钙粘蛋白与乳腺癌

一、钙粘蛋白与乳腺癌（论文文献综述）

陈凯^[1]（2021）在《miR-876调控POSTN促进肝癌进展和纤维化的机制研究》文中认为一、研究背景肝细胞性肝癌（HCC）是世界范围内最常见恶性肿瘤之一,目前在最致命肿瘤中致死率排名第二。在过去的几十年,针对肝癌已经有了众多治疗手段,如精准的肝段切除术,肝移植术,肝动脉栓塞化疗及肝癌射频消融术等,但是肝癌患者的预后仍然不令人满意,据统计,肝癌患者5年总生存率低于20%。肝癌起病隐匿,肿瘤进展快,容易复发和肝内转移都是导致肝癌预后较差的可能原因。因此,探究肝癌进展,转移的分子学机制有利于寻找潜在的肝癌治疗分子靶点,开发可能的早期肝癌诊断标志物对肝癌的系统治疗非常重要。微小RNA（miRNA）是以由一类进化保守的,由约22个核苷酸组成的非编码小RNA,微小RNA可结合在靶基因信使RNA（m RNA）的3?端的非翻译区（UTR区）通过降解信使RNA或抑制信使RNA翻译的方式发挥转录后调控作用。研究显示微小RNA几乎参与了肿瘤细胞发生发展的全部过程,包括细胞的干性,肿瘤发生,细胞的增殖,细胞的凋亡,细胞的迁移和侵袭,细胞的转移等等。也有越来越多的研究显示各种肿瘤中均有不同微小RNA的异常表达,包括肝癌。例如,miR-876被发现在胆管癌（CCA）中表达降低,并能通过抑制BCL-XL的表达诱导细胞的增殖;miR-589被发现在肝细胞性肝癌中表达增高并能通过STAT3信号通路来促进细胞的干性和化疗抵抗。然而,在肝细胞性肝癌中异常表达和对诊断或者预后有指示作用的miRNA仍然缺乏有待进一步研究。骨膜蛋白（POSTN）,也称为成骨细胞特异性因子2,是一大小为93.3k Da的细胞外基质（ECM）蛋白。POSTN能通过和众多其他蛋白如纤维结合蛋白,胶原蛋白及腱生蛋白等互相联系进而对细胞外基质进行改造。POSTN对胶原纤维的发生,细胞粘附,细胞迁移和上皮间质转换等都有重要作用。目前研究发现多种肿瘤中亦有POSTN的异常表达,包括头颈部肿瘤,肺癌,神经纤维瘤,乳腺癌,结直肠肿瘤及肝细胞性肝癌等,对肿瘤细胞的生存,上皮间质转换,血管生成和肿瘤微环境的形成都有重要作用。例如:研究发现胰腺癌细胞能刺激间质细胞分泌POSTN,进而促进肿瘤基质成绩和上皮间质转化进而促进肿瘤进展。然后,在肝细胞性肝癌中POSTN的表达及调控机制的研究尚少,有待进一步研究。在本文中,我们通过对TCGA数据库中异常表达的miRNA进行筛选,鉴定出了一异常表达的miRNA,即miR-876。我们还进一步探求了其细胞功能和对下游靶基因的调节机制。我们还在众多临床肝细胞性肝癌的临床组织标本中监测了miR-876和其靶基因POSTN的表达,分析了他们的表达和肝细胞性肝癌患者的临床病理参数和预后的关系。我们的研究提示miR-876及POSTN在肝细胞性肝癌中异常表达,可能作为一潜在的诊断性分子标志物和治疗靶点。二、研究方法1.分析49对肝癌及对应的癌旁样本的TCGA数据库,分析异常表达的miRNA,筛选出表达差异倍数最高的前20个微小RNA。2.收集了从2006年到2010年在西南医院肝胆科因患原发性肝细胞性肝癌而行原发性肝癌切除术的共计127例患者的组织样本,本研究说包含的所有病人术前均未接收放疗或者化疗。所有患者术后均定期性影像学（即超声或CT）即血液AFP检测。本研究团队及西南医院临床研究中心完成患者的预后随访,随访为结合到我院复查情况,定期（每2-3月）电话随访。3.采用实时定量PCR的方法检测了肝癌组织样本中miR-876和POSTN的表达水平;采用免疫组化（IHC）方法在原发性肝细胞性肝癌组织样本中检测了样本中POSTN及EMT标志物（E钙粘蛋白,N钙粘蛋白,波形蛋白）的表达情况,并在肝癌合并肝硬化样本中检测了POSTN的表达。4.采用Kaplan-Meier曲线分析（单因素）和Cox回归（多因素）方法分析了影响HCC患者预后的危险因素及独立危险因素,并进一步分析了miR-876和POSTN共表达对HCC预后的影响。5.采用了生物信息学及双荧光素酶报告基因实验研究了miR-876可能的调控靶基因,并进一步采用实时定量PCR及Western Blotting（WB）方法进行验证。6.Mi R-876的具体体内生物学行为在裸鼠实验中进行检测,最终成瘤效果以活体成像方式进行检测验证。7.采用WB方法分析了miR-876的表达对EMT标志物的影响,并在人肝星状细胞系LX-2中检测了纤维化蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,胶原蛋白-I的表达。采用transwell小室侵袭实验研究了miR-876对肝癌细胞系的侵袭能力的影响。三、研究结果1.通过对49对肝癌患者的TCGA数据库进行分析,我们筛选出了表达差异倍数排名前20的高表达及低表达miRNA,进一步筛选鉴定出miR-876。2.我们发现miR-876在肝癌细胞系及肝癌组织中低表达。首先,我们发现miR-876在人正常肝细胞系L02中表达高,而在肝癌细胞系SMMC-7721,Hep G2,Huh-7及HCC-LM3中表达较低;接下来我们在50对肝癌及癌旁样本中检测了miR-876的表达,发现miR-876在肝癌组织/癌旁组织的比率62%有降低,16%变化不明显,而仅有22%表达升高。3.miR-876的低表达和肝硬化、癌栓及肝癌TNM分期相关。我们在127例HCC组织样本中检测了miR-876的表达,分析了其表达水平和HCC患者临床病理参数的相关性。发现miR-876的表达和肝硬化（P=0.026）、肝癌癌栓形成（P=0.031）及TNM分期（P=0.021）相关。而和其他病理参数,如患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤数量、乙肝、AFP水平、肝Child分级未发现显着相关性。我们还进一步在肝硬化及癌栓患者中检测了miR-876的表达水平,发现miR-876在肝硬化组织样本中表达较非肝硬化患者显着低（P=0.0294）,而其在有肝癌癌栓患者中表达亦显着低（P=0.0367）。4.miR-876抑制细胞侵袭、EMT及细胞纤维化。我们通过构建了miR-876过表达及干扰细胞株,通过transwell细胞侵袭实验发现过表达miR-876的肝癌细胞侵袭力减弱,而干扰miR-876后侵袭力增强,进一步通过WB实验发现过表达miR-876后N-钙粘蛋白及波形蛋白表达减弱,而干扰miR-876后E-钙粘蛋白表达亦减弱。在人星状细胞系LX-2中干扰miR-876表达后发现α-SMA及胶原蛋白-I表达减弱。5.miR-876靶向POSTN,并抑制其表达。我们通过生物信息学分析发现POSTN的3?UTR存在2个能与miR-876种子区结合的序列,进一步双荧光素酶报告基因实验发现野生型p GL3 POSTN荧光素酶质粒和miR-876共转染入293细胞后其萤火虫荧光信号/海肾荧光素酶荧光信号比值显着性降低,进一步WB实验证实当干扰miR-876后HCC细胞POSTN表达升高,而过表达组POSTN显着降低。我们进一步在127例肝癌临床组织标本中同时检测了miR-876和POSTN的表达,发现两者表达呈显着负相关,R值为-0.477,相关线性方程为y=-0.486x+0.394。6.miR-876通过POSTN抑制EMT及细胞纤维化。首先,我们发现过表达POSTN的肝癌细胞侵袭力增强,并促进了EMT标志物及纤维化标志物的表达。其次,我们在过表达POSTN的基础上转染了miR-876,发现共转染miR-876后抵消了侵袭力增加及EMT及纤维化标志物蛋白的表达。7.miR-876在体内动物实验下减弱HCC细胞肿瘤成瘤能力及抑制肿瘤进展。HCC细胞其miR-876过表达的HCC细胞被注入裸鼠肝包膜下,进行动物实验,1月后行活体成像检测,我们发现对照组（无干预的HCC细胞）成瘤数量多,活体成像荧光强度强,而实验组行miR-876过表达后,裸鼠原位肝脏成瘤明显减少,活体检测荧光信号弱,表明在体内实验条件下,miR-876能抑制HCC的成瘤及肿瘤进展。8.POSTN和肝组织EMT及肝硬化相关。我们进一步在127例肝癌组织中检测了POSTN的表达,发现同miR-876类似,POSTN表达和肿瘤数量、肝硬化、肝癌癌栓形成及TNM分期相关,而和其他临床标识物未发现明显相关性,进一步非参数检验验证了肝硬化或肿瘤癌栓组HCC患者的POSTN表达明显增高。IHC实验发现POSTN主要表达与肝癌间质,部分肝癌细胞亦有表达,POSTN高表达的样本N钙粘蛋白及波形蛋白表达增高,而E钙粘蛋白表达降低。而在肝癌伴肝硬化标本中发现POSTN亦有强表达。9.miR-876和POSTN和肝癌患者术后预后相关。进一步KM单因素生存分析发现肿瘤大小（P=0.037）、肝硬化（P=0.041）、肝癌癌栓状态（P=<0.01）、TNM分期（P=0.001）、miR-876低表达（P=0.022）及POSTN高表达（P=0.012）均是影响HCC患者预后的危险因素,多因素回归分析发现肝癌癌栓（风险比=2.530,95%CI区间=1.433-4.468,P=0.001）及POSTN的表达（风险比=1.717,95%CI区间=1.008-2.926,P=0.047）是影响肝癌预后的独立危险因素。进一步共表达分析提示miR-876低表达和POSTN高表达的HCC患者预后较之于miR-876低表达和POSTN高表达更差。四、研究结论综上所述,我们从公开的TCGA数据库中鉴定出了肝癌中一显着性低表达的miRNA,即miR-876。并探索了其对细胞的功能,即能抑制细胞侵袭,EMT和纤维化。而miR-876这些功能是通过调控POSTN的表达实现的。miR-876在体内动物实验下能抑制肝癌的成瘤及进展;我们还在众多肝癌临床标本中从m RNA及蛋白水平证明了miR-876和POSTN的异常表达和肝癌的EMT水平,纤维化水平及进展相关,而miR-876和POSTN的异常表达和HCC的预后相关,而联合miR-876和POSTN检测可能更好预测HCC的预后以及作为潜在的治疗靶点。

