一、败血性休克与免疫（论文文献综述）
高倩,齐天琪,郝启,张维婕,杨靖娴,梁国威[1]（2021）在《细胞因子在血液系统肿瘤患者血流感染中的应用价值》文中指出目的探讨细胞因子和降钙素原（PCT）对于血液系统肿瘤患者血流感染的诊断、病原预测及严重程度判断的价值。方法收集2017年9月至2019年10月在航天中心医院血液科住院治疗的108例共120例次的感染发热患者为研究对象。根据血培养结果分为败血症组（52例共63例次）,包括革兰阴性菌（Gram negative bacteria, GNB）败血症组（24例共31例次）、革兰阳性菌（Gram negative bacteria, GPB）败血症组（21例共23例次）、真菌（fungi）败血症组（7例共9例次）,非血流感染组（50例共51例次）、病毒感染组（6例共6例次）;根据败血症组内临床表现分为一般败血症组（36例共46例次）和败血性休克组（16例共17例次）。另收集同期住院、年龄相当且无感染征象的血液系统肿瘤患者26例作为对照组,男18例,女8例。回顾性收集患者血培养采集当天的临床信息和细胞因子、PCT等实验室检测结果。结果败血症组患者的IL-2、IL-6、IL-10和PCT较非败血症组显着升高（P均<0.05）,受试者工作特征曲线下面积（AUC）分别为0.654（0.571～0.731）、0.892（0.830～0.937）、0.802（0.728～0.863）和0.704（0.620～0.779）。GNB败血症组IL-10、TNF-α和PCT较GPB败血症组显着升高（P均<0.05）,AUC分别为0.684（0.555～0.796）、0.639（0.508～0.756）和0.760（0.636～0.859）。败血性休克组IL-4、IL-6、IL-10和PCT较败血症组显着升高（P均<0.05）,AUC分别为0.607（0.476～0.728）、0.737（0.61～0.84）、0.758（0.634～0.857）和0.701（0.572～0.81）。结论 IL-6对于败血症的诊断效能优于PCT,同时IL-6也可用于鉴别败血症和败血性休克患者。IL-10对于败血症的诊断效能与PCT相当,对于败血性休克的也有较强的预测价值,同时可作为预后不良的指标之一。GNB感染患者IL-10、TNF-α显着高于GPB感染患者。IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α可作为败血症预后不良的参考指标。
贺香勤[2]（2019）在《高迁移率家族蛋白新成员HMGXB4对小鼠全身性炎症的影响及机制研究》文中研究表明研究背景与研究目的:败血症,又称脓毒症,是一种严重的可能危及生命的全身性炎症反应,其致病原因主要由感染或者组织损伤引起的全身性炎症应答综合征,可导致多器官组织损伤,甚至可因器官衰竭而导致死亡。败血症目前仍然是医院重症监护病房中最常见的死亡原因,败血症的预防与治疗依然是当前社会的巨大公共卫生负担。高迁移率（HMG-Box）蛋白家族是一类细胞核蛋白,具有独特的DNA结合域HMG-Box,与非B型DNA结构的亲和力高,通过弯曲,扭结和展开来扭曲DNA,具有维持染色质结构,DNA修复,转录调控,或者促进核糖体的生物合成等作用。然而,1999年研究者意外的发现HMGB1在全身性炎症反应中可以从细胞核中分泌到细胞外,并作为一种促炎细胞因子介导炎症反应。在败血症期间,阻止HMGB1的分泌或者用HMGB1特异性抗体靶向血液中HMGB1,可以显着提高致死性败血症的生存率。现有文献表明,高迁移率蛋白家族中的多个成员参与多种因素介导的炎症反应。HMGXB4是我们首次在哺乳动物中克隆的该家族的新成员,其是否参与炎症反应尚不清楚。本文旨在探讨Hmgxb4基因在全身性炎症诱导的败血症中的作用及其分子机制,从而为寻找治疗炎症性败血症的新靶点提供实验依据。实验方法:1.LPS刺激对小鼠巨噬细胞Hmgxb4表达的影响:1)提取WT小鼠的腹腔巨噬细胞,用不同剂量的LPS刺激巨噬细胞或者用100 ng/ml LPS刺激巨噬细胞不同的时间点,提取总RNA和总蛋白通过q RT-PCR和Western blot实验检测LPS刺激巨噬细胞对Hmgxb4表达的影响;2)用免疫荧光染色法检测LPS刺激巨噬细胞诱导HMGXB4蛋白表达的细胞定位;3)细胞质与细胞核蛋白分离法进一步分析HMGXB4蛋白的细胞定位。2.全身性敲除Hmgxb4基因小鼠及其炎症性败血症模型的建立与表型分析:1)构建全身性Hmgxb4基因敲除小鼠及其特征分析;2)利用野生型或全身性Hmgxb4基因敲除鼠制备内毒素（LPS）或多微生物感染（CLP）诱导的小鼠败血症模型,检测下述指标:a.检测小鼠的生存曲线;b.HE染色分析小鼠肺和肾组织的损伤程度;c.ELISA法分析小鼠血清促炎症细胞因子的含量;d.TUNEL法检测肺组织的细胞凋亡;e.肺组织免疫荧光染色检测肺组织中的巨噬细胞浸润情况;f.尾静脉注射EBD检测小鼠肺血管的通透性。3.全身性敲除Hmgxb4基因对炎症所致小鼠败血症的保护作用及其机制分析:1)RNAseq鉴定LPS刺激诱导Hmgxb4基因缺失巨噬细胞的基因差异性表达;2)结合RNAseq和ENCODE数据库中HMGXB4 Ch IP-seq数据鉴定HMGXB4直接调控的潜在靶基因;3)采用q RT-PCR和Western blot技术验证巨噬细胞缺失HMGXB4对潜在的靶基因Nos2的转录调控及其生物学功能分析;4)利用双荧光素酶报告质粒分析HMGXB4对靶基因Nos2启动子的转录调控作用;5)利用腹腔注射高剂量LPS（20 mg/kg）诱导WT和Hmgxb4基因缺失小鼠的急性肺损伤模型,并用q RT-PCR和Western blot验证HMGXB4对靶基因Nos2的转录调控;6)在WT和Hmgxb4基因缺失小鼠中腹腔注射LPS诱导全身性炎症反应,用NOS2抑制剂1400W抑制NOS2活性,尾静脉注射EBD检测小鼠肺血管的通透性。实验结果:1.LPS介导的巨噬细胞激活可诱导核蛋白HMGXB4的转录与表达:1)q RT-PCR和Western blot结果显示,LPS以时间与剂量依赖性方式诱导腹腔巨噬细胞Hmgxb4的转录与表达;2)免疫荧光染色及细胞质与细胞核蛋白分离结果显示,HMGXB4是腹腔巨噬细胞的一个核蛋白,LPS可诱导其表达,且定位在核内。2.敲除Hmgxb4基因显着改善系统性炎症反应导致的小鼠组织损伤和致死率:1)我们首先构建了Hmgxb4基因全身性敲除小鼠,结果显示敲除Hmgxb4基因对小鼠的发育与繁殖没有明显的影响;2)敲除Hmgxb4基因可以显着延长LPS或多微生物感染（CLP）诱导的致死性败血症的小鼠生存时间;3)HE染色结果显示,敲除Hmgxb4基因可以明显保护LPS诱导的急性肺和肾组织损伤;4)ELISA结果显示,敲除Hmgxb4基因对经典的促炎细胞因子分泌没有影响;5)TUNEL染色结果显示,敲除Hmgxb4基因可明显减少LPS诱导小鼠急性肺损伤的细胞凋亡;6)LGALS3（Mac2）免疫荧光染色显示,敲除Hmgxb4基因显着减少LPS诱导小鼠急性肺损伤时的巨噬细胞浸润;7)EBD结果显示,敲除Hmgxb4基因可以明显保护全身性炎症诱导的肺血管通透性。3.