毛细管电泳法测定尘螨的主要过敏原 Derf2

一、毛细管电泳测定粉尘螨主要变应原Derf2含量(论文文献综述)

王燕[1](2020)在《新疆地区变应性鼻炎吸入变应原谱及相关拷贝数变异分析》文中提出目的:通过对新疆地区近13年变应原皮肤点刺试验结果回顾性分析及对变应性鼻炎家系的全基因组测序和变应性鼻炎病例对照组拷贝数变异分析,了解了本区变应性鼻炎患者变应原谱的分布及变化情况,探讨了基因拷贝数变异与变应性鼻炎的相关性。方法:第一部分:回顾性分析了2007年1月-2019年12月间5019例患者的皮肤点刺试验结果,研究分析了不同变应原在13年间的分布情况及变化规律以及在不同性别、年龄、族别患者中的分布情况。第二部分:对1个新疆地区汉族家系(3个变应性鼻炎样本,2个正常样本)进行了低深度全基因组测序,并采用了生物信息学的方法及拷贝数变异片段区域的基因功能寻找筛选候选拷贝数变异;第三部分:收集汉族变应性鼻炎患者696例,汉族对照528例,对其外周血提取DNA后,采用AccucopyTM拷贝数检测技术对13个候选基因拷贝数变异进行检测:8_1、8_2、9_1、9_2、ADAM8、CCL3L1、IL1RL1、MUC5B、MUC5AC、NME7、ORMDL3、SERPINA1_1、SERPINA1_2。分析13个候选基因拷贝数变异在病例对照组中的分布情况及其与变应性鼻炎的相关性。结果:第一部分:1)14种变应原在不同时间的分布明显不同,差异有统计学意义(P<0.05),变应原阳性率随年份不同而变化,但藜属在13年间基本处于本区变应原的首位。14种变应原总体阳性率分别是藜属48.2%、车前草33.2%、艾蒿33.1%、豚草32.7%、刺槐32.1%、梯牧草32%、粉螨31.5%、杨树30.3%、尘螨29.6%、蟑螂26.9%、猫上皮11.6%、特异青霉菌9.4%、狗上皮8.5%、交链孢霉7.7%;2)不同性别间的比较,男性2140例(42.6%),女性2879例(57.4%)。艾蒿、藜属、豚草、车前草、梯牧草、刺槐、交链孢霉、特异青霉、尘螨、粉螨、蟑螂、杨树、猫上皮的男性阳性率明显高于女性,差异有统计学意义(P<0.05)。狗上皮的阳性率在男性女性之间分布均无统计学差异(P>0.05);3)不同年龄之间的比较,除狗上皮阳性率在不同年龄间差异无统计学意义(P=0.288)外,其余13种:艾蒿、藜属、豚草、车前草、梯牧草、刺槐、杨树、交链孢霉、特异青霉、猫上皮、尘螨、粉螨、蟑螂在不同年龄间变应原阳性率差异均具有统计学意义(P<0.05);4)不同民族间的比较,汉族3850例、维吾尔族694例、哈萨克族270例、回族113例、其他民族92例,交链孢霉、特异青霉、猫上皮、尘螨、粉螨、蟑螂阳性率在不同民族间分布,差异无统计学意义(P>0.05)。艾蒿、藜属、豚草、车前草、梯牧草、刺槐、杨树、狗上皮在不同民族间变应原阳性率差异具有统计学意义(P<0.05)。第二部分:通过对家系全基因组测序后,总共发现了1360个拷贝数变异,其中3个变应性鼻炎样本携带而2正常个体未携带,筛选出62个拷贝数变异,将测序质量低、结果不可靠;拷贝数变异片段范围内没有功能基因的以及拷贝数变异内基因与变应性鼻炎没有明确关系的剔除,最终得到与变应性鼻炎相关的候选拷贝数变异;第三部分:8_1、8_2、9_1、9_2、ADAM8、CCL3L1、IL1RL1、MUC5B、NME7、ORMDL3、SERPINA1_1、SERPINA1_2的拷贝数在病例对照组的分布无明显差异(P>0.05).MUC5AC在病例对照组中差异分布具有统计学意义(P=0.002)。结论:第一部分:新疆地区变应原分布随时间不同在不断变化,主要变应原以草本类为主,变应原在不同性别、年龄、族别变应性鼻炎患者中的分布不同。第二部分:经过测序筛选共得到13个候选拷贝数变异,分别是8_1、8_2、9_1、9_2、ADAM8、CCL3L1、IL1RL1、MUC5B、MUC5AC、NME7、ORMDL3、SERPINA1_1、SERPINA1_2;第三部分:MUC5AC基因拷贝数变异与变应性鼻炎存在相关性。同时CCL3L1在新疆汉族人群中的拷贝数范围是1-10。