游洪^[2]（2021）在《Fascin通过部分依赖EMT促进垂体腺瘤的侵袭》文中研究说明目的:本研究旨在探讨上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）进程在Fascin促进垂体腺瘤（Pituitary adenoma,PA）的侵袭中的作用,为PA侵袭的机制提供实验依据。方法:1.将小鼠垂体腺瘤At T-20细胞进行实验,实验分组如下:（1）PA+blank control组（PA+BC组）、（2）PA+Fascin negative control组（PA+Fascin-NC组）,（3）PA+Fascin interference group组（PA+Fascin-si RNA组）,运用RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术特异性下调小鼠垂体瘤细胞At T-20中Fascin的表达。Transwell实验检测Fascin下调后细胞的侵袭潜能变化。使用Cell Counting Kit-8和流式细胞术检测Fascin下调后的细胞增殖变化、周期分布变化和细胞凋亡数量变化情况。使用透射电子显微镜观察Fascin下调后细胞的超微结构变化。采用蛋白质免疫印迹法、免疫荧光和实时定量PCR检测Fascin下调后细胞的上皮标志物（E-钙粘蛋白）、Fascin、间充质标志物（N-钙粘蛋白、波形蛋白）和转录因子（Twist）的表达变化。2.将小鼠垂体腺瘤At T-20细胞分为（1）PA+blank control组（PA+BC组）、（2）PA+E-cadherin negative control组（PA+E-cadherinNC组）、（3）PA+E-cadherin over-expression组（PA+E-cadherin OE组）,通过过表达小鼠垂体瘤细胞At T-20中E-cadherin的表达。Transwell实验检测E-钙粘蛋白过表达后的细胞侵袭潜能变化。Cell Counting Kit-8和流式细胞术检测E-钙粘蛋白过表达后的细胞增殖变化和周期分布变化。采用蛋白质免疫印迹法和实时定量PCR检测E-钙粘蛋白过表达后的Fascin、E-钙粘蛋白和转录因子（Twist）的表达。统计学分析则使用Pearson统计法检测EMT相关标志物、侵袭和Fascin之间的相关性。结果:1、下调Fascin表达通过EMT进程对At T-20细胞的影响。（1）CCK-8检测细胞增殖结果:PA+Fascin-si RNA组的垂体腺瘤细胞增殖能力与PA+FascinNC组相比下降。（2）Transwell检测细胞侵袭结果:PA+Fascin-si RNA组的垂体腺瘤细胞侵袭潜能与PA+Fascin-NC组相比下降。（3）细胞周期和凋亡结果:与PA+Fascin-NC组相比,PA+Fascinsi RNA组中的处于G1期的垂体腺瘤细胞比例上升;处于G2和S期的细胞比例则下降。与PA+FascinNC组相比,PA+Fascin-si RNA组中的垂体腺瘤细胞的凋亡数量明显上升。（4）TEM观察细胞超微结构:PA+Fascin-NC组的细胞结构大致正常,PA+Fascin-si RNA组的细胞内出现凋亡的形态学特征,可以见到凋亡小体形成。（5）蛋白质免疫印迹和Real-Time PCR结果:PA+Fascin-si RNA组的E-钙粘蛋白的表达和PA+Fascin-NC组相比上升,而Fascin、N-钙粘蛋白、波形蛋白以及转录因子Twist的表达均下降。（6）免疫组化结果:PA+Fascin-si RNA组的E-钙粘蛋白的表达和PA+FascinNC组相比上升,而Fascin、N-钙粘蛋白、波形蛋白和转录因子Twist的表达均下降。（7）统计学分析显示,侵袭与E-钙粘蛋白的表达呈负相关,而与N-钙粘蛋白、vimentin呈正相关;Fascin的表达与侵袭则呈正相关;Fascin的表达和E-钙粘蛋白的表达呈负相关,而Fascin的表达和N-钙粘蛋白、波形蛋白的表达均呈正相关。2、上调E-钙粘蛋白表达对At T-20细胞、Fascin的影响。（1）CCK-8检测细胞增殖结果:PA+E-cadherin OE组的垂体腺瘤细胞增殖能力与PA+Ecadherin-NC组相比下降。（2）Transwell检测细胞侵袭结果:PA+E-cadherin OE组的垂体腺瘤细胞侵袭潜能与PA+E-cadherin-NC组相比下降。（3）细胞周期结果:与PA+E-cadherin-NC组相比,PA+E-cadherin OE组中的G1期的垂体腺瘤细胞比例下降,而处于G2期的细胞比例则上升,S期的细胞比例则未见明显改变。（4）蛋白质免疫印迹和Real-Time PCR结果:PA+E-cadherin OE组的上皮标志物（E-钙粘蛋白）的表达与PA+E-cadherin-NC组相比表达增加,而Fascin和转录因子Twist表达则减少。（5）统计学分析显示,E-cadherin与侵袭呈负相关,Fascin与E-cadherin呈负相关。结论:Fascin可能是垂体腺瘤侵袭过程中的重要的关键因子,抑制Fascin的表达可以改变各种EMT标记物的表达水平,进而调节垂体肿瘤细胞的进展。Fascin可能通过部分依赖EMT途径促进垂体肿瘤细胞的侵袭。