敲除Hmgxb4基因通过抑制LPS诱导的NOS2表达及NO产生保护LPS诱导的全身性炎症引起的肺组织损伤:1)RNA-seq结果分析显示,HMGXB4缺失可改变LPS诱导的巨噬细胞的基因表达;2)结合RNA-seq和ENCODE数据库中HMGXB4 Ch IP-seq数据鉴定Nos2基因是HMGXB4直接调控的一个潜在靶基因;3)q RT-PCR和Western blot结果显示,在体外巨噬细胞中Hmgxb4基因缺失可抑制LPS诱导的Nos2基因的转录与表达,同时减少NO的产生;4)双荧光素酶报告实验结果显示HMGXB4可以反式激活Nos2基因启动子上的增强子活性,从而调控Nos2基因的转录与表达;5)q RT-PCR和Western blot结果显示,在LPS诱导的急性肺损伤组织中,Hmgxb4基因缺失可抑制LPS诱导的Nos2基因的表达,改善肺部组织炎症;6)在LPS诱导的全身性炎症反应中,注射NOS2抑制剂1400W,与Hmgxb4基因缺失类似,可以改善全身性炎症诱导的肺血管通透性。结论:1.LPS刺激可促进小鼠腹腔巨噬细胞的HMGXB4表达,且定位在细胞核中;HMGXB4可明显调节LPS诱导的小鼠巨噬细胞的基因表达谱;HMGXB4可与Nos2基因启动子上的增强子区域结合,并以反式激活方式调控Nos2基因的转录表达;2.全身性敲除Hmgxb4基因对全身性炎症诱导的器官损伤及生存率具有明显的保护作用,其机制与Hmgxb4缺失抑制LPS诱导的巨噬细胞NOS2表达和NO产生有关。
徐孝浪[3]（2019）在《雷公藤甲素衍生物的设计、合成及活性研究》文中认为雷公藤甲素（TP）是从卫矛科雷公藤中提取到的一种环氧二萜内酯,具有显着的抗炎免疫抑制活性,它通过强力抑制促炎症细胞因子如TNF-α的表达水平以及阻断NF-κB信号通路,从而抑制NO的合成和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达来发挥抗炎和免疫抑制活性;但是TP本身毒性较大、水溶性差、治疗窗窄,这些缺点极大地限制了它在临床上的应用。药剂学的多种剂型改造也未能解决这些问题。本文采用精准化学修饰手段在TP的母核中引入NOS特异性底物的类似基团:精氨酸类似物、2-氨基-吡啶基团,设计并合成了两类TP衍生物:氨基酸系列衍生物（TR-X）以及氨基吡啶类衍生物（TRN-X）。以提高TP的免疫抑制靶向性和生物利用度,从而达到降低毒性的目的,研究内容包括以下几个方面:一、TR-X系列衍生物,以TP为原料,首先与琥珀酸酐缩合得到TP琥珀酸酯（TR）,TR在HATU/DIPEA缩合体系下与无氨基保护基的氨基酸一锅法合成目标化合物。L-精氨酸甲酯衍生物（TR-1）,收率92%;L-精氨酸衍生物（TR-2）,收率94%;Nω-硝基-L-精氨酸甲酯衍生物（TR-3）,收率94%;Nω-硝基-L-精氨酸衍生物（TR-4）,收率89%;L-瓜氨酸衍生物（TR-5）,收率93%;L-赖氨酸衍生物（TR-6）,收率91%;L-赖氨酸甲酯衍生物（TR-7）,收率89%;L-鸟氨酸衍生物（TR-8）,收率94%;L-鸟氨酸甲酯衍生物（TR-9）,收率93%。二、TRN系列衍生物,TR在PyBoP/NMM缩合体系下,与2-氨基吡啶类化合物一步缩合得到TRN系列衍生物;2-氨基吡啶衍生物（TRN-1）,收率76%;4-甲基-2-氨基-吡啶衍生物（TRN-2）,收率83%;4-乙基-2-氨基-吡啶衍生物（TRN-3）,收率72%。三、建立HPLC法测定目标化合物的分析方法,并对稳定性进行初步考察。确定各化合物的紫外最大吸收波长,其中TR-X系列确定以218 nm为检测波长、TRN系列以256 nm为检测波长,选用极性色谱柱以乙腈/甲醇-磷酸盐缓冲体系为流动相确定TR-X系列衍生物的HPLC检测条件,以乙腈-水为流动相检测TRN系列衍生物,各目标化合物HPLC检测结果符合要求。考察目标化合物分别在流动相中的稳定性,TR-X系列衍生物在72 h内保持稳定;TRN系列衍生物在10 d内保持稳定。四、以DNFB致敏的BALB/C小鼠迟发性超敏反应模型,每个目标化合物设置高剂量（5μg/kg）、中剂量（1μg/kg）、低剂量（0.2μg/kg）三个水平腹腔注射给药,阳性对照为雷公藤甲素,剂量水平与试样一致,阴性对照组为生理盐水（剂量10 mL/kg）,耳肿胀度为评价指标,测定TR-X、TRN系列衍生物的抗炎活性。初步抗炎活性实验结果表明,TR-3、TR-5、TR-8、TR-9、TRN-3的三种剂量水平抗炎效果均优于相应的阳性对照,其中TR-8具有明显优势且具有量效关系,进一步活性评价正在进行。
谢亮亮[4]（2017）在《慢病毒介导的TREM1及LBP基因沉默对LPS诱导下水牛单核巨噬细胞基因表达分子调控机制初步研究》文中研究说明革兰氏阴性菌种类繁多,以大肠杆菌、痢疾杆菌、布氏杆菌等为代表,由此引发的家畜炎症疾病可导致败血症、乳腺炎、生殖系统感染等,给畜牧养殖业带来极大损失。内毒素又名脂多糖（LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要毒力因子,能激活细胞膜上多种受体如TLRs进行跨膜及胞内信号传导,释放炎性介质,诱发机体过度炎症损伤。髓系细胞触发受体-1（TREM1）是一种细胞膜模式识别受体,通过TREM1/DAP12信号通路放大LPS炎症反应。脂多糖结合蛋白（LBP）具有LPS高亲和力,属于TLR4信号通路上游关键蛋白。TREM1和LBP均能级联扩大炎症信号,对LPS信号传导至关重要。研究表明,沉默或敲除TREM1或LBP基因表达,可显着降低炎性介质表达并控制过度炎症,且TREM1与TLR4信号通路存在协同互作。为了深入了解水牛TREM1和LBP基因在LPS致炎反应中的作用及其致炎信号传导分子调控机制,本研究以水牛外周血单核巨噬细胞为材料,以慢病毒载体介导的RNA干扰和转录组学技术为主要手段,研究体外抑制TREM1或LBP基因表达对LPS诱导下相关基因表达的影响及其分子调控机制,为提高水牛抗病能力奠定理论基础。主要研究结果:1、原代水牛外周血单核巨噬细胞的分离培养为了获取生长状态良好的水牛原代单核巨噬细胞,首先对其进行分离纯化,比较自体血清浓度对细胞贴壁生长状况的影响,利用墨汁吞噬、流式及qRT-PCR方法对纯化后细胞进行鉴定。结果显示,细胞在含有2.5%自体血清培养液中贴壁能力高于5%、7.5%;纯化细胞特异性表达TREM1及CD14基因,且流式鉴定细胞表面抗原CD14和MHC-Ⅱ 阳性率达98.50%。2、抑制TREM1基因表达对LPS诱导下水牛单核巨噬细胞炎症相关基因表达的影响为了探讨抑制TREM1基因表达对LPS诱导下水牛单核巨噬细胞炎症相关基因表达的影响,首先对TREM1-shRNA294重组质粒进行慢病毒包装,摸索靶细胞感染适宜条件,之后qRT-PCR和ELISA方法进行检测。结果显示,在病毒滴度>4×108IU/mL、感染指数（MOI）为300、感染时间为7d的条件下,细胞感染效率超过50%。与LPS对照组相比,感染组TREM1基因表达量降低69%,DAP12、TLR4、MYD88、TNF-α、IL-1β等基因表达显着降低（P<0.05）。TREM1-shRNA 组的 TNF-α含量（418.23 pg/mL）显着低于对照组（604.92 pg/mL,P<0.05）,且 IL-1β含量（230.65 pg/mL）亦显着低于对照组（387.12pg/mL,P<0.05）。