李梦银[2](2019)在《鱼类主要过敏原小清蛋白金磁免疫层析试纸条的研制》文中认为鱼类是人类重要的食物来源,不仅味道鲜美而且营养丰富。新鲜鱼肉中富含15%20%的全价蛋白,1%10%的脂肪,并富含重要的不饱和脂肪酸。我国是水产养殖大国,占世界养殖水产品产量的70%以上,淡水渔业总面积达1760万公顷占国土面积的1.8%。鱼类及其制品含有丰富的营养,同时也是FAO及WHO认定的导致人类过敏的八大类食物之一。其中鱼肉中的小清蛋白(parvalbumin,PV)被视为主要的过敏原,因此开展针对鱼类及其制品中小清蛋白强特异性、高灵敏度的检测具有重要的理论和现实意义。本文研究主要包括小清蛋白单克隆抗体的制备及鉴定、金磁复合纳米微粒的制备以及小清蛋白金磁免疫层析检测方法的建立。具体研究内容如下:1.小清蛋白单克隆抗体的制备以高纯度的PV免疫7只BALB/c小鼠,利用间接ELISA方法测小鼠抗血清效价,获取效价最高的小鼠。取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,获得杂交瘤细胞。间接ELISA方法筛选阳性孔,有限稀释法进行3次亚克隆得到分泌同质的杂交瘤细胞株。采用小鼠体内诱生腹水法大量制备单抗。采用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单抗腹水,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定单克隆抗体纯度,并采用Western-blotting、考马斯亮蓝染色法分别检测单抗特异性及抗体浓度,结果显示PV单克隆抗体具备良好的特异性,最后通过商业化试剂盒检测PV单抗亚类为IgG1型。2.小清蛋白金磁免疫层析试纸条的定性检测采用一锅法制备氨基化的磁性微粒Fe3O4-PEI,之后在其表面包覆两层Au颗粒,制备金磁(Fe3O4/Au)复合微粒,金磁复合微粒形貌呈圆形,粒径均一,粒径约80nm。金磁复合微粒与小清蛋白单克隆抗体进行偶联,制备金磁免疫探针,并优化了金磁探针的偶联的最佳pH值、抗体用量、反应时间、缓冲液体系等条件。按照试纸条组装方式组装得到小清蛋白金磁探针免疫层析试纸条,并探究样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜的材料选择、处理液最佳配方及最佳处理条件、T/C线最佳划线浓度等试纸条组装条件优化。并进行标准品的检测,结果表明所制备的金磁免疫层析试纸条具有良好的定性功能,可视化检测最低检测浓度为4ng/ml,检测特异性及检测稳定性良好。3.小清蛋白金磁免疫层析试纸条定量检测通过建立T/C比值的定量方法提高金磁金免疫层析试纸条的检测灵敏度;同时结合现实工作的实际情况,从操作简便性、前处理的时间消耗以及回收率等角度比较了7种鱼肉样品前处理方法优缺点。在此基础上建立了金磁免疫层析试纸条T/C比值法定量分析鱼肉中小清蛋白的快速检测方法。