刘子源^[3]（2021）在《人肝细胞癌中TRIM59与E，N-钙粘蛋白表达在肿瘤侵袭及转移中的相关性研究》文中研究指明目的:研究在肝细胞癌（HCC）细胞中三方基序59（TRIM59）的表达水平,与上皮间充质转换（EMT）中经典分子E,N-钙粘蛋白在肿瘤侵袭及迁移中的相关性。方法:购买6种HCC细胞系（Huh7、Hep3B、Hep G2、SK-Hep1、BEL7402、SMMC7721）及正常人肝细胞系LO2作为实验研究对象。采用实时荧光定量PCR法（qRT-PCR）检测各HCC及LO2细胞系中TRIM59 mRNA表达量,采用蛋白免疫印迹技术（Western Blot）测量实验细胞中TRIM59蛋白质表达量。选取实验中TRIM59 mRNA及蛋白相对高表达的HCC细胞系作为后期实验所需的细胞系。通过与抗TRIM59共培养出TRIM59表达下调的细胞株,携带TRIM59质粒（pc DNA3.1-TRIM59）的慢病毒感染培育出TRIM59表达上调的细胞株。蛋白印迹实验检测TRIM59干扰前后N-钙粘蛋白,E-钙粘蛋白表达量情况。划痕实验及Transwell实验检测TRIM59干扰前后HCC的侵袭及迁移能力。结果:qRT-PCR法和Western Blot法分析结果显示:TRIM59在HCC细胞株Huh7、Hep3B、Hep G2、SK-Hep1、BEL7402、SMMC7721中的mRNA和蛋白表达量相对于人正常肝细胞系LO2显着升高（P均<0.05）。在TRIM59蛋白被干扰的细胞株中,E-钙粘蛋白表达降低,N-钙粘蛋白表达增加;在TRIM59蛋白过表达的细胞株中,E-钙粘蛋白表达增加,N-钙粘蛋白表达降低（P均<0.05）。划痕实验及Transwell实验表明TRIM59高表达能明显增强肝细胞癌的侵袭及迁移能力（P均<0.05）。结论:TRIM59 mRNA及蛋白在肝细胞癌中高表达,可能通过调节EMT中的经典分子E-钙粘蛋白增加,N-钙粘蛋白表达减少,促进肝细胞癌的侵袭及迁移过程。TRIM59极大可能成为肝癌精准治疗又一新的靶标。