3、抑制LBP基因表达对LPS诱导下水牛单核巨噬细胞炎症相关基因表达的影响为了探讨抑制LBP基因表达对LPS诱导下炎症相关基因的表达,采用上述相同方法,另以TREM1-sh294和LBP-sh774慢病毒联合感染细胞。结果显示,纯化病毒滴度>5 × 108IU/mL;与LPS组相比,感染组LBP、CD14、TLR4、TNF-α、IL-1β、IL-8等基因表达显着降低（P<0.05）。上清液TNF-α、IL-1β及可溶性LBP（sLBP）的蛋白分泌含量均显着低于LPS组（P<0.05）。不同比例病毒组TREM1和LBP shRNA共同抑制实验结果表明:与LPS组相比,各比例组中TNF-α、IL-1β基因表达及蛋白分泌水平均显着降低（P<0.05）;当2:1联合感染时,Bcl-2基因表达显着降低而Caspase-3显着升高（P<0.05）;。4、TREM1/LBP基因表达下调的水牛单核巨噬细胞转录组学分析为了更全面解析TREM1/LBP基因沉默对LPS致炎信号传导的分子调控机制,利用RNA-seq方法对TREM1-sh、LBP-sh和NC（LPS单独刺激）3个微量细胞样本测序,应用生物信息学方法对差异表达基因分析,并对其进行qRT-PCR验证。结果发现,与NC组比较,TREM1-sh和LBP-sh组的差异表达显着变化基因分别为1355和897个;与LBP-sh组相比,TREM1-sh有2536个（P<0.001）。GO及KEGG富集分析,差异基因主要在细胞免疫、免疫过程、抗原递呈等生物进程,NF-kB、细胞因子互作等代谢路径富集;TREM1-sh亦富集于JAK/STAT、抗原递呈等。3个组两两比较中共同差异表达基因182个,其中9个与炎症反应相关,即NFKBIB、TNFRSF13B、TNFRSF17、IL-26、C5AR1、HIF1A、IL2RA、IL-8、MMP-9,可能通过参与 HIF-1A/C5AR1/细胞因子互作、STAT/TNFSF/NF-kB/IL-8/MMP-9、LBP/TREM1互作等信号传导路径来发挥联合抑制作用。以上结果表明,抑制TREM1/LBP基因表达可以有效降低LPS诱导下单核巨噬细胞炎症相关基因的表达,调控LPS炎症反应,TREM1信号通路与LBP信号传导路径之间存在协同互作关系。
宋娅静[5]（2016）在《猪链球菌2型胞外蛋白HP1856促炎机制研究》文中研究表明猪链球菌2型（Streptococcussuis 2,SS2）是威胁养猪业的一种重要的致病菌,据文献报道,已造成全球范围内超过两千多人感染发病,严重的引起死亡,更曾经在我国的江苏和四川爆发过两次较大规模的猪链球菌病,给养殖业以及人类的生命安全造成了巨大的威胁。猪链球菌感染后会引起病猪及人临床上表现出关节炎,心内膜炎,脑膜炎以及败血症等症状,猪链球菌的感染会引起宿主免疫系统的激活,导致宿主释放出大量的炎性因子来清除病原体,有助于宿主抵抗猪链球菌的侵袭,但是过量的免疫反应可能会导致宿主产生败血性休克。有研究显示,猪链球菌中存在一些促炎组分在病原菌感染宿主引起败血症过程中可能发挥了很重要的作用。本研究就发现了一个有明显促炎效果的猪链球菌2型表面蛋白,并将该蛋白作为研究对象,对其引起炎症反应的具体机制展开进一步研究,以期为控制猪链球菌病情提供一些依据。本研究是以SSU05 1856基因编码的猪链球菌2型胞外蛋白HP1856为研究对象,具体研究内容如下:1)以pET-28a质粒构建重组载体,体外表达并纯化该蛋白;2)对纯化的蛋白进行去除内毒素处理后以RAW264.7细胞为模型开展细胞实验,发现该蛋白能刺激RAW264.7细胞引起较高水平的促炎性细胞因子IL-1β,TNF-α,MCP1以及IFN-β的释放;3)分别通过TLR2、TLR4的特性型抗体以及TLR2、TLR4基因缺失小鼠进行试验发现HP1856蛋白刺激RAW264.7引起的IL-1β、TNF-α上调能被TLR4的特异性抗体所抑制,却不能被TLR2的特异性抗抑制;基因缺失小鼠实验推测该蛋白引起的的细胞因子的上调可能是TLR4依赖性的;4)随后使用相关信号通路抑制剂进行信号通路中间分子的验证,荧光定量结果表明HP1856激活IL-1β、TNF-α、MCPI和IFN-β可能主要是通过NF-K B和PI3K。5)为了更好的研究该蛋白的功能,实验中构建了该基因的过表达菌株,将该基因成功的进行了过表达,测定了过表达菌株的生长曲线,结果显示过表达菌株与亲本菌株在生长速率方面没有明显的差异;6)体外评价了过表达菌株对RAW264.7细胞的促炎效果,结果显示过表达菌株相对于亲本菌株的促炎效果更明显,提示过表达菌株中该蛋白的表达有助于宿主产生较强的炎症反应;7)随后进行的小鼠实验感染机体后血液含菌量结果表明过表达菌株感染组后血液含菌量高于亲本菌株对照组,这表明在SS2致病过程中,该蛋白的存在使得机体血液中清除病原体速率变缓,有助于导致宿主产生更严重的败血性休克。综上所述,重组蛋白HP1856是一个有明显促炎效果的促炎组分,在2型猪链球菌致病过程中发挥着一定的作用,希望通过研究该蛋白的致病机制可以为猪链球菌的防治提供新的视野及思路。
张佳莹[6]（2012）在《甘草黄酮对LPS诱导的小鼠急性肺损伤和败血性休克保护作用的研究》文中指出急性肺损伤是一种复杂而强烈的肺部免疫应答综合征，可以由多种因素引起。尽管如今的医疗条件取得了很大改善，急性肺损伤仍然是引发重症监护病人死亡的主要因素之一，其死亡率高达35%-45%，而且目前并没有十分有效的药物治疗手段。LPS是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分，通过气管给予LPS已经被广泛的用于对急性肺损伤的发病机理的研究。LPS滴入后，可以引起微血管损伤和弥漫性的肺泡损伤，伴有肺内的出血，水肿和中性粒细胞浸润。气管滴入LPS可以诱导产生急性肺损伤又不会引起全身性的炎症和多器官的衰竭，因此十分适合用于诱导急性肺损伤的模型建立。现在对急性肺损伤的药物治疗，多采用甾体类抗炎药物，而甾体类药物可以导致很严重的副作用。甘草具有止咳祛痰的功能而无严重的不良反应，甘草黄酮是甘草的主要成分，其抗炎作用已得到了证实和应用。因此，我们研究甘草黄酮在急性肺损伤发生时是否具有保护作用是很有意义的。在急性肺损伤发生时，肺部组织会发生相应的病理变化。因此，本试验使用气管滴入LPS构建小鼠急性肺损伤模型的方法，分别在模型建立前后给予甘草黄酮，并用HE染色的方法检测了小鼠肺部组织的病理变化。结果显示，无论是预防组还是治疗组甘草黄酮都可以明显改善肺部的形态变化，并且治疗组的效果要优于预防组。除了组织学观察，我们用ELISA比较了不同时间点预防组和治疗组小鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1（IL-1β）和白介素-6（IL-6）的表达水平变化。结果显示，甘草黄酮可以显着的抑制TNF-α、IL-1β、IL-6的表达，并且治疗效果要好于预防效果。LPS可以诱导NF-κB信号通路的激活，NF-κB是一种核转录因子，可以调节一些炎症因子的表达，在被激活后可以触发炎症反应并增加促炎症因子的产生。为测定甘草黄酮对NF-κB通路的作用，用以研究甘草黄酮在急性肺损伤中的作用机制，我们还使用免疫蛋白印迹的方法测定了NF-κB的表达。结果显示，甘草黄酮可以抑制NF-κB通路的激活，治疗效果同样的要好于预防效果。败血性休克的发病机理同样地与NF-κB信号通路有关，而NF-κB通路可以调节多种细胞因子的释放。因此为进一步研究甘草黄酮对炎症的保护作用，我们还构建了小鼠败血性休克模型。败血性休克是机体对严重感染的一种极端的炎症反应，可以导致器官衰竭。它可以由多种病原刺激产生，而由革兰氏阴性菌感染的得病率可以达到30%-80%。因此，通过检测甘草黄酮对败血性休克小鼠炎症细胞因子表达的影响，初步验证其是否对败血性休克具有保护作用。结果证实，甘草黄酮可以降低败血性休克小鼠血清中细胞因子TNF-α，IL-1β和IL-6的浓度。通过上述实验，我们发现甘草黄酮可以有效改善鼻腔滴入LPS后刺激产生的肺部组织的病变和TNF-α、IL-6、IL-1β等促炎症因子的表达情况，并通过抑制NF-κB通路，有效调节炎症因子的表达。除此之外，还可以有效抑制败血性休克小鼠的TNF-α，IL-1β和IL-6的表达。因此，甘草黄酮对LPS引起的急性肺损伤和败血性休克有一定的保护作用，并为临床上甘草黄酮的使用提供了一定的理论基础。