孙登瑶[3](2018)在《淡水鱼过敏原PV的消减研究及低敏性食品的开发》文中研究表明鱼类是人类重要的食物来源,不仅味道鲜美而且营养丰富。新鲜鱼肉中富含15%20%的全价蛋白,1%10%的脂肪,并富含重要的不饱和脂肪酸。我国是水产养殖大国,占世界养殖水产品产量的70%以上,淡水渔业总面积达1760万公顷,占国土面积的1.8%。我国海关总署统计,2016年我国水产品进出口总量为827.91万吨,进出口总额301.12亿美元。可见渔业的发展,给国家经济带来巨大的的效益。但是鱼类及其制品是FAO和WHO认定的会导致过敏的八大类食物过敏原之一。其中小清蛋白(parvalbumin,PV)被认定为鱼类致敏蛋白,它是一种钙离子结合的酸性蛋白。因此开展对小清蛋白分离纯化、低敏性处理以及低敏性开发具有极其重要的理论和现实意义。本研究主要包括小清蛋白的分离纯化及鉴定、小清蛋白多克隆抗体的制备及低敏性处理、低敏性食品的开发三个部分。具体研究内容如下:1、小清蛋白的分离纯化研究选取7种抽提液对新鲜鱼糜进行初步抽提;使用热处理、硫酸铵分级盐析、透析等方法提取纯化小清蛋白。并通过单因素实验,对提取过程中最佳pH、料液比、盐析硫酸铵浓度进行探究。最终确定的最佳条件为:抽提液组成为10mM Tris-HCl、0.02mM PMSF,pH为8.0,料液比为1:20,一级盐析浓度为60%。经计算得知小清蛋白浓度约占鱼肉0.3%左右。通过SDS-PAGE蛋白电泳鉴定小清蛋白分子大小在12kD左右,氨基酸组成分析知小清蛋白氨基酸组分以Ala、Asp、Lys为主,且在四大家鱼间具有较强同源性。2、小清蛋白单克隆抗体的制备及其低敏性处理研究设计两组小鼠方案,每组4只。第1组初免PV量为100ug/只,第2组为200ug/只,后续免疫剂量相同。间接ELISA法测小鼠抗血清效价,最高小鼠效价为1:256000。棋盘法确定多抗最佳工作浓度为:包被抗原浓度2.5g/mL,多克隆抗体稀释64000倍。对PV进行高温高压处理不同时间后,酶联免疫吸附检测结果显示随着处理时间延长,PV在100℃致敏性几乎保持不变、121℃降低55.65%。美拉德反应处理中,葡萄糖组致敏性降低81.73%,木糖组致敏性降低84.23%;添加茶叶提取物茶多酚,PV转移到沉淀中,致敏性降低不明显。褐变程度结果显示,随着美拉德反应的进行,褐变程度越来越大。通过圆二色谱得知二级结构变化:α-螺旋比例降低,β-折叠比例升高,β-转角比例降低,无规则卷曲比例降低,可以推断小清蛋白的二级空间结构受到了不同程度的破坏。3.低敏性产品的开发结合产品特色与我国饮食风格。选取鱼丸作为低敏性开发的产品在上一章研究的基础上采用复合低敏处理手段制备低敏性鱼丸。使用酶联免疫吸附法检测致敏性变化情况,使用SDS-PAGE蛋白电泳鉴定鱼丸浸提上清蛋白含量和分子大小的变化。结果显示:木糖处理鱼糜复合高温高压处理,致敏性降低81.88%,葡萄糖处复合高温高压处理,致敏性降低34.64%,茶多酚添加复合高温高压处理至敏性降低20.11%。采用BALB/c小鼠致敏模型证实,高温高压处理结合美拉德反应制备的鱼丸与对照组相比,可以减轻小鼠过敏症状,表明采用高温高压结合美拉德反应制备的鱼丸具有较低的致敏性。

邹雪艳,董烁,李宾杰,赵彦保[4](2014)在《纳米材料在蛋白质分离中的应用》文中提出蛋白质的分离技术不仅在药物检测和制药工程中具有重要意义,而且还是生化工程和蛋白质分析的一个研究热点.纳米材料具有许多与众不同的特性,广泛应用于化工、生物、医药、航天等多个领域,被认为是21世纪最有前途的材料.本文作者从非金属氧化物纳米材料、非金属单质纳米材料、金属氧化物纳米材料、金属单质纳米材料、纳米聚合物、纳米复合材料等方面综述了纳米材料在蛋白质分离方面的应用现状,总结了其在蛋白质分离中的优缺点,并就其在蛋白质固定和分离领域的应用前景进行了展望.

