHO2007年中枢神经系统肿瘤分类,ⅠⅡ级为低级别胶质瘤,共23例; ⅢⅣ级为高级别胶质瘤,共37例,均有完整病历资料并经本院病理科证实。另取11例因外伤或者脑出血而进行的颅内减压的正常脑组织标本作为对照。胶质瘤患者于手术前均未进行放化疗等任何抗肿瘤治疗。所有标本均在手术切下组织后立即取材,分别于10%的福尔马林固定及液氮保存,采用免疫组织化学法IHC和RT-PCR分别检测Bcl2、Caspase3在胶质瘤中蛋白水平和mRNA水平的表达情况。实验结果数据用SPSS16.0软件进行统计学分析。结果:1IHC结果显示:Bcl2在正常脑组织、低、高级别胶质瘤组表达阳性率分别为9%、78%、100%;Caspase3表达阳性率分别为0%、100%、84%。Bcl2、Caspase3在三组间表达有显着性统计学差异(P=0.000),组间两两比较均有显着性统计学差异(P<0.05),随肿瘤恶性程度增高,Bcl2表达量增高,Caspase3表达量减少。Bcl2和Caspase3在正常脑组织、低、高级别胶质瘤三组中表达呈负相关(r=-0.814,P=0.000),在其余组间表达未见相关关系,可能与样本量少有关。2RT-PCR结果显示:Bcl2、Caspase3在正常脑组织、低、高级别胶质瘤三组间表达有显着性统计学差异(P<0.05),组间两两比较均有显着性统计学差异(P<0.05),随肿瘤恶性程度增高,Bcl2表达量增高,Caspase3表达量减少。并且Bcl2和Caspase3在正常脑组织、低、高级别胶质瘤三组中表达呈负相关(r=-0.254, P=0.032),在肿瘤组(包括低、高级别胶质瘤)表达也呈负相关(r=-0.48,P=0.000),在其余组中按P<0.05检验水准下未见相关性。结论:1Bcl2在正常脑组织、低、高级别胶质瘤组三组间及组间两两比较表达有显着性统计学差异,随肿瘤恶性程度增高,Bcl2表达量增高,在高级别胶质瘤中表达水平最高,与胶质瘤的恶性程度相关。2Caspase3在正常脑组织、低、高级别胶质瘤组三组间及组间两两比较表达有显着性统计学差异,随肿瘤恶性程度增高,Caspase3表达量减少,在低级别胶质瘤中表达水平最高,与胶质瘤的恶性程度相关。3Caspase3的表达下调与胶质瘤的恶性进展关系密切,Bcl2在胶质瘤的发生、发展过程中起重要作用。Caspase3和Bcl2可能成为胶质瘤预后判断的潜在指标。4Caspase3和Bcl2在胶质瘤中的表达存在相关性,随着Caspase3的表达下调,Bcl2的表达上调。

占今舜[6](2013)在《外源金属硫蛋白对热应激下奶牛淋巴细胞凋亡的影响》文中进行了进一步梳理为了研究外源性金属硫蛋白(MT)对热应激下体外培养奶牛淋巴细胞凋亡的影响。将屠宰获取的奶牛脾脏淋巴细胞随机分为4组,每组细胞培养液中MT的终浓度分别为0μg/ml(对照组)、0μg/ml第Ⅰ组)、140μg/ml第Ⅱ组)、210μg/ml(第Ⅲ组),同时置于细胞培养箱(37℃、5%CO2)中培养20h,之后同时置于43℃水浴锅中进行热应激处理1h,再回细胞培养箱中培养3h,然后进行各项指标的检测。结果如下:1)通过形态学观察和AO/EB染色观察,结果表明,添加MT可以有效缓解热应激对奶牛淋巴细胞的损伤,但缓解效果随MT浓度的增加而下降。2)MT对奶牛淋巴细胞凋亡指数和活性的影响结果:对照组的奶牛淋巴细胞凋亡指数与试验Ⅱ组差异不显着,试验Ⅲ组显着高于其他三组(P<0.01,),对照组和试验Ⅱ组显着高于试验Ⅰ组(P<0.01);试验Ⅰ组奶牛淋巴细胞活性着高于其他组(P<0.01),且试验Ⅰ~Ⅲ组的细胞相对成活率随着MT的含量增加而呈下降趋势。表明MT可以抑制奶牛淋巴细胞的凋亡,提高奶牛淋巴细胞存活率。4)MT对淋巴细胞内抗氧化指标的影响结果:第Ⅰ-Ⅲ组的CAT活性、SOD活性和GSH-Px活性均高于对照组,MDA含量均低于对照组。表明MT能够有效改善淋巴细胞的抗氧化能力。5)MT对淋巴细胞内与细胞凋亡相关基因表达的影响结果:试验Ⅰ~Ⅲ组的Bax基因相对表达量均显着低于对照组(P<0.01);试验Ⅰ~Ⅲ组Bcl-2基因的表达量均显着高于对照组(P<001,);p50基因的表达量为试验Ⅰ~Ⅲ组均显着低于对照组(P<0.01)。表明MT可以调节与细胞凋亡相关基因的表达。综上所述,添加MT可以降低奶牛淋巴细胞死亡率,改善奶牛淋巴细胞抗氧化性能,抑制奶牛淋巴细胞凋亡,添加终浓度为70μg/ml的MT效果最好。