仲伟婷[7]（2012）在《对聚伞花素抗炎作用的研究》文中进行了进一步梳理败血症对人类健康危害极大，同时给畜牧业造成巨大的经济损失。其致病因素多种多样，主要由细菌感染引起。脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）为革兰氏阴性菌细胞壁的重要成分之一，也是引起败血症的主要原因之一。LPS能刺激单核/巨噬细胞对多种炎症因子的过度表达，包括促炎因子（TNF-α、IL-1、IL-6）和抗炎因子（IL-10），这些细胞因子相互作用扩大炎症反应，导致炎症反应失控。参与炎症反应的下游细胞转导通路主要有两条，即MAPKs通路和NF-κB通路。NF-κB是核转录因子，在静息细胞中与IκB形成复合体，以无活性形式存在于胞浆中；当细胞受细胞外信号刺激后，IκB激酶复合体（IκB kinase, IKK）活化将IκB磷酸化，使NF-κB暴露核定位位点，游离的NF-κB迅速移位到细胞核，诱导相关基因转录。MAPKs主要有3个亚族：ERK、JNK、P38，其活化过程是借助上游激酶的磷酸化作用；MAPKs主要参与细胞增殖、分化、转化及凋亡等细胞生物学反应，而且与细胞因子的产生和分泌关系密切。败血症引起患者和动物的死亡率很高，但是能够有效降低其致死率的药物却很少，针对某一炎症介质而研制的抗体或其它制剂并不能有效控制败血症的发生、改善患者和动物的生存率。近年来人们致力于以炎症信号通路上的某一环节作为靶点从而控制败血症的研究，取得了一定进展。抗生素在预防和治疗败血症及其它感染性疾病中作出了突出贡献，但是随着抗生素的普遍应用和不规范使用，加速了细菌耐药性的出现，迫使人们将焦点移向资源丰富的中草药。本文试验通过药物筛选，发现对聚伞花素、厚朴酚具有抗炎潜力，但由于厚朴酚已有一些抗炎相关报道，而且在较低剂量下有细胞毒性，所以选择牛至中的主要活性成分对聚伞花素作为研究对象。对聚伞花素的抗微生物活性已经得到证实，但是其抗炎活性鲜有报道。本实验旨在从体外和体内两个层面研究中药单体对聚伞花素抗炎作用及其作用机制，评价其对败血症实验动物模型的保护作用。在预实验中，采用MTT法评价对聚伞花素对RAW264.7细胞系的细胞毒性，结果显示对聚伞花素在0-428.64μg/mL范围内没有明显的细胞毒性。为了研究对聚伞花素对炎症过程中细胞因子（TNF-α、IL-1β、 IL-6和IL-10）分泌的调节作用，我们建立了体内和体外病理模型，用LPS刺激RAW264.7细胞系和C57BL/6小鼠，同时通过半定量RT-PCR法检测了该单体对细胞因子基因表达的影响。实验结果显示，对聚伞花素对LPS引起的RAW264.7细胞及C57BL/6小鼠的TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌均有一定程度的抑制作用，下调其基因表达，并呈现一定剂量依赖关系，高剂量作用显着；对聚伞花素在体内实验中，对IL-10的表达也有一定的促进作用。在进一步研究中，用Westernblot法研究对聚伞花素对MAPKs（ERK、JNK、P38）和IκB通路的阻断作用，发现对聚伞花素可显着降低ERK、JNK、P38和IκB通路的活化。基于以上研究，我们通过建立小鼠败血症模型评价对聚伞花素对LPS诱导的小鼠败血症模型的保护作用，结果显示对聚伞花素可显着提高小鼠的存活率。由此可以推测，在一定剂量范围内对聚伞花素具有潜在抗炎活性，其机制可能与阻断MAPKs和NF-κB通路有关。
张佳[8]（2012）在《JZ公司应收账款管理对策研究》文中指出应收帐款是指企业因销售商品或提供劳务而形成的债权。随着市场经济的发展,在市场供求关系和商业竞争的推动下,产生了赊销,伴随着赊销的出现,应收帐款应运而生。应收账款是一家公司的资金命脉,是埋在一个公司最危险的地雷。在应收账款收回之前,企业所实现的利润,只是账面利润,当高赊销比率的公司一旦出现回款困难,一切的“纸上富贵”都会烟消云散。当前相当多数的中国企业面临着长帐龄的应收帐款余额居高不下；呆帐、坏帐率高；平均应收账款周转天数（DS0）长；客户拖欠付款情况严重；企业现金流量不足；客户信用管理水平落后；没有建立应收帐款信息管理系统；应收帐款管理业绩考评机制不健全等问题。这些因应收帐款管理不善出现的问题,给企业带来了很多负面影响和经济损失。本文针对应收帐款管理中出现的问题,结合JZ公司应收帐款管理现状,对应收帐款管理从模式优化的角度来加以研究,希望找到一条普遍适用的规律。本文对应收帐款管理的理论基础进行了简要叙述,包括应收帐款管理相关研究综述、应收帐款管理的基本概念、产生的原因、管理的重点、应收帐款风险管理方法及管理创新；对应收帐款管理的方法进行了特别研究,包括应收帐款信用管理研究、保理业务研究、证券化研究。基于JZ公司应收帐款管理现状,总结其管理的特点、不足,对应收帐款管理模式进行研究,并最终制定出应收帐款管理模型。同时从建立应收帐款信息系统、转变经营观念、绩效考核、人员培训四个方面对应收帐款管理对策进行研究。希望对应收帐款管理体系进行优化。由于应收帐款管理是财务管理的一个重要课题,它直接反映出企业财务状况的好坏和财务管理水平的高低,为了确保应收帐款准确及时的收回、企业资金周转循环的顺利进行和企业长期可持续发展,应收帐款管理对策研究具有重要的理论和现实意义。本文共分六部分对应收帐款管理对策进行研究,结构和内容具体如下：第一章绪论1.1选题背景和意义1.2主要研究内容1.3研究思路与方法1.4应收帐款管理的相关研究综述第二章相关理论研究综述2.1应收帐款管理的基本概念2.2应收帐款管理的重点2.3应收帐款管理的创新2.4应收帐款管理方法研究第三章JZ公司应收帐款管理现状分析3.1JZ公司简介3.2JZ公司应收帐款管理现状3.3JZ公司应收帐款管理特点3.4JZ公司应收帐款管理不足第四章JZ公司应收帐款管理模式研究4.1JZ公司应收帐款管理创新——信用控制4.2JZ公司应收帐款管理——保理4.3JZ公司应收帐款管理——日常管理第五章JZ公司应收帐款管理对策研究5.1建立应收帐款信息管理系统5.2转变经营观念5.3加强绩效考核5.4加强人员培训第六章研究结论与展望最后,需要强调的是,应收帐款管理不单是财务部一个部门的事情,从本文可以看出其管理涉及到公司财务部、销售部、商务运营部、生产运营部、工程服务部、人事部、法律部等几乎全部部门,其管理周期也将是伴随着自赊销产生至企业存续的全过程。因篇幅原因,本文仅就企业对国内外部客户应收帐款管理提出一点拙见,对于国外外部客户和集团内部客户的应收帐款管理在此未有提及。希望借此机会,将企业应收帐款管理的经验与大家分享,以帮助更多的企业提高认识与管理水平,避免因管理不善给企业造成的重大损失。