邹雪艳[5](2013)在《生物功能化微纳米材料的制备与蛋白质的亲和分离》文中研究表明本文采用SiO2、FeOOH及Fe3O4三种微纳米材料为载体,对其表面进行生物功能化,并利用它们对谷胱甘肽S-转移酶(GST)及六聚组氨酸为标签的(His-tagged)蛋白进行分离、纯化,采用多种现代分析手段对所得样品的形貌、结构及性能进行了表征,并对其亲和分离蛋白质的能力进行了研究。本论文的主要研究内容及结论如下:(1)纳米SiO2的制备和生物功能化及其在GST分离中的应用通过正硅酸乙酯(TEOS)的水解制备了三种不同形貌的纳米SiO2(哑铃形、纤维状、链状);考察了TEOS的加入方式、氨水浓度及TEOS浓度对样品形貌的影响,并分析了其形成机理。进而以球形纳米SiO2为载体,通过对其表面进行氨基化、醛基化及生物功能化,制备了对GST具有特异性吸附的SiO2-GSH纳米微球;采用扫描电子显微镜(SEM)、紫外可见分光光度计(UV-Vis)、热重分析仪(TG)、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析测定了SiO2-GSH纳米微球的形貌、结构及分离蛋白质的能力。结果表明,SiO2-GSH微球可用于GST的初步分离与纯化。(2)巯基SiO2纳米微球的制备及其在GST分离中的应用采用巯基丙基三甲氧基硅烷(MPS)一步水解法制备了表面带有巯基(―SH)的SiO2纳米微球(nSiO2-SH),探讨了水醇比、反应温度、MPS初始浓度及反应时间对nSiO2-SH形貌的影响,并分析了反应机理;采用二硫代二硝基苯甲酸法(DTNB法)和X-射线光电子能谱仪(XPS)定量检测了微球表面的―SH含量,发现微球表面的―SH含量与反应条件密切相关。进而利用nSiO2-SH微球与还原型谷胱甘肽(GSH)中的―SH反应生成双硫键(―S―S―),在nSiO2-SH微球表面键合GSH分子,得到生物功能化的纳米SiO2微球(nSiO2-GSH);利用SEM、TEM、FT-IR分析了nSiO2-GSH微球的表面形貌、尺寸、化学结构,利用热重分析测定了其热稳定性;并利用SDS-PAGE检测了样品对GST的分离效果。结果表明,nSiO2-GSH微球能从混合蛋白中特异性地分离GST,这种微球可望用于以GST为标签的融合蛋白的分离、纯化及检测。(3)花瓣状FeOOH/Cys的合成及其在His-tagged蛋白分离纯化中的应用采用一步法制备了L-半胱氨酸(L-Cys)功能化的FeOOH/Cys微纳米复合材料,将其吸附Ni2+后用于分离His-tagged融合蛋白;考察了FeOOH/Cys的初始质量和细胞裂解液的初始体积等对目标蛋白分离效果的影响。结果表明,FeOOH/Cys微纳米复合材料对His-tagged融合蛋白具有良好的分离作用,对His-tagged OST1蛋白的最大吸附量为88.0μg/mg;且其经4次再生后仍能有效地分离目标蛋白。(4)Fe3O4/Cys纳米微球的制备及其在His-tagged蛋白分离纯化中的应用利用一步溶剂热法制备了L-Cys功能化的Fe3O4磁性纳米微球(Fe3O4/Cys),Fe3O4/Cys微球经吸附Ni2+形成Fe3O4/Cys-Ni2+复合材料;系统考察了Fe3O4/Cys-Ni2+复合微球对His-tagged融合蛋白的分离纯化效果。结果表明,其对His-tagged TRX蛋白的最大吸附量达53.2μg/mg,分离能力良好;且其再生力较强,经多次再生后依然保持良好的分离效果。