冯海湛^[4]（2020）在《神经鞘磷脂合成酶2（SGMS2）通过TGF-β/Smad信号通路促进乳腺癌转移的机制研究》文中认为研究背景与目的乳腺癌是全球范围内女性最常见的恶性肿瘤,是女性癌症死亡的主要原因之一,严重影响女性身心健康。乳腺癌的治疗包括手术、化疗、放疗等有效的综合治疗方案,但乳腺癌存在一定的复发转移风险,肿瘤转移是乳腺癌患者死亡的最重要原因。目前肿瘤转移机制并未完全阐明,因此进一步深入探讨乳腺癌转移相关机制具有重要意义。神经鞘磷脂合成酶2（sphingomyelin synthase 2,SGMS2）定位于细胞膜,以神经酰胺（Ceramide,Cer）和卵磷脂为底物,催化形成甘油二酯和神经鞘磷脂（sphingomyelin,SM）。Cer和SM均是细胞重要的脂质成分,相关研究显示其与恶性肿瘤发生密切相关。但SGMS2作为维持细胞内Cer和SM稳态的关键酶,目前关于该酶在肿瘤发生发展中的作用缺少明确详细的报道,对于SGMS2是否参与乳腺癌转移以及相关的分子机制更是知之甚少。我们的前期研究发现SGMS2通过Cer相关通路抑制乳腺癌细胞凋亡,促进细胞增殖。因此,本课题拟从细胞脂质代谢的角度,探讨SGMS2与乳腺癌转移的相关性,并进一步阐明相关的分子机制,为乳腺癌转移的研究及治疗提供新的科学依据。研究方法1.通过对GEO数据库数据进行统计学分析,确定了转移性与非转移性乳腺癌中SGMS2的表达差异。应用Real Time-PCR技术检测临床收集的转移性与非转移性乳腺癌样本中SGMS2的mRNA水平;2.选用MCF-7、MDA-MB-231细胞,构建过表达SGMS2和干扰SGMS2表达的乳腺癌细胞株;3.通过划痕愈合实验、Transwell侵袭实验、裸鼠尾静脉实验检测SGMS2对乳腺癌细胞的体外迁移、侵袭能力和体内肺转移能力的影响;4.应用细胞免疫荧光、Western Blot技术检测SGMS2对乳腺癌细胞EMT发生的影响及相关的信号通路;5.应用 Western Blot、ELISA 实验进一步探讨 SGMS2 激活 TGF-β/Smad信号通路的机制。结果1.乳腺癌组织和配对的癌旁组织之间SGMS2表达无明显差异,转移性乳腺癌样本中SGMS2表达增加。2.乳腺癌细胞过表达SGMS2可以促进细胞的迁移和侵袭能力,干扰SGMS2表达则得到相反结果。3.SGMS2通过激活TGF-β/Smad信号通路促进乳腺癌细胞的EMT过程。4.特异性阻断TGF-β/Smad信号通路可以逆转SGMS2介导的EMT发生。5.SGMS2过表达可以促进TGF-β1的转录以及分泌,从而激活TGF-β/Smad信号通路;这可能与SGMS2促进SM合成相关。干扰SGMS2表达则得到相反结果。结论转移性乳腺癌中SGMS2表达增加。SGMS2可以促进TGF-β1的转录及分泌,从而激活TGF-β/Smad信号通路并促进乳腺癌细胞EMT,从而增加了乳腺癌细胞的迁移和侵袭性。本课题证明SGMS2可能成为乳腺癌转移治疗的新靶点。

宋剑婵^[5]（2020）在《HIF-1α、E-cadherin和N-cadherin在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义》文中研究表明目的:研究发现上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）与卵巢上皮性肿瘤的发生、发展、侵袭和转移密切相关。EMT的分子特征之一是钙粘蛋白转换,即在EMT过程中,上皮细胞表型标志物E-钙粘蛋白（E-cadherin,E-cad）表达受到抑制,而间质细胞表型标志物N-钙粘蛋白（N-Cadherin,N-cad）表达上调。另外,缺氧诱导因子（hypoxia inducible factor,HIFs）是在缺氧环境下特异性表达的调控蛋白,能使肿瘤细胞耐受缺氧环境,并促使肿瘤细胞在缺氧环境中生长。HIF-1α在缺氧诱导的哺乳动物细胞中广泛表达,为全局性调控缺氧应答的因子。本研究通过检测不同卵巢上皮性肿瘤中HIF-1α、E-cadherin和N-cadherin三种蛋白的表达水平,探讨钙粘素（E-cadherin、N-cadherin）和缺氧诱导因子（HIF-1α）两类蛋白在卵巢上皮性肿瘤发生发展中的作用,并分析三种标志蛋白之间的相关性。方法:选取2011年1月至12月间,天津市中心妇产科医院收治的161例原发卵巢上皮性肿瘤且术前未予任何放/化疗的病例为研究对象,其中包括:其中良性肿瘤51例（浆液性肿瘤17例,粘液性肿瘤17例,宫内膜样肿瘤17例）,交界性肿瘤48例（浆液性肿瘤25例,粘液性肿瘤14例,浆粘液性肿瘤6例,宫内膜样肿瘤2例,透明细胞肿瘤1例;FIGO分期Ⅰ期44例,Ⅱ期3例,Ⅲ期1例,Ⅳ期0例）,恶性肿瘤62例,浆液性癌41例（低级别浆液性癌11例,高级别浆液性癌30例）,粘液性癌4例,宫内膜样癌5例,透明细胞癌12例,Kurman分型Ⅰ型癌29例（低级别浆液性癌11例,粘液性癌4例,低级别宫内膜样癌2例,透明细胞癌12例）,Ⅱ型癌33例（高级别浆液性癌30例,中、高级别宫内膜样癌3例）;FIGO分期Ⅰ期20例,Ⅱ期12例,Ⅲ期28例,Ⅳ期2例。通过免疫组织化学SP法检测HIF-1α、E-cadherin及N-cadherin三种抗体在不同组分标本中的表达水平。统计分析采用SAS 9.4软件进行处理,P<0.05时认为差异有统计学意义。定性资料采用“例数（百分比）”表示,根据资料类型和数据特点,采用χ2检验、Fisher精确检验、Wilcoxon秩和检验、Kruskal-Wallis检验或Spearman秩相关分析。结果:1.HIF-1α在卵巢良性、交界性、恶性肿瘤中的表达呈上升趋势,差异具有统计学意义（P<0.0001）;HIF-1α在组织学分级高分化组的表达明显高于低分化组,差异具有统计学意义（P=0.0041）;HIF-1α的表达与卵巢癌不同分期之间表达不同,差异具有统计学意义（P=0.0003）。2.E-cadherin的低表达在良性、交界性、恶性肿瘤中呈上升趋势,差异具有统计学意义（P<0.001）;E-cadherin在不同组织学分级中,由于评分3分的正常表达列合计为0,无法计算统计量和P值,因此无统计学意义;E-cadherin在不同FIGO分期中表达差异无统计学意义（P=1.0000）。3.N-cadherin过表达在良性、交界性、恶性肿瘤中呈上升趋势,差异具有统计学意义（P<0.001）;N-cadherin在不同组织学分级中的表达差异无统计学意义（P=0.5934）;N-cadherin表达与FIGO分期呈正相关,分期越高,其阳性程度越高,差异具有统计学意义（P=0.0201）。4.随着HIF-1α的阳性表达增加,E-cadherin的低表达增加,差异具有统计学意义（P=0.0016）;N-cadherin过表达也呈上升趋势,差异具有统计学意义（P=0.0115）。结论:1.肿瘤分型与HIF-1α、N-cadherin的表达呈正相关,与E-cadherin表达呈负相关,说明随着肿瘤恶性程度的增加,HIF-1α的表达、N-cadherin过表达和E-cadherin低表达均逐渐增加,提示HIF-1α可能通过对肿瘤缺氧微环境的调控,促进卵巢上皮性肿瘤的发展,并且肿瘤细胞逐渐失去上皮特性而获得间质特性。2.HIF-1α在卵巢癌组织学分级高分化组中的表达明显高于低分化组,说明HIF-1α可能与恶性肿瘤细胞的分化有关,缺氧可能通过特定的分子机制促进癌细胞的分化。3.卵巢癌FIGO分期与HIF-1α和N-cadherin的表达呈正相关,说明HIF-1α和N-cadherin的表达可能与肿瘤细胞的侵袭性和转移性有关,促进了卵巢癌的浸润和转移。4.HIF-1α与E-cadherin表达呈负相关,与N-cadherin表达呈正相关,提示了缺氧微环境可能促进了肿瘤细胞的EMT过程,三种标志物在促进卵巢上皮性肿瘤的进展中起着协同作用。