佟美姣[7](2013)在《IBDV感染SPF雏鸡免疫器官细胞凋亡及相关基因表达变化》文中认为本研究以21日龄SPF雏鸡为研究对象,从细胞凋亡角度研究了传染性法氏囊病毒(IBDV)感染SPF雏鸡后引起鸡体免疫抑制作用及其机制。主要应用技术包括HE、TUNEL、实时荧光定量PCR以及免疫组织化学等,检测对照雏鸡与病毒感染雏鸡的法氏囊、胸腺及脾脏中细胞凋亡数,免疫器官细胞核浆比值,以及Bcl-2、Bax与p53基因表达量的动态变化。旨在全面、系统的揭示IBDV感染对SPF雏鸡上述免疫器官中细胞凋亡及相关基因的影响,为IBD防治提供新思路。研究结果发现:1、IBDV感染21日龄SPF雏鸡后,其法氏囊、胸腺及脾脏中凋亡细胞数量在病毒感染后37d显着或极显着高于相应对照雏鸡(P<0.01或P<0.05),且法氏囊中凋亡细胞数量明显多于其他两种免疫器官。在病毒感染后37d,病毒感染雏鸡法氏囊的细胞核浆比值显着或极显着小于对照雏鸡(P<0.01或P<0.05),其他两种免疫器官中细胞核浆比值未见统计学差异(P>0.05)。2、IBDV感染21日龄SPF雏鸡后,其上述免疫器官中Bcl-2阳性细胞数量在病毒感染后37d显着高于相应对照雏鸡(P<0.01);病毒感染后三种免疫器官中bcl-2mRNA表达量均有所增加,其中,法氏囊中bcl-2mRNA表达量在病毒感染后37d显着高于相应对照雏鸡(P<0.05),胸腺中bcl-2mRNA表达量在病毒感染后35d极显着高于对照雏鸡(P<0.01),脾脏中bcl-2mRNA表达量在病毒感染后3d显着高于相应对照雏鸡(P<0.05)。IBDV感染雏鸡后,其法氏囊中Bax阳性细胞数量在病毒感染后37d极显着高于相应对照雏鸡(P<0.01),胸腺与脾脏中Bax阳性细胞数量在病毒感染后328d均显着或极显着高于对照雏鸡(P<0.01或P<0.05);而法氏囊、胸腺、脾脏中bax mRNA表达量在病毒感染后37d较对照雏鸡明显增加(P<0.01或P<0.05)。病毒感染雏鸡后,其免疫器官Bcl-2/Bax值小于相应对照雏鸡,但未见统计学差异(P>0.05)。3、IBDV感染21日龄SPF雏鸡后,其胸腺与脾脏中p53mRNA表达除3d显着高于相应对照雏鸡(P<0.05)外,其余检测点均低于对照雏鸡,但无统计学异常(P>0.05)。法氏囊中p53mRNA表达量在病毒感染后57d显着或极显着增高(P<0.01或P<0.05),其他检测时间点均低于对照雏鸡(P>0.05)。

于子雯[8](2013)在《猴头多糖对S180荷瘤小鼠Bcl-2、Bax基因表达的影响》文中研究表明目的:检测猴头多糖(HEPS)的含量;研究猴头多糖对S180荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用;通过猴头多糖对S180荷瘤小鼠Bcl-2和Bax基因蛋白表达的影响实验研究,探讨其可能的抗肿瘤作用机制。方法:(1)本实验主要以Sevag法除去蛋白、水提醇沉方式纯化猴头菌粗多糖,并采取苯酚-浓硫酸比色法进行多糖的含量测定。(2)参照移植性肿瘤模型的造模方法,于超净工作台无菌条件下,将50只昆明种小鼠接种S180瘤株,建立模型,随机分为5组,分别为模型对照组(生理盐水0.1ml/10g/d;连续给药10d),猴头多糖高、中、低剂量组(200mg/kg/d;100mg/kg/d;50mg/kg/d;连续给药10d),环磷酰胺组(CTX30mg/kg/d;第1-5d给药)。接种后次日给药,正常喂食饮水,于第11d处死小鼠,称取体重、移植瘤重、胸腺及脾脏重量,计算抑瘤率、免疫器官(胸腺、脾脏)指数;将剥离的瘤体固定处理,免疫组化法检测瘤体组织中Bcl-2和Bax的基因表达水平结果:对猴头多糖的含量测定为68.89%;同模型对照组比较,猴头多糖高、中剂量组对S180荷瘤小鼠肿瘤组织的生长具有抑制作用(P<0.01),低剂量亦有明显差异性(P<0.05);抑瘤率分别为29.35%、41.50%、19.55%;猴头多糖高、中剂量组相较模型组、阳性对照组,均能明显提高免疫器官(胸腺、脾脏)指数(P<0.05);猴头多糖能明显下调S180荷瘤小鼠细胞Bcl-2的表达水平,升高Bax的表达水平结论:猴头多糖HEPS的含量测定结果为68.89%;猴头多糖HEPS对S180荷瘤小鼠的抑制作用显示,猴头多糖HEPS对S180荷瘤小鼠有明显的肿瘤抑制作用,能明显提高胸腺指数、脾脏指数;猴头多糖HEPS能明显下调肿瘤组织中Bcl-2的蛋白表达水平,升高Bax的蛋白表达水平