许金鹏,李朝品[6](2009)在《屋尘螨和粉尘螨Ⅰ类变应原研究进展》文中研究说明屋尘螨和粉尘螨是最常见的室内过敏原之一,尘螨最主要的致敏成分是尘螨Ⅰ类变应原。该文从屋尘螨和粉尘螨Ⅰ类变应原的研究概况、在螨体内的定位、结构和生化特性研究与同源性和多态性分析、应用于尘螨变应原研究的新方法等4个方面进行综述。

王晓春,李朝品[7](2006)在《粉螨变应原制备的实验研究进展》文中提出

许振华,曾蔚筠,谢琪璇,汤彦[8](2006)在《国内几种尘螨变应原提取液的质量分析》文中进行了进一步梳理目的评价国内几种尘螨变应原提取液的质量,了解国内尘螨变应原的质量现状。方法采用SDS-PAGE、W estern blotting和ELISA法对各尘螨变应原样品进行主要致敏蛋白的成分、含量进行分析比较。结果各尘螨变应原样品在主要致敏蛋白的成分、含量方面均有明显差异,且各样品均未能达到WHO的变应原标准。结论国内尘螨变应原的质量参差不齐,变应原的标准化问题亟待解决。

罗臣,肖小芹[9](2004)在《尘螨引起的疾病及其防治研究进展》文中提出文章综述了尘螨引起的各种疾病防治及疫苗研制情况 ,认为抗原纯化、基因工程和抗IgE单克隆抗体在尘螨疾病防治和疫苗研制中将会越来越重要

张鲁雁,江世益,陈刚[10](2004)在《粉尘螨变应原多聚体及其变应原性》文中进行了进一步梳理目的 制备粉尘螨变应原多聚体 (PDF)。方法 用戊二醛与粉尘螨浸液 (Df)反应制成PDf,通过凝胶层析分析其稳定性 ,并用皮肤点制试验测定其变应原性。结果 获得相对分子质量在 6 0 0 0 0 0范围内的PDf,并具有低变应原性 ,且在 2年内相当稳定。结论 制成的PDf可用于临床免疫治疗 ,它具有安全性、稳定性和有效性

二、毛细管电泳测定粉尘螨主要变应原Derf2含量(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、毛细管电泳测定粉尘螨主要变应原Derf2含量(论文提纲范文)

(1)新疆地区变应性鼻炎吸入变应原谱及相关拷贝数变异分析(论文提纲范文)

中英文缩略词对照表
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 新疆地区5019例变应性鼻炎患者吸入变应原谱分析
    1 研究内容与方法
        1.1 研究对象
        1.2 研究方法(皮肤点刺试验)
        1.3 技术路线图
        1.4 统计方法
    2 结果
    3 讨论
    4 小结
第二部分 基于低深度全基因组测序筛选致变应性鼻炎的拷贝数变异
    1 研究内容与方法
        1.1 研究对象
        1.2 研究方法
        1.3 质量控制
        1.4 技术路线图
        1.5 统计学方法
    2 结果
    3 讨论
    4 小结
第三部分 13个基因拷贝数变异与新疆地区汉族变应性鼻炎的相关性研究
    1 研究内容与方法
        1.1 研究对象
        1.2 研究方法
        1.3 质量控制
        1.4 技术路线图
        1.5 统计方法
    2 结果
    3 讨论
    4 小结
结论
致谢
参考文献
综述 拷贝数变异的研究进展
    参考文献
攻读博士学位期间获得的学术成果
个人简历
导师评阅表

(2)鱼类主要过敏原小清蛋白金磁免疫层析试纸条的研制(论文提纲范文)

摘要
abstract
主要符号表
第1章 绪论
    1.1 过敏反应
    1.2 食物过敏
    1.3 鱼类主要过敏原小清蛋白
    1.4 食物过敏的检测诊断
    1.5 金磁性纳米材料的研究现状及生物测定
    1.6 主要研究内容
第2章 抗小清蛋白单克隆抗体的制备
    2.1 前言
    2.2 实验材料、试剂及仪器
    2.3 实验方法
    2.4 结果与讨论
    2.5 本章小结
第3章 小清蛋白金磁性免疫层析试纸条的研制
    3.1 前言
    3.2 材料、试剂及仪器
    3.3 试验方法
    3.4 实验结果
    3.5 本章小结
第4章 建立小清蛋白金磁性免疫层析试纸定量检测方法
    4.1 引言
    4.2 材料与试剂
    4.3 实验方法
    4.4 结果与讨论
    4.5 本章小结
第5章 结论
    5.1 结论
参考文献
致谢