崔海滨^[6]（2020）在《长链非编码RNA CTBP1-AS对乳腺癌生物学特征的影响及其分子机制的研究》文中研究指明目的:本文旨在研究LncRNA CTBP1-AS在乳腺癌组织中的表达,分析其与患者临床病理学特征间的关系。敲低或过表达LncRNA CTBP1-AS后,观察LncRNA CTBP1-AS对乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响,并进一步探讨其作用机制。方法:1.应用实时荧光定量PCR方法检测乳腺癌组织及对应癌旁正常组织中LncRNA CTBP1-AS的表达水平,同时分析LncRNA CTBP1-AS的表达水平与乳腺癌患者临床病理参数的相关性。2.采用实时荧光定量PCR方法检测人乳腺癌细胞系MCF-10A、MCF-7、BT-549、MDA-MB-231、MDA-MB-435中LncRNA CTBP1-AS的相对表达量。3.应用CCK8实验、克隆形成实验、流式细胞术、Transwell迁移和侵袭实验及细胞划痕实验检测敲低或过表达LncRNA CTBP1-AS对乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。4.应用Western blot实验检测敲低或过表达LncRNA CTBP1-AS后对细胞凋亡及EMT相关蛋白表达水平的影响。5.利用生物信息学分析、RNA免疫共沉淀实验、荧光素酶报告基因实验及荧光定量PCR预测并验证LncRNA CTBP1-AS与mi R-940的相互作用关系,并利用CCK8实验及克隆形成实验观察二者与细胞增殖间的关系。6.利用裸鼠移植瘤实验观察LncRNA CTBP1-AS对裸鼠移植瘤形成的影响。结果:1.LncRNA CTBP1-AS在155例乳腺癌肿瘤组织中的表达显着高于癌旁组织（P<0.05）,此外LncRNA CTBP1-AS的表达与患者的肿瘤大小（P<0.001）、组织学分级（P<0.001）、Ki-67（P=0.027）和Her-2（P<0.001）紧密关联。2.实时荧光定量PCR结果表明,LncRNA CTBP1-AS在乳腺癌细胞株中的表达水平均显着高于在MCF-10A细胞株中的表达水平（P<0.05）。3.体外CCK-8及克隆形成实验结果显示,LncRNA CTBP1-AS促进肿瘤细胞的增殖能力（P<0.05）;流式细胞凋亡实验及Western blot实验显示LncRNA CTBP1-AS可抑制肿瘤细胞的凋亡能力（P<0.05）;细胞划痕实验及Transwell细胞迁移实验表明LncRNA CTBP1-AS对乳腺癌细胞迁移能力具有促进作用（P<0.05）;Transwell细胞侵袭实验及Western blot实验结果表明,LncRNA CTBP1-AS能够促进乳腺癌细胞的侵袭能力（P<0.05）。4.生物信息学分析及进一步的实验验证结果表明,LncRNA CTBP1-AS与mi R-940之间存在相互作用,并且LncRNA CTBP1-AS可通过靶向作用于mi R-940影响乳腺癌细胞的增殖能力。5.裸鼠移植瘤实验结果表明,与对照组相比,LncRNA CTBP1-AS下调组中裸鼠皮下移植瘤的体积和重量明显降低（P<0.05）。结论:1.LncRNA CTBP1-AS在乳腺癌组织及细胞中表达明显增高。2.LncRNA CTBP1-AS能够促进乳腺癌细胞的增殖、侵袭及迁移,抑制细胞凋亡。3.LncRNA CTBP1-AS通过靶向调节mi R-940影响乳腺癌细胞的增殖能力。4.在裸鼠体内下调LncRNA CTBP1-AS能够抑制裸鼠移植瘤的生长。

田萍^[7]（2020）在《CBX7通过ITGβ3/TGFβ1/AKT信号通路在宫颈癌进展中的作用机制研究》文中认为目的:探讨色素框同源物7（CBX7）在宫颈癌中的作用,对化疗药物敏感性的影响,论证CBX7通过整合素β3（ITGβ3）/转化生长因子β1（TGFβ1）/蛋白激酶B（AKT）信号通路干扰宫颈癌上皮间质转化（EMT）的发生、宫颈癌的进展和化疗药物治疗的敏感性。方法:免疫组织化学法（IHC）检测人宫颈癌组织中CBX7及肿瘤相关基因ITGβ3、TGFβ1、磷酸化磷酯酰肌醇-3激酶（PI3K）、AKT、上皮细胞钙粘蛋白（E-cad）和波形蛋白（VIM）,回顾性收集患者临床病理信息。分析CBX7和肿瘤相关基因在癌组织与癌旁非瘤组织中表达的差异;分析CBX7与临床病理参数、肿瘤相关基因的关系;采用生存分析,评价CBX7表达对宫颈癌患者生存的影响。利用Lentivirus载体系统转染He La、Si Ha细胞,构建CBX7过表达和下调的稳定转染细胞系。将稳定转染Si Ha细胞暴露于顺铂,应用敲低CBX7 Si Ha（si CBX7 Si Ha）细胞建立移植瘤模型。采用MTT、克隆形成实验方法检测细胞生长情况;伤口愈合实验、Transwell侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭情况;流式细胞仪技术检测细胞凋亡情况;检测转染不同水平CBX7细胞的成瘤率、移植瘤体积及重量;IHC、实时定量聚合酶链反应（q RT-PCR）检测移植瘤模型中CBX7及肿瘤相关基因的表达水平。利用RNAi的方法下调稳定转染细胞株中TGFβ1表达,抑制ITGβ3/TGFβ1轴;将稳定转染Si Ha细胞暴露顺铂,检测上述细胞生长、侵袭能力和凋亡情况;检测转染与未转染sh RNA TGFβ1细胞中,暴露与未暴露顺铂中CBX7及肿瘤相关基因的m RNA和蛋白的表达变化。结果:（1）CBX7的表达水平与临床分期、淋巴结转移,脉管浸润显着负相关,并随着组织分化的消除而表达下降;（2）CBX7与宫颈癌生存率呈正相关;（3）IHC检测CBX7在宫颈癌组织中阳性表达率低于癌旁非瘤组织并与ITGβ3、TGFβ1、PI3K、AKT、p-AKT和VIM负相关,与E-cad正相关;（4）稳定转染细胞的生物学行为检测,敲低CBX7促进了宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,凋亡能力明显减弱;上调CBX7提高了顺铂对Si Ha细胞的增殖抑制和凋亡作用;敲低CBX7提高了裸鼠成瘤率,增加了移植瘤模型的体积和体重;（5）IHC分析移植瘤组织结果显示,CBX7、E-cad在si CBX7组阳性表达率低于对照组;VIM高于对照组;ITGβ3、TGFβ1在si CBX7组阳性表达水平高于对照组;（6）移植瘤中ITGβ3、TGFβ1、PI3K和AKT m RNA高于对照组;（7）沉默TGFβ1的细胞生物学行为检测,沉默TGFβ1消弱了si CBX7对细胞增殖的促进作用和对凋亡的抑制作用;（8）敲低CBX7升高了ITGβ3、TGFβ1、PI3K、AKT、VIM m RNA和蛋白等表达,降低了E-cad表达;采用sh RNA TGFβ1转染逆转了si CBX7对ITGβ3、TGFβ1、PI3K、AKT、VIM m RNA和蛋白的升高,抑制了对E-cad的降低;（9）Si Ha细胞暴露于顺铂,过表达CBX7调低了ITGβ3/TGFβ1信号通路及VIM的m RNA和蛋白表达,升高了E-cad的表达。结论:CBX7在人宫颈癌组织中表达降低,CBX7是宫颈癌预后的预测因子之一;CBX7的低表达可促进宫颈癌细胞生长、迁移和侵袭,抑制凋亡,CBX7过表达提高了宫颈癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性;si CBX7调控ITGβ3/TGFβ1轴调节宫颈癌EMT的发生,沉默TGFβ1,可以部分逆转宫颈癌细胞EMT表征;CBX7通过ITGβ3/TGFβ1轴调节PI3K/AKT信号通路影响EMT的发生和化疗药物敏感性;证明CBX7在宫颈癌中是抑癌基因,可能是治疗宫颈癌的一个潜在因子,通过CBX7抑制ITGβ3/TGFβ1信号通路可能成为提高宫颈癌疗效的一种新的治疗途径。