肖国丽[9](2013)在《新藤黄酸抗肿瘤作用及在家兔体内药代动力学研究》文中认为研究背景与目的:中药藤黄是藤黄科植物藤黄所分泌的干燥树脂,祖国医学上记载具有攻毒蚀疮、破血散结、止血、杀虫之功效,目前其抗肿瘤作用受到了高度关注。藤黄酸作为藤黄的有效成分之一,已有研究证实其具有明显的抗肿瘤作用,且目前已经研究到临床III期,在不久的将来有望成为一种抗肿瘤的新药。而新藤黄酸作为藤黄的另一有效成分,也有文献报道具有抗肿瘤作用,但对其抗肿瘤作用的研究不多,有关其药代动力学的研究甚少,对主要脏器的病理变化未见报道以及许多对药物应用较为重要的资料仍不完善,还需对其进行深入的研究和探讨。鉴于此,本文旨在进一步探讨新藤黄酸对S180细胞的抗肿瘤作用和人胃腺癌SGC-7901细胞的抗肿瘤机制,以及研究新藤黄酸经给药后对机体产生的毒副作用和在家兔体内的药代动力学特征,为新藤黄酸的开发和临床应用提供理论依据。方法与结果:1.新藤黄酸对S180细胞的抗肿瘤作用采用CCK-8法,测定新藤黄酸对S180细胞的体外抗增殖作用;结果表明新藤黄酸对体外培养的S180细胞具有明显的抗增殖作用,并且随着剂量的增加,抑制作用越明显,其IC50为1.54μg/mL。通过建立S180实体瘤模型,以抑瘤率为指标,考察新藤黄酸对S180肉瘤小鼠的体内抗肿瘤作用;实验结果表明,高剂量给药组抑瘤率达61.25%,具有明显的体内抗肿瘤作用。2.新藤黄酸对肿瘤小鼠主要脏器的病理变化采用HE染色法观察新藤黄酸给药后肿瘤小鼠的主要脏器的病理变化,实验结果显示新藤黄酸对肿瘤小鼠的肝、肾、肺等器官均有不同程度的损伤,肝细胞出现脂肪样变性,部分出现灶性坏死;肾小管细胞出现水肿、管腔出现红染现象;肺泡壁毛细血管扩张,有充血现象产生。3.新藤黄酸对SGC-7901细胞的抗肿瘤机制研究采用MTT法测SGC-7901细胞经不同浓度新藤黄酸作用后的抑制率,求出药物的半数抑制浓度,考察新藤黄酸对SGC-7901细胞的抗增殖作用,采用PI单染流式细胞术测定SGC-7901细胞经不同浓度新藤黄酸给药后细胞周期变化;采用蛋白免疫印迹法测定Bax.Bcl-2蛋白在SGC-7901细胞中的表达水平。结果表明,新藤黄酸在4.04~32.3μg/mL浓度范围内,对SGC-7901细胞具有明显的体外抗增殖作用,其IC50为14.93μg/mL;流式细胞仪结果显示新藤黄酸能影响细胞周期进展,使细胞周期阻滞在G0/G1期;免疫蛋白结果表明新藤黄酸能上调Bax和下调Bcl-2蛋白的表达,从而升高Bax/Bcl-2比值诱导细胞凋亡。4.新藤黄酸在家兔体内的药代动力学研究通过建立HPLC法测定新藤黄酸在家兔体内的血药浓度变化,并用药代动力学程序(DAS2.1.1)模拟出药代动力学参数,进行新藤黄酸的药代动力学研究,并探讨新藤黄酸在家兔体内的动态变化规律。结果显示,新藤黄酸在家兔体内的t1/2为23.38min,MRT为9.64min,消除迅速,体内滞留时间短,经过2.5h后在体内基本消除。结论:新藤黄酸对S180细胞具有明显的抗肿瘤作用,但在抗肿瘤的同时对小鼠的主要脏器有一定的损伤,对SGC-7901细胞具有抗增殖作用,能阻滞细胞周期进展,诱导肿瘤细胞凋亡。在家兔体内迅速消除,体内滞留时间短,无明显蓄积。