俞生林,汪健,王三南,管欣娴,程秀芳,潘江,季正华,肖志辉,冯星[9]（2010）在《新生儿败血症时外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞的变化及其临床意义》文中研究说明目的探讨新生儿败血症时外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞（Treg细胞）的水平及其意义。方法用流式细胞仪检测26名正常足月新生儿（正常足月儿组）、14例单纯早产儿（单纯早产儿组）及21例新生儿败血症患儿（败血症组）外周血中CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞的水平。结果正常足月儿组与单纯早产儿组差异无统计学意义（P>0.05）;败血症组与正常足月儿组、单纯早产儿组比较均显着升高（均P<0.01）。结论外周血中Treg细胞的相对增加可能在新生儿败血症发生后淋巴细胞应答无能及免疫抑制中发挥作用。
黎宏宇[10]（2009）在《阿维菌素抗炎作用及作用机制的研究》文中研究表明已报道大环内酯类中一些药物如红霉素,罗红霉素,伊维菌素等都具有抗炎作用。伊维菌素为阿维菌素的衍生物,本文通过建立体内外炎症模型,研究阿维菌素的抗炎作用及作用机制。通过腹腔注射LPS构建小鼠体内炎症性休克模型,证明阿维菌素能有效的提高炎症性休克小鼠的生存率;通过MTT法检测阿维菌素的细胞毒性作用;运用双抗夹心ELISA法研究不同剂量阿维菌素对LPS诱导的小鼠单核-巨噬细胞（RAW264.7）细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10等分泌的影响;运用免疫荧光和Western blotting方法研究阿维菌素对NF-κB和MAPKs两条炎症信号转导通路的影响。体外实验证实,阿维菌素可使促炎因子TNF-α和IL-1β表达明显下降,抗炎因子IL-10上升;通过LPS激活的两条信号转导通路,证实阿维菌素剂量依赖性的抑制JNK、p38等蛋白激酶的磷酸化和NF-κB的核位移。本研究表明大环内酯类抗生素阿维菌素可以提高炎症性小鼠生存率,影响相关细胞因子的表达以及抑制两条炎症信号转导通路而发挥抗炎作用。
二、败血性休克与免疫（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、败血性休克与免疫（论文提纲范文）
（1）细胞因子在血液系统肿瘤患者血流感染中的应用价值（论文提纲范文）
| 材料和方法 |
| 1 对象 |
| 2 方法 |
| 3 统计学处理 |
| 结 果 |
| 1 患者一般特征 |
| 2 各组患者血清标志物比较及其诊断价值 |
| 3 血培养阳性的败血症组内比较 |
| 讨 论 |
（2）高迁移率家族蛋白新成员HMGXB4对小鼠全身性炎症的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩写一览表 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 LPS刺激对小鼠腹腔巨噬细胞HMGXB4 表达的影响 |
| 2.1 实验材料与方法 |
| 2.1.1 实验小鼠 |
| 2.1.2 试剂耗材 |
| 2.1.3 试剂配制 |
| 2.1.4 主要仪器设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离 |
| 2.2.2 实时荧光定量PCR |
| 2.2.3 Western blot免疫印迹检测 |
| 2.2.4 巨噬细胞的免疫荧光 |
| 2.3 统计学分析 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 LPS刺激可诱导小鼠巨噬细胞HMGXB4 的表达 |
| 2.4.2 证实HMGXB4是一细胞核蛋白 |
| 2.5 讨论 |
| 2.5.1 LPS刺激引起的先天性固有免疫应答反应 |
| 2.5.2 HMGB1蛋白与先天性固有免疫应答 |
| 第3章 Hmgxb4基因敲除小鼠的构建及其特征 |
| 3.1 实验材料与方法 |
| 3.1.1 Hmgxb4基因缺失小鼠的构建 |
| 3.1.2 试剂耗材 |
| 3.1.3 试剂配制 |
| 3.1.4 主要仪器设备 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 小鼠基因型鉴定 |
| 3.2.2 小鼠体重监测 |
| 3.3 统计学分析 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 Hmgxb4~(neo/neo)敲除小鼠的鉴定及特征 |
| 3.4.2 Hmgxb4-CMV-Cre敲除小鼠的鉴定及特征 |
| 3.5 讨论 |
| 3.5.1 HMGBs蛋白家族基因缺失的表型 |
| 第4章 Hmgxb4 基因缺失改善LPS诱导的败血症死亡率和组织损伤 |
| 4.1 实验材料与方法 |
| 4.1.1 实验小鼠 |
| 4.1.2 试剂耗材 |
| 4.1.3 试剂配制 |
| 4.1.4 主要仪器设备 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 小鼠败血症模型制备及生存曲线 |
| 4.2.1.1 内毒素(LPS)诱导小鼠败血症模型的制备 |
| 4.2.1.2 多微生物(CLP)诱导小鼠败血症模型的制备 |
| 4.2.2 全身性炎症反应综合症(SIRS)的诱导 |
| 4.2.3 血清炎症因子的ELISA分析 |
| 4.2.4 组织包埋切片 |
| 4.2.5 苏木素-伊红(HE)染色 |
| 4.2.6 TUNEL染色检测肺组织细胞凋亡 |
| 4.2.7 LGALS3(Mac2)免疫荧光鉴定肺组织巨噬细胞的浸润 |
| 4.2.8 肺组织通透性检测 |
| 4.3 统计学分析 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 Hmgxb4基因缺失延缓全身性炎症反应诱导的小鼠败血症死亡率 |
| 4.4.2 Hmgxb4 基因缺失减轻LPS诱导的多器官损伤 |
| 4.4.3 Hmgxb4 基因缺失改善LPS诱导的肺组织细胞凋亡,免疫细胞浸润与肺血管通透性 |
| 4.4.4 Hmgxb4基因缺失对经典的促炎细胞因子没有影响 |
| 4.5 讨论 |
| 4.5.1 全身性炎症反应综合症(SIRS) |
| 4.5.2 血管内皮系统紊乱与多器官损伤 |
| 第5章 Hmgxb4 基因缺失通过抑制NOS2 的表达减少NO的产生改善LPS诱导的急性肺损伤 |
| 5.1 实验材料与方法 |
| 5.1.1 实验小鼠 |
| 5.1.2 实验细胞 |
| 5.1.3 试剂与耗材 |
| 5.1.4 试剂配制 |
| 5.1.5 主要仪器设备 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 RNA测序 |
| 5.2.2 qRT-PCR |