吕庆^[8]（2019）在《转录因子E2F5对三阴性乳腺癌的影响和相关机制研究》文中进行了进一步梳理背景及目的乳腺癌是全世界范围内女性发病率最高的恶性肿瘤之一,而其中三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer,TNBC）恶性程度最高,预后最差。本研究即通过对E2F家族成员在乳腺癌中表达水平的检测,筛选出了乳腺癌潜在相关基因E2F5,并通过临床病理特征及预后分析研究其与乳腺癌的相关性,进而通过体内、体外的一系列实验,揭示E2F5的在TNBC中的生物学功能,并进一步探讨E2F5发挥作用的可能的分子机制。方法本课题采用实时定量逆转录-聚合酶链反应（quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,q RT–PCR）方法检测了E2F家族基因在10对乳腺癌组织与癌旁组织中的表达,并进一步通过TCGA（the Cancer Genome Atlas）和GEO（Genome Expression Omnibus）数据库中的公共数据进行验证。采用免疫组织化学（immunohistological chemistry,IHC）方法检测E2F5在258例乳腺癌组织及60例癌旁组织中的表达,分析组织水平上E2F5蛋白表达与258例乳腺癌患者临床病理特征及预后之间的关系。在细胞水平的实验中,通过慢病毒稳定转染与si RNA瞬时转染技术构建E2F5过表达细胞株MDA-MB-231、MDA-MB-468和敲降细胞株SUM159、BT549,并通过平板克隆形成实验、CCK-8实验、裸鼠体内成瘤实验、Transwell迁移与侵袭实验、成球培养实验等研究E2F5对TNBC细胞增殖、迁移、侵袭以及肿瘤干细胞特性的影响,并通过CCK-8法检测E2F5基因敲降对三阴性乳腺癌细胞化疗药物敏感性的影响。采用q RT-PCR检测细胞干性、化疗耐药和上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的相关标志物。进一步在E2F5过表达细胞系中通过si RNA瞬时转染敲降ZEB2的表达,Western blot法检测si RNA对ZEB2的敲降效率,采用低吸附板成球培养法检测ZEB2基因沉默对E2F5过表达三阴性乳腺癌细胞干细胞特性的影响。结果RT-PCR结果显示E2F基因家族m RNA在乳腺癌组织中表达上调,其中E2F1、E2F3和E2F5上调最为显着,结合TCGA、GEO公共数据的表达分析结果筛选出了差异表达最显着的基因E2F5。免疫组化结果显示在乳腺癌组织中E2F5阳性表达率为36.0%,而癌旁组织中E2F5不表达（P<0.001）。在E2F5阳性与阴性两组患者中统计临床病理特征,结果显示,E2F5表达与患者年龄、绝经期状态、TNM分期、淋巴结转移以及分子分型有关,在年龄≤45岁组、未绝经组、有淋巴结转移组、III期组的表达阳性率较年龄>45岁组、绝经组、无淋巴结转移组、I-II期组更高,表达率有统计学差异（P<0.001）;在TNBC组阳性率为61.5%,显着高于Luminal B组、Luminal A组及Her-2组（p<0.001）。Kaplan-Miere生存分析表明,E2F5阴性组患者的无病生存和总生存均优于阳性组（P<0.001）,亚组分析显示在三阴性乳腺癌中尤为明显。而Cox回归分析结果则说明E2F5蛋白表达是乳腺癌独立风险因素（OR=1.587,95%CI=1.355-2.386,P=0.027）。体外实验中,CCK-8、克隆形成及体内成瘤实验结果表明过表达E2F5显着促进TNBC细胞的增殖,Transwell实验表明E2F5显着促进三阴性乳腺癌细胞的体外迁移和侵袭能力。成球培养实验中敲降E2F5能够降低三阴性乳腺癌干细胞特性,且q PCR检测发现CD44、SOX2和SOX9等干性相关标志物显着下调。同时,敲降E2F5能够增加TNBC细胞对阿霉素、紫杉醇和吉西他滨等化疗药物的敏感性,并可导致多药耐药基因MDR1和BCRP表达水平降低。RT-PCR检测发现E2F5与EMT的发生显着相关,并影响包括ZEB2在内的多种EMT相关转录因子的表达水平。进一步敲降ZEB2表达后,成球培养实验表明敲降ZEB2可逆转E2F5对三阴性乳腺癌细胞的干性增强作用。结论本研究表明E2F5在乳腺癌的发生、转移以及复发中起着重要作用。E2F5在体内和体外水平都能促进三阴性乳腺癌细胞的干细胞特性,表现为增强三阴性乳腺癌的增殖、迁移、侵袭、成瘤能力及化疗抵抗性。E2F5通过促进EMT相关转录因子ZEB2表达,促进三阴性乳腺癌细胞上皮间质转化,提高三阴性乳腺癌细胞干细胞特性。