袁雪峰[10](2013)在《低剂量氯化镉诱导L929细胞增殖hormesis效应的研究》文中指出研究目的:观察氯化镉是否诱导小鼠成纤维(L929)细胞增殖的毒物兴奋(hormesis)效应;确定氯化镉诱导L929细胞增殖毒物兴奋剂量范围(hormetic zone);探讨氯化镉诱导细胞增殖的hormesis效应的机制和安全性。研究方法与研究内容:1噻唑蓝(MTT)比色法观察不同剂量氯化镉对体外培养24h的L929细胞增殖的影响,确定细胞增殖毒物兴奋效应的hormetic zone。2黄嘌呤氧化酶法检测不同剂量氯化镉染毒12h、24h诱导L929细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性变化。3荧光定量PCR方法检测不同剂量氯化镉24h诱导L929细胞中STAT3基因、P53基因、REVL3基因、BCL-2基因表达的变化。研究结果:1MTT试验中发现氯化镉染毒L929细胞24h后,2μmol/L以下剂量组的细胞相对增殖率与空白组的细胞相对增殖率基相同,差异没有显着性(p<0.05)。2μmol/L~15μmol/L剂量组细胞相对增殖率较空白对照组高(p<0.05),表现出细胞增殖的毒物兴奋效应。剂量高于20μmol/L时,L929细胞的相对增殖率较空白对照组的相对增殖率下降,表现出细胞毒性作用。2SOD活力检测结果表明,经不同剂量氯化镉12h、24h染毒后的L929细胞中SOD酶活性整体呈现倒U型的剂量-反应效应,在0.01μmol/L~15μmol/L剂量组L929细胞内SOD酶活性高于空白对照组。在相对增殖率最高的剂量5μmol/L SOD活性水平最高。在相对增殖率低于空白组的20μmol/L剂量,SOD活性水平下降。3STAT3基因、P53基因、REVL3基因、BCL-2基因在0.01μmol/L~15μmol/L剂量组,上述基因的表达量均高于空白对照组(p>0.05),各基因均在5μmol/L剂量附近表达水平达到最高,在出现相对增殖率下降的20μmol/L剂量表达量低于空白对照组。在0.01μmol/L~20μmol/L剂量范围内上述基因表达水平整体呈现先增加后降低趋势。结论:1氯化镉能诱导L929细胞产生细胞增殖的hormesis效应,引起毒物兴奋效应的剂量范围为2μmol/L~15μmol/L。当剂量大于20μmol/L细胞无法完全代偿体内的氧化应激水平,相对存活率显着下降,表现出剂量-反应关系。2氯化镉诱导L929细胞增殖的毒物兴奋效应不一定为有益效应,2μmol/L~15μmol/L氯化镉不一定是L929细胞的安全剂量。在细胞增殖毒物兴奋效应开始出现之前的剂量范围,L929细胞SOD活性水平提高,提示该剂量已经对细胞有一定的毒性,细胞代偿性抵御氯化镉的氧化应激损伤。在毒物兴奋效应曲线下降部分对应的剂量, SOD活性下降,提示细胞开始不能完全代偿氯化镉引起的氧化应激损伤,已经产生了细胞毒性。3诱导增殖的氯化镉剂量范围不一定为L929细胞的安全剂量。在0.01μmol/L~15μmol/L之间剂量,原癌基因STAT3基因表达的上调,推测氧化应激过程导致细胞内细胞信号途径的改变,细胞增殖的加快可能与之相关联,一定程度预示着肿瘤发生的可能性; P53抑癌基因表达均上调表明在细胞代偿性抵御氧化应激损伤情况下,细胞提高P53基因表达调控细胞周期对细胞进行DNA修复; REVL3基因表达上调表明细胞通过跨损伤修复途径对细胞内受损的DNA进行修复,这种修复增强导致经修复后存活细胞的突变积累; BCL-2基因表达的上调一定程度上抑制了P53基因对细胞周期的调控作用,对细胞的凋亡起到抑制作用,可能延长了带有受损DNA细胞的寿命,可能间接促进肿瘤的发生。

二、毒蝇碱型乙酰胆碱受体经Ras-ERK-1/2信号通路上调Bcl-2和磷酸化Bad表达(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、毒蝇碱型乙酰胆碱受体经Ras-ERK-1/2信号通路上调Bcl-2和磷酸化Bad表达(论文提纲范文)

(1)miR-383在急性冷暴露诱导大鼠肝脏氧化应激中的作用(论文提纲范文)