| 5.2.3 Western blot |
| 5.2.4 NO测定 |
| 5.2.5 10T1/2细胞的培养 |
| 5.2.6 NOS2 enhancer双荧光素酶报告质粒构建 |
| 5.2.7 NOS2 enhancer双荧光素酶报告截短质粒构建 |
| 5.2.8 NOS2 enhancer双荧光素酶报告质粒的活性检测 |
| 5.2.9 肺组织通透性的检测 |
| 5.3 统计学分析 |
| 5.4 实验结果 |
| 5.4.1 HMGXB4 缺失显着改变LPS诱导的巨噬细胞基因表达谱 |
| 5.4.2 Nos2 基因是HMGXB4 调控的潜在靶基因 |
| 5.4.3 HMGXB4 过表达促进LPS介导的巨噬细胞NOS2 表达和NO产生 |
| 5.4.4 HMGXB4 反式激活Nos2 基因 |
| 5.4.5 HMGXB4 缺失明显减轻LPS诱导的肺组织损伤和NOS2 表达 |
| 5.5 讨论 |
| 5.5.1 一氧化氮合成酶 |
| 5.5.2 诱导型NOS(NOS2)产生的NO和血管内皮系统紊乱 |
| 第6章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 工作总结示意图 |
| 6.3 进一步工作的方向 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（3）雷公藤甲素衍生物的设计、合成及活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 雷公藤甲素 |
| 1.2 雷公藤甲素生理活性及毒副作用 |
| 1.2.1 免疫抑制、抗炎活性 |
| 1.2.2 抗肿瘤活性 |
| 1.2.3 抗雄性生育活性 |
| 1.2.4 毒副作用 |
| 1.3 雷公藤甲素C_(14) 羟基结构修饰进展 |
| 1.3.1 酯化修饰 |
| 1.3.2 环氧化修饰 |
| 1.3.3 氟取代修饰 |
| 1.3.4 铵盐取代修饰 |
| 1.4 雷公藤甲素的构效关系 |
| 1.5 课题研究的目的和意义 |
| 1.6 论文的总体工作 |
| 1.7 参考文献 |
| 2 课题设计 |
| 2.1 雷公藤甲素的抗炎、免疫抑制活性与iNOS的关系 |
| 2.2 iNOS催化NO产生的机理 |
| 2.3 iNOS抑制剂 |
| 2.4 设计思路 |
| 2.5 化合物设计 |
| 2.5.1 TR-X系列衍生物的设计 |
| 2.5.2 TRN-X系列衍生物的设计 |
| 2.6 化合物活性评价 |
| 2.7 本章小结 |
| 2.8 参考文献 |
| 3 化学合成 |
| 3.1 英文缩写对照表 |
| 3.2 TR-X系列衍生物合成路线的探索 |
| 3.2.1 TR活性酯的制备 |
| 3.2.2 TR活性酯与ω氨基氨基酸的缩合 |
| 3.3 TRN-X系列衍生物合成路线的探索 |
| 3.4 本章小结 |
| 3.5 参考文献 |
| 4 实验部分 |
| 4.1 主要试剂以及仪器 |
| 4.2 雷公藤甲素琥珀酸酯(TR)的合成 |
| 4.3 氨基酸衍生物TR-1~TR-9 的合成 |
| 4.3.1 L-精氨酸甲酯衍生物TR-1 的合成 |
| 4.3.2 L-精氨酸衍生物TR-2 的合成 |
| 4.3.3 N-硝基-L-精氨酸甲酯衍生物TR-3 的合成 |
| 4.3.4 N-硝基-L-精氨酸衍生物TR-4 的合成 |
| 4.3.5 L-瓜氨酸衍生物TR-5 的合成 |
| 4.3.6 L-赖氨酸衍生物TR-6 的合成 |
| 4.3.7 L-赖氨酸甲酯衍生物TR-7 的合成 |
| 4.3.8 L-鸟氨酸衍生物TR-8 的合成 |
| 4.3.9 L-鸟氨酸甲酯衍生物TR-9 的合成 |
| 4.4 氨基吡啶衍生物TRN-1~TRN-3 的合成 |
| 4.4.1 2-氨基吡啶衍生物TRN-1 的合成 |
| 4.4.2 4-甲基2-氨基-吡啶衍生物TRN-2 的合成 |
| 4.4.3 4-乙基-2-氨基-吡啶衍生物TRN-3 的合成 |
| 5 HPLC分析以及活性评价 |
| 5.1 HPLC分析方法研究及稳定性考察 |
| 5.1.1 检测波长 |
| 5.1.2 流动相筛选 |
| 5.1.3 稳定性考察 |
| 5.1.4 小结 |
| 5.2 抗炎活性评价 |
| 5.2.1 实验材料及仪器 |
| 5.2.2 实验方法 |
| 5.2.3 实验结果 |
| 5.2.4 活性实验初步结论 |
| 6 论文总结 |
| 硕士研究生在读期间成果 |
| 致谢 |
| 附录Ⅰ各目标化合物表征图谱 |
| 一、雷公藤甲素琥珀酸酯(TR) |
| 二、TR-HATU活化酯 |
| 三、TR-1 |
| 四、TR-2 |
| 五、TR-3 |
| 六、TR-4 |
| 七、TR-5 |
| 八、TR-6 |
| 九、TR-7 |
| 十、TR-8 |
| 十一、TR-9 |
| 十二、TRN-1 |
| 十三、TRN-2 |
| 十四、TRN-3 |
| 附录Ⅱ文献综述 |
| 1 雷公藤甲素的生理活性 |
| 2 雷公藤甲素的临床不良反应及药代动力学特征 |
| 3 构效关系 |
| 4 雷公藤甲素全合成研究进展 |
| 5 雷公藤甲素结构修饰进展 |
| 6 进入临床研究的甲素衍生物 |
| 7 一氧化氮及一氧化氮合酶 |
| 7.1 NO在免疫系统中的作用 |
| 7.2 NO在其他系统中的作用 |
| 7.3 NO病理作用[35] |
| 7.4 一氧化氮合酶 |
| 8 总结与展望 |
| 9 参考文献 |
（4）慢病毒介导的TREM1及LBP基因沉默对LPS诱导下水牛单核巨噬细胞基因表达分子调控机制初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 髓样细胞触发受体1的研究进展 |
| 1.1.1 TREM1的结构 |
| 1.1.2 TREM1相关信号通路 |
| 1.1.3 抑制TREM1实验研究 |
| 1.1.4 TREM1的功能 |
| 1.1.5 TREM1与炎症性疾病关系 |
| 1.2 脂多糖结合蛋白的研究现状 |
| 1.2.1 LBP的结构 |
| 1.2.2 LBP的信号通路 |
| 1.2.3 LBP的功能 |
| 1.2.4 LBP在感染及炎症中的作用 |
| 1.2.5 LBP多态性临床研究 |
| 1.3 慢病毒载体介导RNA干扰的应用及前景 |
| 1.3.1 该技术的发现 |
| 1.3.2 该技术分子机制 |
| 1.3.3该技术的应用 |
| 1.3.4 基于慢病毒载体的RNAi |
| 1.4 本研究目的及意义 |
| 第二章 原代水牛单核巨噬细胞的分离培养 |
| 引言 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 原代PBMC细胞分离效果比较 |
| 2.2.2 不同血清浓度培养对细胞生长的影响 |
| 2.2.3 单核巨噬细胞的原代培养 |
| 2.2.4 水牛单核巨噬细胞鉴定 |
| 2.2.5 水牛单核巨噬细胞TREM1及CD14基因表达水平 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 结论 |