王涛^[9]（2019）在《miR-935在体外通过调节IL-27对非小细胞肺癌H1299细胞增殖、侵袭和迁移的影响》文中研究指明研究背景和目的:IL-27是一种异质二聚体细胞因子,它由IL-27p28链和EBI3组成,是IL-6/IL-12细胞因子超家族成员,主要由单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞以及小胶质细胞等分泌。IL-27R是由gp130和IL-27Rα组成的异源二聚体。IL-27与gp130/IL-27Rα复合物结合后通过激活JAK/STAT信号通路进行信号传导,主要涉及STAT1和STAT3磷酸化。IL-27已被报道为肿瘤抑制因子,在多种癌症中发挥显着作用,如抑制肿瘤生长、侵袭、转移、促进细胞死亡等。Micro RNAs（mi RNAs）是一种长度约为20-25个核苷酸的非编码小RNA,在各种生物过程中发挥着关键作用,且在不同来源的癌症中具有双重作用。因此,本研究首先探讨IL-27在体外对非小细胞肺癌H1299细胞的增殖、侵袭以及迁移能力的影响,随后再探讨mi R-935与IL-27的关系,以期探索mi R-935通过调节IL-27进而对H1299细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。研究方法:收集非小细胞肺癌患者的肿瘤组织和邻近正常肺组织标本,采用实时定量PCR技术分别检测组织中IL-27 m RNA表达水平。通过CCK8实验检测IL-27对H1299细胞增殖能力的影响;此外还通过集落形成试验来评估IL-27对H1299细胞增殖能力的影响。采用Transwell侵袭试验评价IL-27表达水对H1299细胞侵袭能力的影响。采用划痕试验来模拟体内细胞迁移的过程,进而阐明IL-27对H1299细胞迁移能力的影响。我们通过检测mi R-935在非小细胞肺癌组织中的表达进而明确mi R-935与IL-27水平的关系。将H1299细胞转染mi R-935或经IL-27处理进行细胞存活试验,分别采用CCK8实验、划痕试验、Transwell侵袭试验以评价Mi R-935通过IL-27对H1299细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。研究结果:在76对非小细胞肺癌组织样本中IL-27 m RNA总体平均表达水平显着低于癌旁正常组织的平均表达水平（p<0.01）。6株非小细胞肺癌细胞系（HCC827,SPAC1,H1299,H1650,A549,H520）IL-27 m RNA和IL-27表达水平均显着低于正常肺上皮细胞系（BEAS-2B）。IL-27在体外对H1299细胞增殖、侵袭、迁移能力影响研究结果提示:IL-27组（经10ng/m L IL-27处理）H1299细胞在1d、3d、5d的吸光度较对照组明显降低（P<0.01）,提示IL-27可以显着抑制H1299细胞的增值能力;IL-27组的集落形成率明显低于对照组（P<0.01）;在H1299细胞中对照组相对侵袭率为100%,IL-27组相对侵袭率为38.8%,IL-27组侵袭率显着低于对照组（P<0.01）;划痕实验提示:在H1299细胞中IL-27组创面宽度显着大于对照组。mi R-935在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于相邻正常组织,同时非小细胞肺癌中mi R-935与IL-27水平呈负相关。我们通过Pic Tar和Target Scan软件预测得出mi R-935与靶基因IL-27的3’-UTR结合位点,mi R-935过表达显着降低了H1299细胞野生型IL-27 3’-UTR荧光素酶活性,但对突变型IL-27 3’UTR的荧光素酶活性则无明显影响。我们将H1299细胞转染mi R-935或经IL-27处理进行细胞增殖、侵袭以及迁移实验结果提示:mi R-935过表达能促进H1299细胞的增值,而在此基础上加入IL-27后则可以抑制H1299细胞的增殖;采用划痕试验来模拟体内细胞迁移的过程,结果表明,mi R-935逆转了IL-27在H1299细胞中诱导的迁移抑制;采用Transwell侵袭试验来评价mi R-935对H1299细胞侵袭能力的影响,结果表明,mi R-935逆转了IL-27在H1299细胞中诱导的侵袭抑制。研究结论:IL-27在体外能显着抑制H1299细胞的生长、侵袭以及迁移能力,mi R-935在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于相邻正常组织,同时与IL-27表达水平呈负相关,提示mi R-935在非小细胞肺癌中能负调控IL-27的表达。mi R-935通过负调节IL-27从而促进H1299细胞增殖、侵袭和迁移。本研究中的数据阐明了mi R-935作为一种肿瘤相关mi RNAs在非小细胞肺癌中能调节IL-27的表达。从而表明,抑制mi R-935的表达可能为非小细胞肺癌的治疗提供新的实验依据。