英文缩写词表
摘要
Abstract
1 文献综述
    1.1 冷应激研究概况
    1.2 miRNA功能研究概况
    1.3 Bcl2 抗凋亡功能的研究概括
    1.4 冷应激与miRNA
    1.5 目的与意义
2 材料与方法
    2.1 急性冷暴露对大鼠肝脏组织氧化应激指标和凋亡蛋白的影响
        2.1.1 主要仪器设备
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 实验动物与分组
        2.1.4 实验动物处理与肝脏组织采集
        2.1.5 大鼠肝脏组织中脂质过氧化(MDA)的检测
        2.1.6 大鼠肝脏组织中总谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的检测
        2.1.7 蛋白质免疫印迹
    2.2 急性暴露对大鼠肝脏组织中miR-383 表达的影响
        2.2.1 主要仪器和试剂
        2.2.2 主要试剂
        2.2.3 实验动物与分组
        2.2.4 样品采集
        2.2.5 qRT-PCR
        2.2.6 miR-383 的生物学功能预测
    2.3 miR-383 对氧化损伤大鼠肝细胞的影响
        2.3.1 主要仪器设备
        2.3.2 大鼠肝细胞系(BRL)的培养和处理
        2.3.3 miRNA转染和大鼠肝细胞分组
        2.3.4 大鼠肝细胞总RNA的提取及荧光定量PCR检测
        2.3.5 大鼠肝细胞凋亡率的检测
        2.3.6 ROS检测
        2.3.7 大鼠肝细胞线粒体膜电位的检测
        2.3.8 miR-383 靶点的验证
    2.4 统计分析
3 结果与分析
    3.1 急性冷暴露对大鼠肝脏组织氧化应激指标和凋亡蛋白的影响
        3.1.1 急性冷暴露对大鼠肝脏组织中氧化应激指标的影响
        3.1.2 急性冷暴露对大鼠肝脏组织中凋亡蛋白的影响
    3.2 急性冷暴露对大鼠肝脏组织中miR-383 表达的影响
        3.2.1 miR-383 在急性冷暴露大鼠肝脏组织中表达情况
        3.2.2 miR-383 的生物学功能分析
    3.3 miR-383 对氧化应激大鼠肝细胞的影响
        3.3.1 miR-383 在大鼠肝细胞中上调和下调条件的确定
        3.3.2 过氧化氢刺激对大鼠肝脏细胞凋亡率和ROS水平的影响
        3.3.3 过氧化氢刺激对大鼠肝细胞中miR-383 表达的影响
        3.3.4 抑制miR-383 的表达后,过氧化氢对凋亡相关指标的影响
        3.3.5 抑制miR-383 的表达后,过氧化氢对氧化应激指标的影响
        3.3.6 miR-383 靶基因的确定
4 讨论
    4.1 急性冷暴露对大鼠肝脏组织氧化应激指标和凋亡蛋白的影响
    4.2 急性冷暴露对大鼠肝脏组织中mi R-383 表达的影响
    4.3 mi R-383 对氧化应激大鼠肝细胞的影响
5 结论
参考文献
致谢
个人简历

(2)针刺对抑郁模型大鼠前额叶皮质ERK1/2-CREB-BDNF信号通路的影响(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
符号说明
第一部分 文献综述
    综述一 抑郁症发病机制的研究进展
        1 抑郁症的病因
        2 抑郁症的治疗
        3 抑郁症的主要生物化学发病机制
        4 小结
        参考文献
    综述二 针灸治疗抑郁症的研究进展
        1 针灸治疗抑郁症的临床研究
        2 针灸治疗抑郁症的机制研究
        3 小结
        参考文献
    综述三 ERK1/2信号通路与抑郁症的关系研究进展
        1 ERK1/2概述
        2 ERK1/2信号通路对神经细胞的影响
        3 ERK1/2信号通路在抑郁症中的变化
        4 ERK1/2信号通路参与抗抑郁治疗的作用机制
        5 小结
        参考文献
前言
第二部分 实验研究
    实验一 针刺对慢性应激抑郁模型大鼠行为学的影响
        1 材料
        2 方法
        3 结果
        4 小结
    实验二 针刺对慢性应激抑郁模型大鼠前额叶皮质ERK1/2-CREB-BDNF信号通路的影响
        1 材料
        2 方法
        3 结果
        4 小结
    讨论部分
        1 抑郁模型的选择
        2 脑区的选择
        3 抑郁症与“百会”、“印堂”穴
        4 阳性药物的选择
        5 实验分组意义
        6 各组大鼠行为学的变化情况及意义
        7 各组大鼠前额叶皮质ERK1/2信号通路关键指标的变化及意义
        8 小结
结语
    1 结论
    2 创新性
    3 存在问题与不足
参考文献
致谢
在学期间主要研究成果

(3)硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞放射损伤分子机制的研究(论文提纲范文)

中文摘要
Abstract
引言
第一部分 硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞细胞周期的影响
    1.1 实验材料
        1.1.1 主要试剂与耗材
        1.1.2 主要溶液的配制
    1.2 实验方法
        1.2.1 细胞冻存、复苏、培养及照射
        1.2.2 实验内容
    1.3 实验结果
        1.3.1 硫酸镁对照后HUVEC细胞周期的影响
        1.3.2 流式细胞仪检测Cyclin-B1表达情况
        1.3.3 免疫印迹法检测Cyclin-B1蛋白表达
    1.4 讨论
第二部分 硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞细胞凋亡的影响
    2.1 实验材料
        2.1.1 主要试剂及耗材
        2.1.2 主要溶液的配制
        2.1.3 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞冻存、复苏、培养及照射
        2.2.2 实验内容
    2.3 实验结果
        2.3.1 硫酸镁对照射后HUVEC细胞凋亡的影响
        2.3.2 免疫印迹法检测P53蛋白表达
        2.3.3 免疫印迹法检测Bcl-2 蛋白表达
        2.3.4 Bcl-2 蛋白与β-actin蛋白的比值
        2.3.5 照射后HUVEC中Bcl-2 mRNA,硫酸镁对其表达变化影响
    2.4 讨论
第三部分 硫酸镁对X射线照射引起的HUVEC中IκB-α表达的影响
    3.1 实验材料
        3.1.1 主要试剂及耗材
        3.1.2 主要溶液的配制
        3.1.3 主要仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 细胞冻存、复苏、培养及照射
        3.2.2 实验内容
    3.3 实验结果
        3.3.1 免疫印迹法检测IκB-α蛋白表达
        3.3.2 IκB-α蛋白与β-actin蛋白的比值
        3.3.3 硫酸镁对照射后HUVEC中IκB-α mRNA表达的影响
    3.4 讨论
结论
参考文献
文献综述
    参考文献
中英文对照缩略表
攻读硕士学位期间发表和待发表文章
致谢