| 第三章 抑制TREM1基因表达对LPS诱导下水牛单核巨噬细胞炎症相关基因表达影响的研究 |
| 引言 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 水牛TREM1-shRNA慢病毒包装及滴度测定 |
| 3.2.2 LPS不同浓度及刺激时间对单核巨噬细胞的影响 |
| 3.2.3 TREM1-shRNA慢病毒感染单核巨噬细胞条件优化 |
| 3.2.4 基因沉默TREM1对单核巨噬细胞相关基因表达的影响 |
| 3.2.5 TREM1基因沉默对TNF-α及IL-1β细胞因子分泌水平的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 结论 |
| 第四章 抑制LBP基因表达对LPS诱导下水牛单核巨噬细胞相关基因表达影响的研究 |
| 引言 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 实验方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 LBP-shRNA慢病毒载体包装及滴度测定 |
| 4.2.2 LBP-shRNA慢病毒感染细胞最佳条件的摸索 |
| 4.2.3 LBP基因沉默对单核巨噬细胞LBP基因及相关基因表达的影响 |
| 4.2.4 ELISA检测相关基因的蛋白表达水平 |
| 4.2.5 TREM1和LBP双基因慢病毒联合感染对水牛单核巨噬细胞的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 结论 |
| 第五章 TREM1/LBP基因表达下调的水牛单核巨噬细胞转录组学分析 |
| 引言 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验仪器设备及试剂 |
| 5.1.2 实验试剂 |
| 5.1.3 微量样品处理及收集 |
| 5.1.4 测序基本流程 |
| 5.1.5 测序数据质量评估 |
| 5.1.6 基因表达数据分析 |
| 5.1.7 荧光定量PCR验证差异基因 |
| 5.1.8 ELISA检测外源蛋白 |
| 5.1.9 统计学分析 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 总RNA质量检测 |
| 5.2.2 测序数据质量评估 |
| 5.2.3 参考序列比对分析 |
| 5.2.4 基因表达水平分析 |
| 5.2.5 RNA-seq相关性分析 |
| 5.2.6 基因差异表达分析 |
| 5.2.7 差异基因功能分析 |
| 5.2.8 qRT-PCR验证表达差异基因准确性 |
| 5.2.9 ELISA检测外源蛋白分泌情况 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
| 附录 |
（5）猪链球菌2型胞外蛋白HP1856促炎机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词( Abbreviation) |
| 1 文献综述 |
| 1.1 猪链球菌及猪链球菌病 |
| 1.1.1 概述 |
| 1.1.2 病原学特性研究 |
| 1.1.3 流行病学研究 |
| 1.2 猪链球菌相关毒力因子和疫苗候选抗原研究进展 |
| 1.2.1 荚膜多糖(CPS) |
| 1.2.2 溶菌酶释放蛋白(MRP)和胞外因子(EF) |
| 1.2.3 溶血素(SLY) |
| 1.2.4 纤维蛋白结合蛋白(FBPS) |
| 1.2.5 33Kda蛋白 |
| 1.2.6 猪链球菌疫苗候选抗原 |
| 1.3 猪链球菌感染引起猪链球菌性脑膜炎 |
| 1.4 猪链球菌致病机理以及诱导宿主产生败血性休克 |
| 1.5 猪链球菌病的防控与展望 |
| 2 研究的目的与意义 |
| 3 材料方法 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 菌种和质粒 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要仪器 |
| 3.1.4 培养基和抗生素的配制 |
| 3.1.5 蛋白表达和纯化相关试剂 |
| 3.1.6 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western Blotting相关试剂 |
| 3.1.7 ELISA相关试剂 |
| 3.1.8 试验动物及细胞 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 菌株培养条件 |
| 3.2.2 重组蛋白表达质粒的构建及鉴定 |
| 3.2.3 重组蛋白表达与纯化 |
| 3.2.4 细胞株的培养及传代 |
| 3.2.5 实时荧光定量PCR检测重组蛋白的致炎性 |
| 3.2.6 信号通路抑制剂试验 |
| 3.2.7 TLR2和TLR4特异性抗体封闭试验 |
| 3.2.8 过表达菌株pset2-1856的构建 |
| 3.2.9 过表达菌株生长曲线的测定 |
| 3.2.10 过表达菌株致炎效果的检测 |
| 3.2.11 过表达菌株与亲本菌株感染小鼠后体内组织含菌量以及细胞因子检测 |
| 4 结果与分析 |
| 4.1 重组蛋白表达质粒的构建及鉴定 |
| 4.2 重组蛋白SDS-PAGE检测以及western blot验证 |
| 4.3 重组蛋白中内毒素的测定 |
| 4.4 不同浓度的内毒素含量对RAW264.7细胞的促炎性检测 |
| 4.5 重组蛋白浓度测定 |
| 4.6 重组蛋白在RAW264.7细胞上促炎效果的检测 |
| 4.7 验证TLR2、TLR4在诱导炎症反应过程中的作用 |
| 4.8 ERK1/2、JNK、NF-kB、PI3K和P38在促炎反应中的作用 |
| 4.9 过表达菌株的构建 |
| 4.10 过表达菌株生长曲线的测定 |
| 4.11 过表达菌株致炎效果的检测 |
| 4.12 过表达菌株与亲本菌株感染小鼠后体内组织含菌量测定以及细胞因子检测 |
| 5 讨论 |
| 6 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（6）甘草黄酮对LPS诱导的小鼠急性肺损伤和败血性休克保护作用的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写词表 |
| 前言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 急性肺损伤和败血性休克的研究进展 |
| 1 机体对 LPS 免疫应答 |
| 2 LPS 信号转导通路 |
| 3 免疫治疗研究进展与展望 |
| 第二章 甘草黄酮的研究进展 |
| 1 概况 |
| 2 甘草黄酮的药理学研究 |
| 3 可能的毒副作用 |
| 第二篇 实验内容 |