章锐^[10]（2019）在《乳腺癌差异表达基因的筛选及其功能机制的研究》文中研究指明目的:为了探索乳腺癌发生和发展的分子机制,本研究利用GEO数据库中的芯片数据,挖掘乳腺癌组织与正常乳腺组织中的差异表达基因,并研究其功能和机制,为乳腺癌的早期筛查、诊断及临床治疗提供理论依据。方法:从GEO数据库中,下载3组GPL570平台的乳腺癌基因芯片数据,利用R软件筛选正常乳腺组织与乳腺癌组织差异表达基因,差异表达限定为差异倍数大于1倍且P值<0.05。对挑选出来的差异表达基因进行GO富集分析、Pathway分析、KEGG通路分析、STRING蛋白互作分析、在Kaplan-Meier Plotter（http://kmplot.com/analysis/）在线分析,挑选对乳腺癌生存预后起到明显作用的基因,通过UALCAN（http://ualcan.path.uab.edu/）在线分析目的基因在TCGA数据库中的乳腺癌和正常组织中的表达情况。q RT-PCR检测目的基因在组织标本中的表达水平,进一步通过质粒转染构建过表达目的基因的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7,进行细胞增殖实验、凋亡实验、迁移侵袭实验等功能实验,研究其相关机制,并建立动物模型体内实验。结果:第一部分,利用3组乳腺癌GEO表达谱芯片数据,分别对乳腺癌癌组织与正常组织分析差异表达的基因,共有1334个交集的差异基因,其中358个为表达上调的基因,976个为表达下调的基因。GO功能富集分析提示差异表达基因显着富集在54个条目中,其中前10个条目为GO:1901681-硫化合物结合（sulfur compound binding）,GO:0048037-辅因子结合（cofactor binding）,GO:0016614-还原氧化酶活性,GO:0050662-辅酶结合（coenzyme binding）,GO:0016616-氧化还原酶活性（oxidoreductase activity）,GO:0003779-肌动蛋白结合（actin binding）,GO:0005539-糖胺聚糖结合（glycosaminoglycan binding）,GO:0033218-酰胺结合（amide binding）,GO:0008201-肝素结合（heparin binding）,GO:0051287-NAD结合（NAD binding）。KEGG通路分析差异表达基因主要在富集7条信号通路—糖酵解/糖异生、柠檬酸循环（TCA循环）、抗坏血酸和新陈代谢、果糖和甘露糖代谢、磷酸戊糖途径、半乳糖代谢、戊糖和葡萄糖醛酸的相互转化。将所有差异性基因输入STRING数据库,所有基因的蛋白互作网络分析中,节点最多的前10的基因为FN1、IL6、MYC、CDH1、CDK1、JUN、CCNB1、FGF2、CCNA2、EZH2。进行文献检索以及通过K-M生存分析,筛选对乳腺癌生存预后产生明显影响的表达下调的基因,找到基因OGN和ITM2A,并且暂无乳腺癌相关研究,具有较好的研究前景。通过TCGA数据库进一步证实OGN和ITM2A在Luminal、Her-2阳性、三阴性乳腺癌中表达量均低于正常组织。第二部分,q RT-PCR检测ITM2A和OGN的表达水平在乳腺癌癌组织中明显低于癌旁组织。分别通过过表达OGN和ITM2A的质粒转染乳腺癌细胞系,MCF-7和MDA-MB-231细胞转染OE-OGN质粒后,细胞的克隆形成受到抑制,MDA-MB-231细胞系迁移侵袭能力减弱,Western Blot实验检测上皮细胞-间质样转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白和内源性凋亡途径相关蛋白,上皮性标志蛋白E-cadherin（E钙黏蛋白）的升高,间质性标志蛋白Vimentin（波形蛋白）、N-cadherin（N钙黏蛋白）的下调。调控EMT最重要的转录因子Snail1和ZEB1的下调。在过表达OGN后,磷酸化蛋白p-Akt下调,磷酸化蛋白p-m TOR下调,在利用PI3K/Akt通路激活剂740Y-P进行补救实验后,p-Akt、p-m TOR、N-cadherin、Snail1较单纯过表达OGN组上调。MCF-7和MDA-MB-231细胞转染OE-ITM2A的质粒,细胞的（CCK8）增殖和克隆形成受到抑制,凋亡增加,MDA-MB-231细胞系迁移侵袭能力减弱,行Western Blot实验检测内源性（线粒体）凋亡途径相关蛋白,发现抑制内源性凋亡的蛋白BCL-2、MCL-1下调,促进内源性（线粒体）凋亡的蛋白Cytochrome C,Caspase 3,Cleaved caspase 3,PARP1上调。第三部分,通过裸鼠动物模型的建立,证实了转染过表达OGN的质粒或转染过表达ITM2A的质粒后的MCF7,裸鼠体内成瘤明显缩小。石蜡包埋裸鼠的肿瘤组织,切片,对肿瘤组织进行组化染色发现,OGN和ITM2A过表达的裸鼠皮下瘤体组织中,OGN和ITM2A的表达量较对照组增高。结论:基因OGN和ITM2A在乳腺癌中呈低表达,基因OGN可通过PI3K/Akt/m-TOR通路抑制乳腺癌EMT,从而抑制乳腺癌细胞的迁移侵袭及裸鼠体内成瘤。基因ITM2A可通过促进内源性凋亡的发生从而促进乳腺癌细胞的凋亡和抑制乳腺癌细胞的增殖及裸鼠体内成瘤。

二、钙粘蛋白与乳腺癌（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、钙粘蛋白与乳腺癌（论文提纲范文）

（1）miR-876调控POSTN促进肝癌进展和纤维化的机制研究（论文提纲范文）

（2）Fascin通过部分依赖EMT促进垂体腺瘤的侵袭（论文提纲范文）

（3）人肝细胞癌中TRIM59与E，N-钙粘蛋白表达在肿瘤侵袭及转移中的相关性研究（论文提纲范文）

（4）神经鞘磷脂合成酶2（SGMS2）通过TGF-β/Smad信号通路促进乳腺癌转移的机制研究（论文提纲范文）

（5）HIF-1α、E-cadherin和N-cadherin在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义（论文提纲范文）

（6）长链非编码RNA CTBP1-AS对乳腺癌生物学特征的影响及其分子机制的研究（论文提纲范文）

（7）CBX7通过ITGβ3/TGFβ1/AKT信号通路在宫颈癌进展中的作用机制研究（论文提纲范文）

（8）转录因子E2F5对三阴性乳腺癌的影响和相关机制研究（论文提纲范文）

（9）miR-935在体外通过调节IL-27对非小细胞肺癌H1299细胞增殖、侵袭和迁移的影响（论文提纲范文）

（10）乳腺癌差异表达基因的筛选及其功能机制的研究（论文提纲范文）

四、钙粘蛋白与乳腺癌（论文参考文献）

• [1]miR-876调控POSTN促进肝癌进展和纤维化的机制研究[D]. 陈凯. 中国人民解放军陆军军医大学, 2021(01)
• [2]Fascin通过部分依赖EMT促进垂体腺瘤的侵袭[D]. 游洪. 石河子大学, 2021(02)
• [3]人肝细胞癌中TRIM59与E，N-钙粘蛋白表达在肿瘤侵袭及转移中的相关性研究[D]. 刘子源. 大连医科大学, 2021(01)
• [4]神经鞘磷脂合成酶2（SGMS2）通过TGF-β/Smad信号通路促进乳腺癌转移的机制研究[D]. 冯海湛. 南方医科大学, 2020(01)
• [5]HIF-1α、E-cadherin和N-cadherin在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义[D]. 宋剑婵. 天津医科大学, 2020(06)
• [6]长链非编码RNA CTBP1-AS对乳腺癌生物学特征的影响及其分子机制的研究[D]. 崔海滨. 河北医科大学, 2020(01)
• [7]CBX7通过ITGβ3/TGFβ1/AKT信号通路在宫颈癌进展中的作用机制研究[D]. 田萍. 新疆医科大学, 2020
• [8]转录因子E2F5对三阴性乳腺癌的影响和相关机制研究[D]. 吕庆. 苏州大学, 2019(06)
• [9]miR-935在体外通过调节IL-27对非小细胞肺癌H1299细胞增殖、侵袭和迁移的影响[D]. 王涛. 武汉大学, 2019(02)
• [10]乳腺癌差异表达基因的筛选及其功能机制的研究[D]. 章锐. 华中科技大学, 2019(03)