(4)饱和氢气生理盐水对吸入性肺损伤的保护作用(论文提纲范文)

中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
1.1 对象和方法
    1.1.1 实验动物
    1.1.2 实验试剂
    1.1.3 实验仪器
    1.1.4 吸入性损伤模型的制备
    1.1.5 氢气饱和生理盐水的制备
    1.1.6 实验方法
    1.1.7 统计学分析
1.2 结果
    1.2.1 肺组织病理结构观察
    1.2.2 各组大鼠血清TNF-α含量的比较
    1.2.3 各组大鼠肺组织MDA、SOD的比较
    1.2.4 各组大鼠肺组织细胞NF-κB活性的比较
    1.2.5 各组大鼠肺组织细胞凋亡情况的比较
1.3 讨论
    1.3.1 大鼠烟雾吸入性损伤实验模型的致伤效果评估
    1.3.2 吸入性肺损伤时肺组织电镜下超微结构改变及其病理生理变化
    1.3.3 氢气的选择性抗氧化作用
    1.3.4 氢气的抗炎作用
    1.3.5 氢气的抗凋亡作用
结论
参考文献
发表文献和参加科研情况说明
附录
综述 氢气对肺损伤的保护效应及相关机制
    综述参考文献
致谢

(5)Bcl2、Caspase3在人脑胶质瘤中的表达及意义(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
前言
材料与方法
结果
附图
附表
讨论
结论
参考文献
综述 细胞凋亡调控因子 Bcl2、Caspase3 与肿瘤关系研究进展
    参考文献
致谢
个人简历

(6)外源金属硫蛋白对热应激下奶牛淋巴细胞凋亡的影响(论文提纲范文)

摘要
Abstract
第一部分 文献综述
    1 金属硫蛋白的概述
        1.1 MT的结构及其理化性质
        1.2 MT的诱导
        1.3 MT的生物功能
    2 细胞培养技术的概述
        2.1 在病毒学上的应用
        2.2 在肿瘤学上的应用
        2.3 在药理学上的应用
        2.4 在动物上的应用
        2.5 其他方面研究
    3 细胞凋亡的概述
        3.1 线粒体在细胞凋亡中的作用
        3.2 细胞色素C在细胞凋亡中的作用
        3.3 Bcl-2家族在细胞凋亡中的作用
        3.4 Caspase家族在细胞凋亡中的作用
    4 热应激与细胞凋亡
    5 研究目的与意义
第二部分 材料与方法
    1 材料
        1.1 主要仪器设备与试剂
        1.2 淋巴细胞的提取、处理与培养
    2 试验方法
        2.1 淋巴细胞凋亡的形态学观察
        2.2 淋巴细胞活性的检测
        2.3 淋巴细胞内抗氧化指标的检测
        2.4 主要基因的检测
    3 数据的处理
第三部分 结果与分析
    1 淋巴细胞形态学观察结果
    2 AO/EB染色观察结果
    3 奶牛淋巴细胞活性的检测结果
    4 淋巴细胞内抗氧化指标的检测结果
    5 细胞凋亡基因Bax、Bcl-2、p50的检测结果
第四部分 讨论与结论
    1 MT对热应激下淋巴细胞形态的影响
    2 MT对热应激下淋巴细胞细胞活性和凋亡率的影响
    3 MT对热应激下淋巴细胞内抗氧化功能的影响
    4 MT对热应激下淋巴细胞内Bax、Bcl-2基因表达的影响
    5 MT对热应激下淋巴细胞内p50基因表达的影响
    6 结论
    7 创新点
    8 有待进一步研究的问题
参考文献
致谢
个人简历

(7)IBDV感染SPF雏鸡免疫器官细胞凋亡及相关基因表达变化(论文提纲范文)