(3)淡水鱼过敏原PV的消减研究及低敏性食品的开发(论文提纲范文)

摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 食物过敏
        1.1.1 食物过敏原分类
        1.1.2 食物过敏反应过程
        1.1.3 食物过敏的防治
    1.2 水产品过敏原
        1.2.1 水产品的主要过敏原
        1.2.2 小清蛋白的研究进展
    1.3 过敏原提取纯化研究
        1.3.1 天然样本提取
        1.3.2 基因水平人工制备
    1.4 食物过敏的诊断及检测
        1.4.1 体内检测手段
        1.4.2 体外检测手段
    1.5 水产品过敏性的消减脱除
        1.5.1 物理法
        1.5.2 化学法
        1.5.3 生物法
    1.6 本课题的研究目的和主要内容
        1.6.1 研究目的
        1.6.2 主要内容
第2章 小清蛋白的分离纯化
    2.1 前言
    2.2 实验材料与仪器
        2.2.1 实验材料、试剂
        2.2.2 仪器与设备
    2.3 实验方法
        2.3.1 主要溶液的配制
        2.3.2 小清蛋白抽提液的优化
        2.3.3 盐析条件的探究
    2.4 分析方法
        2.4.1 提取过程蛋白种类变化鉴定
        2.4.2 提取过程蛋白浓度变化测定
        2.4.3 四大家鱼氨基酸组成分析
    2.5 结果与讨论
        2.5.1 抽提液的优化结果
        2.5.2 对盐析条件的探究
        2.5.3 氨基酸组成分析结果
    2.6 本章小结
第3章 小清蛋白多克隆抗体的制备及过敏性的消减脱除
    3.1 前言
    3.2 实验材料、试剂及仪器
        3.2.1 实验材料、试剂
        3.2.2 仪器与设备
    3.3 实验方法
        3.3.1 主要溶液的配置
        3.3.2 BALB/C小鼠的免疫
        3.3.3 小鼠血清效价的测定
        3.3.4 多抗最佳工作浓度的确定
        3.3.5 四大家鱼小清蛋白交叉反应的测定
        3.3.6 高温高压对小清蛋白至敏性的影响
        3.3.7 美拉德反应对小清蛋白至敏性的影响
        3.3.8 茶多酚添加对小清蛋白至敏性的影响
    3.4 分析方法
        3.4.1 SDS-PAGE法检测低敏处理后蛋白变化
        3.4.2 ELISA法检测低敏处理后蛋白变化
        3.4.3 褐变程度低敏处理后蛋白变化
        3.4.4 圆二色谱鉴定低敏处理后蛋白变化
    3.5 结果与讨论
        3.5.1 多克隆抗体的效价
        3.5.2 多克隆抗体最佳工作浓度确定
        3.5.3 交叉反应率的测定
        3.5.4 高温高压对PV致敏性的影响的电泳图谱与ELISA分析
        3.5.5 美拉德反应对PV致敏性的影响的电泳图谱与ELISA分析
        3.5.6 茶多酚添加对PV影响的电泳图谱与ELISA分析
        3.5.7 圆二色谱鉴定PV二级结构的变化
    3.6 本章小结
第4章 低敏性鱼丸的开发
    4.1 前言
    4.2 实验材料、试剂及仪器
        4.2.1 实验材料、试剂
        4.2.2 仪器与设备
    4.3 实验方法
        4.3.1 低敏性鱼丸制作工艺流程
    4.4 分析方法
        4.4.1 SDS-PAGE蛋白电泳检测鱼丸浸提液蛋白变化
        4.4.2 酶联免疫吸附法检测鱼丸浸提液致敏性变化
        4.4.3 BALB/c小鼠过敏反应模型
    4.5 结果与讨论
        4.5.1 SDS-PAGE蛋白电泳鉴定浸提液蛋白变化
        4.5.2 酶联免疫吸附反应鉴定浸提液致敏性变化
        4.5.3 ELISA法鉴定小鼠血清效价变化
        4.5.4 小鼠脾脏变化情况
    4.6 本章小结
第5章 结论与展望
参考文献
致谢