| 第一章 甘草黄酮对小鼠急性肺损伤的保护作用 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二章 甘草黄酮对 ALI 小鼠 NF-κB 信号通路的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 甘草黄酮对小鼠败血性休克促炎症因子的调节作用 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（7）对聚伞花素抗炎作用的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写表 |
| 引言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 对聚伞花素的研究进展 |
| 1 牛至概述 |
| 2 对聚伞花素的理化性质及合成 |
| 3 对聚伞花素的药理活性 |
| 第二章 败血症的研究进展 |
| 1 败血症概述 |
| 2 败血症的免疫学研究 |
| 3 败血症对机体机能的影响 |
| 4 败血症的分子机制 |
| 5 败血症的治疗 |
| 第二篇 实验部分 |
| 第一章 对聚伞花素体外抗炎作用及机制的研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二章 对聚伞花素对败血症小鼠的保护作用 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（8）JZ公司应收账款管理对策研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 选题背景和意义 |
| 1.1.1 选题背景 |
| 1.1.2 选题意义 |
| 1.2 主要研究内容 |
| 1.3 研究思路与方法 |
| 1.4 应收帐款管理的相关研究综述 |
| 1.4.1 国外应收帐款管理的相关研究 |
| 1.4.2 国内应收帐款管理的相关研究 |
| 第二章 相关理论研究综述 |
| 2.1 应收帐款管理的基本概念 |
| 2.1.1 应收帐款定义 |
| 2.1.2 对企业生产经营的影响 |
| 2.1.3 考核应收帐款管理的几个基本指标 |
| 2.1.4 应收帐款产生的根本原因 |
| 2.2 应收帐款管理的重点 |
| 2.2.1 应收帐款的风险类型 |
| 2.2.2 应收帐款的风险控制 |
| 2.3 应收帐款管理的创新 |
| 2.3.1 应收帐款管理的创新——信用管理 |
| 2.3.2 进行客户信用管理的原因 |
| 2.3.3 主要管控措施 |
| 2.4 应收帐款管理方法研究 |
| 2.4.1 信用管理 |
| 2.4.2 保理业务 |
| 2.4.3 应收帐款证券化 |
| 第三章 JZ公司应收账款管理现状分析 |
| 3.1 JZ公司简介 |
| 3.2 JZ公司应收帐款管理现状 |
| 3.3 JZ公司应收帐款管理特点 |
| 3.4 JZ公司应收帐款管理不足 |
| 第四章 JZ公司应收帐款管理模式研究 |
| 4.1 JZ公司应收帐款管理创新——信用控制 |
| 4.1.1 信用控制的意义 |
| 4.1.2 JZ公司信用管理的目标 |
| 4.1.3 职能部门设置和人员配备 |
| 4.1.4 建立信用管理体系的步骤和内容 |
| 4.2 JZ公司应收帐款管理——保理 |
| 4.2.1 背景介绍 |
| 4.2.2 无追索权出售应收帐款 |
| 4.3 JZ公司应收帐款管理——日常管理 |
| 4.3.1 应收账款账龄管理法 |
| 4.3.2 对帐制度 |
| 4.3.3 收款管理 |
| 4.3.4 争议的解决 |
| 4.3.5 长账龄应收帐款的管理 |
| 4.3.6 坏帐的管理 |
| 第五章 JZ公司应收帐款管理对策研究 |
| 5.1 建立应收帐款信息管理系统 |
| 5.2 转变经营观念 |
| 5.3 加强绩效考核 |
| 5.4 加强人员培训 |
| 第六章 研究结论与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（9）新生儿败血症时外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞的变化及其临床意义（论文提纲范文）
| 1 资料和方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 标本采集 |
| 1.2.1 试剂 |
| 1.2.1 CD4+CD25+CD127low/-Treg 细胞检测 |
| 1.3 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
（10）阿维菌素抗炎作用及作用机制的研究（论文提纲范文）
| 内容提要 |
| 前言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第1章 大环内酯类药物抗炎作用的研究进展 |
| 1.1 大环内酯类药物抗炎作用分子机制的研究 |
| 1.2 大环内酯类药物在 LPS 诱导的炎症信号通路研究进展 |
| 1.3 大环内酯类抗炎活性的动物模型药理研究 |
| 第2章 阿维菌素研究进展 |
| 2.1 阿维菌素的背景 |
| 2.2 阿维菌素的理化性质 |
| 2.3 阿维菌素的毒理作用 |
| 2.4 阿维菌素的作用机理 |
| 2.5 阿维菌素的特点 |
| 2.6 阿维菌素的临床应用 |
| 第二篇 实验内容 |
| 第1章 阿维菌素对败血性休克小鼠的保护作用 |
| 1.1 阿维菌素对败血性休克小鼠的保护作用 |
| 1.2 结果 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 第2章 阿维菌素对体外细胞因子及信号传导通路影响的研究 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 导师简介 |
四、败血性休克与免疫（论文参考文献）
- [1]细胞因子在血液系统肿瘤患者血流感染中的应用价值[J]. 高倩,齐天琪,郝启,张维婕,杨靖娴,梁国威. 标记免疫分析与临床, 2021(11)
- [2]高迁移率家族蛋白新成员HMGXB4对小鼠全身性炎症的影响及机制研究[D]. 贺香勤. 南昌大学, 2019(01)
- [3]雷公藤甲素衍生物的设计、合成及活性研究[D]. 徐孝浪. 成都大学, 2019(01)
- [4]慢病毒介导的TREM1及LBP基因沉默对LPS诱导下水牛单核巨噬细胞基因表达分子调控机制初步研究[D]. 谢亮亮. 广西大学, 2017(06)
- [5]猪链球菌2型胞外蛋白HP1856促炎机制研究[D]. 宋娅静. 华中农业大学, 2016(05)
- [6]甘草黄酮对LPS诱导的小鼠急性肺损伤和败血性休克保护作用的研究[D]. 张佳莹. 吉林大学, 2012(09)
- [7]对聚伞花素抗炎作用的研究[D]. 仲伟婷. 吉林大学, 2012(09)
- [8]JZ公司应收账款管理对策研究[D]. 张佳. 吉林大学, 2012(10)
- [9]新生儿败血症时外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞的变化及其临床意义[J]. 俞生林,汪健,王三南,管欣娴,程秀芳,潘江,季正华,肖志辉,冯星. 苏州大学学报(医学版), 2010(06)
- [10]阿维菌素抗炎作用及作用机制的研究[D]. 黎宏宇. 吉林大学, 2009(08)