摘要
Abstract
1 引言
    1.1 传染性法氏囊病研究进展
    1.2 传染性法氏囊病毒概述
        1.2.1 IBDV 基因结构
        1.2.2 IBDV 蛋白组成
        1.2.3 IBDV 对理化因素的抵抗力
        1.2.4 IBDV 致病性和流行病学
        1.2.5 IBDV 在感染雏鸡体内的分布
        1.2.6 IBDV 感染动物所致的病理变化
    1.3 IBDV 感染与细胞凋亡
        1.3.1 细胞凋亡概述
        1.3.2 IBDV 诱导细胞凋亡
    1.4 Bcl-2 家族、p53 与细胞凋亡的关系
        1.4.1 Bcl-2 家族与细胞凋亡
        1.4.2 p53 基因与细胞凋亡
    1.5 本项目研究目的及意义
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 IBDV 毒株
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 实验动物分组及处理
        2.2.2 待检材料采取及处理
        2.2.3 检测指标及方法
    2.3 数据处理
3 结果与分析
    3.1 IBDV 感染 SPF 雏鸡免疫器官细胞凋亡的变化
        3.1.1 IBDV 感染 SPF 雏鸡免疫器官凋亡细胞数量变化
        3.1.2 IBDV 感染 SPF 雏鸡免疫器官凋亡细胞超微结构变化
        3.1.3 IBDV 感染 SPF 雏鸡免疫器官细胞核浆比值变化
    3.2 IBDV 感染 SPF 雏鸡免疫器官中 Bcl-2 与 Bax 阳性细胞数量变化
        3.2.1 IBDV 感染 SPF 雏鸡免疫器官中 Bcl-2 阳性细胞数量变化
        3.2.2 IBDV 感染 SPF 雏鸡免疫器官中 Bax 阳性细胞数量变化
        3.2.3 IBDV 感染 SPF 雏鸡免疫器官中 Bcl-2/Bax 值变化
    3.3 SPF 雏鸡 bcl-2、bax 与 p53 mRNA 表达 Real Time PCR 检测方法的建立
        3.3.1 总 RNA 提取
        3.3.2 雏鸡免疫器官 bcl-2、bax、p53 与β-actin 目的片段 RT-PCR 扩增结果
        3.3.3 雏鸡免疫器官 bcl-2 、bax 、p53 与β-actin mRNA 表达
        3.3.4 重组质粒 PCR 鉴定
        3.3.5 bcl-2、bax、p53 与β-actin 基因扩增片段序列测定
        3.3.6 bcl-2、bax、p53 与β-actin 基因标准曲线绘制
        3.3.7 SPF 雏鸡免疫器官中 bcl-2、bax 与 p53 mRNA 含量的检测
    3.4 IBDV 感染 SPF 雏鸡免疫器官中凋亡相关基因变化
        3.4.1 IBDV 感染 SPF 雏鸡免疫器官中 bcl-2 mRNA 表达变化
        3.4.2 IBDV 感染 SPF 雏鸡免疫器官中 bax mRNA 表达变化
        3.4.3 IBDV 感染 SPF 雏鸡免疫器官中 bcl-2/bax mRNA 表达比值变化
        3.4.4 IBDV 感染 SPF 雏鸡免疫器官中 p53 mRNA 表达的变化
4 讨论
    4.1 IBDV 感染对雏鸡免疫器官中细胞凋亡的影响
    4.2 IBDV 感染对雏鸡免疫器官中凋亡相关基因的影响
        4.2.1 IBDV 感染对雏鸡免疫器官中 Bcl-2 与 Bax 表达的影响
        4.2.2 IBDV 感染对雏鸡免疫器官中 p53 表达的影响
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术文

(8)猴头多糖对S180荷瘤小鼠Bcl-2、Bax基因表达的影响(论文提纲范文)

缩略语表
摘要
ABSTRACT
前言
文献综述
    1 肿瘤病因学的研究现状
        1.1 现代医学对肿瘤发生机制的认识
        1.2 祖国医学对肿瘤病因机制的认识
    2 细胞凋亡与调控基因
        2.1 细胞凋亡
        2.2 Bcl-2家族
    3 中药多糖的抗肿瘤作用研究
        3.1 对肿瘤细胞的直接抑杀作用
        3.2 中药多糖调节机体的免疫机制而间接抑制肿瘤
实验研究
    1. 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 瘤株
        1.3 实验用药
        1.4 实验设备
        1.5 主要试剂
    2. 实验方法
        2.1 猴头菌粗多糖的纯化及含量测定
        2.2 猴头多糖的抑制肿瘤实验
        2.3 统计学方法
    3. 实验结果
        3.1 猴头菌多糖的含量测定结果
        3.2 猴头多糖的抗肿瘤作用实验研究结果
讨论
    1 猴头多糖含量的测定
    2 绘制标准曲线时,苯酚溶液的浓度选择
    3 猴头多糖对S180荷瘤小鼠体内抑瘤率的影响
        3.1 移植性肿瘤模型的评价
        3.2 动物的选择及分组情况
        3.3 瘤株接种情况
    4 Bcl-2、Bax与肿瘤
    5. 实验结果分析
结论
致谢
参考文献
附图
个人简历

(9)新藤黄酸抗肿瘤作用及在家兔体内药代动力学研究(论文提纲范文)