(4)纳米材料在蛋白质分离中的应用(论文提纲范文)

1 纳米材料在蛋白质分离纯化方面的应用
    1.1 非金属氧化物纳米材料
        1.1.1 纳米二氧化硅粒子
        1.1.2 介孔分子筛
    1.2 非金属单质纳米材料
    1.3 金属氧化物纳米材料
    1.4 金属单质纳米材料
    1.5 纳米聚合物
    1.6 纳米复合材料
2 展望

(5)生物功能化微纳米材料的制备与蛋白质的亲和分离(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 非金属氧化物纳米材料
        1.1.1 纳米二氧化硅
        1.1.2 纳米介孔分子筛
    1.2 碳纳米管
    1.3 金属氧化物纳米材料
    1.4 金属纳米材料
    1.5 纳米聚合物
    1.6 纳米复合材料
    1.7 选题意义
    1.8 主要研究内容
    参考文献
第二章 纳米 SiO_2的制备和生物功能化及其在 GST 分离中的应用
    2.1 实验部分
        2.1.1 试剂与仪器
        2.1.2 纳米 SiO_2的制备与功能化
        2.1.3 GST 分离
    2.2 结果与讨论
        2.2.1 反应条件的影响
        2.2.2 形成机理
        2.2.3 紫外可见吸收光谱
        2.2.4 热重分析
        2.2.5 电泳结果
    2.3 结论
    参考文献
第三章 巯基 SiO_2纳米微球的制备及其在 GST 分离中的应用
    3.1 实验部分
        3.1.1 试剂与仪器
        3.1.2 nSiO_2-SH 微球的制备与功能化
        3.1.3 nSiO_2-GSH 微球对 GST 纯化
    3.2 结果与讨论
        3.2.1 不同条件对 nSiO_2-SH 形貌的影响
        3.2.2 nSiO_2-GSH 微球的表征
        3.2.3 SDS-PAGE 分析
    3.3 结论
    参考文献
第四章 SiO_2表面官能团的定量分析及其在 GST 分离中的应用
    4.1 实验部分
        4.1.1 试剂与仪器
        4.1.2 SiO_2-SH 微球的制备
        4.1.3 SiO_2-SH 微球与 GSH 的键合
        4.1.4 SiO_2-SH 微球中巯基含量的定量检测
        4.1.5 GST 的分离与检测
    4.2 结果与讨论
        4.2.1 SiO_2-SH 微球的表征
        4.2.2 SiO_2-GSH 微球的表征
        4.2.3 SiO_2-GSH 微球分离 GST
    4.3 结论
    参考文献
第五章 花瓣状 FeOOH/Cys 的合成及其在 His-tagged 蛋白分离纯化中的应用
    5.1 实验部分
        5.1.1 试剂与仪器
        5.1.2 FeOOH/Cys 复合材料的制备
        5.1.3 FeOOH/Cys-Ni~(2+)复合材料的制备
        5.1.4 His-tagged 融合蛋白的制备及分离
    5.2 结果与讨论
    5.3 结论
    参考文献
第六章 Fe_3O_4/Cys 纳米微球的制备及其在 His-tagged 蛋白纯化中的应用
    6.1 实验部分
        6.1.1 试剂与仪器
        6.1.2 Fe_3O_4/Cys 的制备
        6.1.3 Fe_3O_4/Cys-Ni~(2+)复合材料的制备
        6.1.4 His-tagged 蛋白的制备及分离
    6.2 结果与讨论
    6.3 结论
    参考文献
结束语
    7.1 主要结论
    7.2 问题和展望
致谢
攻读学位期间发表的学术论文目录