摘要
Abstract
引言
第一章 文献研究
    1 中药的抗肿瘤研究
        1.1 中药抗肿瘤有效成分
        1.2 国内抗肿瘤中药的应用模式
    2 中药抗肿瘤作用机制
        2.1 作用于肿瘤细胞周期
        2.2 诱导肿瘤细胞凋亡
        2.3 促进肿瘤细胞分化
        2.4 调节细胞信号传导通路
        2.5 逆转多药耐药和抑制微管聚合
        2.6 抑制肿瘤血管生成
        2.7 调节免疫作用
    3 中药药动学研究概况
        3.1 中药药动学研究现状
        3.2 中药药动学的研究方法
        3.3 中药药动学新学说
    4 新藤黄酸的研究概况
        4.1 新藤黄酸的来源
        4.2 新藤黄酸理化性质
        4.3 新藤黄酸的提取分离研究
        4.4 新藤黄酸的抗肿瘤研究
        4.5 新藤黄酸抗肿瘤作用机制研究
第二章 新藤黄酸对S180的抗肿瘤作用研究
    1 新藤黄酸对S180的体外抗肿瘤作用
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
        1.3 实验结果
        1.4 讨论
    2 新藤黄酸对S180的体内抗肿瘤作用
        2.1 实验材料
        2.2 实验方法
        2.3 实验结果
        2.4 讨论
    3 新藤黄酸对肿瘤小鼠的主要脏器病理变化
        3.1 实验材料
        3.2 实验方法
        3.3 实验结果
        3.4 讨论
第三章 新藤黄酸对SGC-7901的抗肿瘤作用机制研究
    1 新藤黄酸对体外培养人胃腺癌SGC-7901细胞体外抗增殖作用
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
        1.3 实验结果
        1.4 讨论
    2 新藤黄酸对体外培养人胃腺癌SGC-7901细胞周期的影响
        2.1 实验材料
        2.2 实验方法
        2.3 实验结果
        2.4 讨论
    3 新藤黄酸对体外培养人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡相关蛋白的影响
        3.1 实验材料
        3.2 实验方法
        3.3 实验结果
        3.4 讨论
第四章 新藤黄酸在家兔体内的药代动力学研究
    1 实验材料
        1.1 药物试剂
        1.2 实验仪器
        1.3 实验动物
    2 实验方法
        2.1 药物配制
        2.2 给药方案
        2.3 血样采集
        2.4 血浆样品处理
        2.5 血药浓度测定方法建立
        2.6 血药浓度测定
        2.7 数据处理
    3 实验结果
        3.1 方法的专属性
        3.2 标准曲线、线性范围和检测限
        3.3 精密度和方法回收率
        3.4 提取回收率
        3.5 冻融稳定性
        3.6 药动学结果
    4 讨论
结语
参考文献
附录
    附录1:新藤黄酸紫外光谱图
    附录2:英文缩略语
在校期间发表论文情况
致谢

(10)低剂量氯化镉诱导L929细胞增殖hormesis效应的研究(论文提纲范文)

中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 低剂量毒物的 hormesis 效应
    1.2 氧化应激
    1.3 肿瘤的发生
    1.4 实验研究
2 实验材料和方法
    2.1 实验材料
    2.2 试剂配制
    2.3 实验方法和步骤
3 实验结果及分析
    3.1 MTT 法检测 Cdcl2诱导 L929 细胞增殖
    3.2 氯化镉对 L929 细胞的损伤作用
    3.3 STAT3、P53、BCL-2、REVL3 基因的表达
4 讨论
    4.1 MTT 法检测氯化镉诱导 L929 细胞增殖的 hormesis
    4.2 氯化镉诱导细胞增殖氧化应激水平
    4.3 氯化镉诱导细胞增殖 STAT3、P53、BCL-2、REVL3 基因表达
5 结论
参考文献
中英文缩略词表
致谢
在读期间发表的论文

四、毒蝇碱型乙酰胆碱受体经Ras-ERK-1/2信号通路上调Bcl-2和磷酸化Bad表达(论文参考文献)

  • [1]miR-383在急性冷暴露诱导大鼠肝脏氧化应激中的作用[D]. 臧树成. 黑龙江八一农垦大学, 2019(09)
  • [2]针刺对抑郁模型大鼠前额叶皮质ERK1/2-CREB-BDNF信号通路的影响[D]. 许明敏. 北京中医药大学, 2016(08)
  • [3]硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞放射损伤分子机制的研究[D]. 孙阳. 苏州大学, 2016(02)
  • [4]饱和氢气生理盐水对吸入性肺损伤的保护作用[D]. 刘琪. 天津医科大学, 2014(01)
  • [5]Bcl2、Caspase3在人脑胶质瘤中的表达及意义[D]. 孙志敏. 河北医科大学, 2014(09)
  • [6]外源金属硫蛋白对热应激下奶牛淋巴细胞凋亡的影响[D]. 占今舜. 湖南农业大学, 2013(07)
  • [7]IBDV感染SPF雏鸡免疫器官细胞凋亡及相关基因表达变化[D]. 佟美姣. 东北农业大学, 2013(10)
  • [8]猴头多糖对S180荷瘤小鼠Bcl-2、Bax基因表达的影响[D]. 于子雯. 黑龙江中医药大学, 2013(S1)
  • [9]新藤黄酸抗肿瘤作用及在家兔体内药代动力学研究[D]. 肖国丽. 广州中医药大学, 2013(S1)
  • [10]低剂量氯化镉诱导L929细胞增殖hormesis效应的研究[D]. 袁雪峰. 暨南大学, 2013(01)


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