(6)屋尘螨和粉尘螨Ⅰ类变应原研究进展(论文提纲范文)

1 研究概况
2 变应原在螨体内的定位
3 变应原结构、生化特性研究与同源性和多态性分析
4 应用于尘螨变应原研究的新方法
    4.1 各种PCR技术的新应用
    4.2 DNA改组技术
    4.3 植物表达系统表达尘螨变应原技术
5 结语

(7)粉螨变应原制备的实验研究进展(论文提纲范文)

一、粉螨变应原浸液的制备
    1. 粉螨的收集与分离
    2. 粉螨变应原浸液的配制
二、粉螨变应原的分离纯化
    1. 沉淀分离法
    2. 电泳
    3. 层析
        (1)凝胶过滤层析
        (2)亲和层析
三、分子生物学技术重组粉螨变应原
四、变应原浸液及重组变应原的应用
五、结语

(8)国内几种尘螨变应原提取液的质量分析(论文提纲范文)

1 材料与方法
    1.1 尘螨变应原提取液样品
    1.2 主要实验动物和试剂
    1.3 兔抗尘螨抗体的制备
    1.4 兔抗尘螨抗体的ELISA效价检测
    1.5 SDS-PAGE分离各样品的成分
    1.6 Westernblotting检测各样品成分的抗原性
    1.7 ELISA检测各样品抗原成分的含量
        1.7.1 标准品的ELISA浓度曲线
        1.7.2 各样品的ELISA
2 结果
    2.1 兔抗尘螨抗体及其效价
    2.2 各样品的主要蛋白质成分
    2.3 各样品主要成分的抗原性
    2.4 ELISA结果
3 讨论
    3.1 各样品的蛋白质成分
    3.2 各样品的变应原成分
    3.2 各样品的变应原含量

(9)尘螨引起的疾病及其防治研究进展(论文提纲范文)

1 尘螨与疾病关系
    1.1 引起过敏
    1.2 引起螨虫病
    1.3 充当传染媒介
    1.4 引起皮肤病
2 检测手段与治疗方法
    2.1 检测手段
    2.2 治疗方法
3 疫苗研制进展
    3.1 抗原疫苗
    3.2 变应原DNA疫苗
    3.3 重组抗原疫苗
    3.4 基因治疗
    3.5 抗IgE单克隆抗体
4 问题与展望

(10)粉尘螨变应原多聚体及其变应原性(论文提纲范文)

材料和方法
结 果
讨 论

四、毛细管电泳测定粉尘螨主要变应原Derf2含量(论文参考文献)

  • [1]新疆地区变应性鼻炎吸入变应原谱及相关拷贝数变异分析[D]. 王燕. 新疆医科大学, 2020(03)
  • [2]鱼类主要过敏原小清蛋白金磁免疫层析试纸条的研制[D]. 李梦银. 上海师范大学, 2019(08)
  • [3]淡水鱼过敏原PV的消减研究及低敏性食品的开发[D]. 孙登瑶. 上海师范大学, 2018(08)
  • [4]纳米材料在蛋白质分离中的应用[J]. 邹雪艳,董烁,李宾杰,赵彦保. 化学研究, 2014(05)
  • [5]生物功能化微纳米材料的制备与蛋白质的亲和分离[D]. 邹雪艳. 河南大学, 2013(02)
  • [6]屋尘螨和粉尘螨Ⅰ类变应原研究进展[J]. 许金鹏,李朝品. 中国媒介生物学及控制杂志, 2009(05)
  • [7]粉螨变应原制备的实验研究进展[J]. 王晓春,李朝品. 热带病与寄生虫学, 2006(03)
  • [8]国内几种尘螨变应原提取液的质量分析[J]. 许振华,曾蔚筠,谢琪璇,汤彦. 广东药学院学报, 2006(02)
  • [9]尘螨引起的疾病及其防治研究进展[J]. 罗臣,肖小芹. 湖南中医药导报, 2004(09)
  • [10]粉尘螨变应原多聚体及其变应原性[J]. 张鲁雁,江世益,陈刚. 复旦学报(医学版), 2004(02)


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