一、原花青素的研究进展（论文文献综述）
刘玟君,李金洲,陈子隽,黄周艳,陈勇[1]（2021）在《原花青素的研究进展》文中提出原花青素已广泛应用于药品、保健品、化妆品等各领域,主要总结归纳了原花青素的提取工艺、分离纯化技术、含量测定方法以及药理活性等方面的研究进展,为原花青素的相关研究奠定基础。
张欣[2]（2021）在《黑果腺肋花楸原花青素的提取，抗氧化及其抑菌活性研究》文中研究说明黑果腺肋花楸果实是一种新兴小浆果,其含有大量多酚类物质,是天然的功能性食品原材料。然而,黑果腺肋花楸鲜果贮藏时间短、运输性能差、口感酸涩,使其极少的被应用,因此为了扩大黑果腺肋花楸的应用范围,对其的具体成分的研究就变得尤为重要。而已知黑果腺肋花楸中原花青素的含量是所有果蔬中最多的,且原花青素本身具有多种药理活性,例如:抗癌、抑菌、降低心血管等。因此本论文应用超声辅助低共熔溶剂来提取黑果腺肋花楸中的原花青素,并研究其抗氧化和抑菌活性。具体研究内容如下:1.低共熔溶剂提取黑果腺肋花楸原花青素制备氯化胆碱与丙二酸不同比例的低共熔溶剂,利用其来进行提取黑果腺肋花楸原花青素的工艺优化,得出的最佳工艺为:溶剂比例为氯化胆碱:丙二酸=1:1.2、溶剂的含水量为10%、料液比为1:15 g/m L、提取时间为40 min、提取温度为50℃、超声功率为200 w,提取原花青素的最高含量为63 mg/g。正交试验的结果显示最佳提取工艺与单因素实验基本一致。再利用70%酸性乙醇溶液进行对比验证,提取含量为23 mg/g,是低共熔溶剂提取含量的1/2,表明低共熔溶剂是一种很好的提取溶剂。最后利用DM130大孔树脂对粗提物进行纯化,所得纯化物中原花青素的含量为82.4%。2.黑果腺肋花楸原花青素的抗氧化活性实验考察了原花青素对DPPH、OH-、O2-、ABTS这四种自由基的清除能力和气总还原能力,以维生素C作对照试验。结果表明:浓度在0.1～4 mg/m L范围内原花青素对DPPH自由基的清除能力大于VC,对OH-自由基和ABTS自由基的清除能力与VC基本一致,对O2-自由基的清除能力小于VC,其总还原能力大于VC。3.黑果腺肋花楸原花青素的抑菌活性采用牛津杯法和微量肉汤稀释法对原花青素的抑菌性能进行定性和定量测定,并绘制了30%乙醇和原花青素对供试菌种在72 h内的生长抑制曲线。结果表明:原花青素对金黄色葡萄球菌的抑制作用强于大肠杆菌,而对青霉菌和黑曲霉菌没有抑制效果。金黄色葡萄球菌的MIC小于大肠杆菌。生长曲线表示MIC浓度下原花青素几乎完全抑制了金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的生长。4.黑果腺肋花楸提取物在鲜切水果保鲜上的应用对纯化后的原花青素进行鲜切苹果保鲜实验的应用,结果表明,原花青素组鲜切苹果的失重率强于30%乙醇处理组和对照组。原花青素组的硬度和糖度与其他两组基本一致。从色差值可看出原花青素组的L*值低于其他两组,而C*高于其他两组。原花青素组的MDA含量显着低于其他两组。浓度为MIC的原花青素组中所含的细菌总数远小于其他两组。本论文利用低共熔溶剂借以超声辅助提取黑果腺肋花楸中的原花青素对比与乙醇,提取含量扩大一倍,经过DM130大孔树脂对粗体物进行纯化;然后对纯化物进行抗氧化和抑菌活性的研究,表明其具有强抗氧化和抑菌能力;最后将其应用于鲜切苹果的保鲜应用,表明其具有一定的保鲜作用。
黄武[3]（2021）在《花生红衣中原花青素的提取纯化及其生物活性研究》文中研究表明为实现花生红衣的高值化利用,本研究以花生红衣原花青素（proanthocyanidins of peanut skins,PSPC）为研究对象,通过提取和分离纯化,得到纯度较高的原花青素,再进行成分分析,最后对其进行相关的功能性评价,所得结果如下:（1）以乙醇溶液为提取溶剂,经辅助超声处理,以单因素和正交实验对原花青素的提取工艺进行了优化,获得各因素对原花青素提取效果的影响主次依次为:超声时间>乙醇浓度>料液比>超声温度;最佳提取条件为:超声时间15 min、乙醇浓度60%、料液比（g/m L）1:45、超声温度35℃、水浴温度50℃、水浴时间50 min。在此条件下,原花青素平均最大提取率为9.07%,试验结果较单独使用超声提取或水浴浸提皆有所提高。（2）通过静态吸附和解吸试验对8种大孔树脂型号进行选择,选出最佳型号为D4020,使用该型号树脂进行动态试验,对上样流速、上样浓度、洗脱液浓度、洗脱流速几方面进行考察,得出最佳纯化方案为上样流速1m L/min,上样浓度1.5mg/m L,洗脱液为40%乙醇,洗脱流速1m L/min,最终所得纯化物纯度可达97.35±1.58%。经UPLC-Q-TOF/MS检测分析,纯化物出峰时间在4-7min内较为集中,其中有至少5种单倍体和10种原花青素低聚物。单倍体含儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、原儿茶酸及表儿茶素衍生物等,低聚体中A型低聚体4种,B型低聚体6种,已鉴定出的二聚体由表儿茶素单体通过A型连接键连接,或由表儿茶素没食子酸酯与儿茶素通过B型连接键连接,三聚体由表儿茶素单体经B型连接键连接,或由表儿茶素和儿茶素经B型连接键连接。（3）通过对PSPC生物活性研究,原花青素对DPPH自由基有很强的清除作用,对ABTS自由基有较强的清除作用,皆与原花青素质量浓度呈正相关关系,且原花青素对DPPH和ABTS自由基的清除能力明显较维生素C（Vitamin C,VC）强;原花青素对脂质氧化有较好的抑制作用,经PSPC和VC浸渍后的猪肉脂肪其酸价、POV和TBA值明显较空白组低。在酸价测定方面,0.1%的PSPC抑制效果最优,0.1%的VC溶液抑制效果强于0.05%、0.15%、0.2%的PSPC;在POV测定方面,0.2%的PSPC抑制效果最优,而0.1%的VC抑制效果与0.15%的PSPC抑制效果大体相似;在TBA值测定方面,0.2%的PSPC抑制效果最优,0.1%的VC抑制效果介于0.15%与0.2%的PSPC之间。PSPC对α-Glu和α-Amy都有抑制作用,阿卡波糖对α-Glu抑制效果优于原花青素,而对α-Amy的抑制效果原花青素较优。体外消化试验中,PSPC在胃环境条件下消化率较低,经过2.5 h胃环境反应消化率仅14.2%,而经2.5 h肠道环境反应后,消化率达到54.1%。证明PSPC在胃环境条件下消化效果不明显,在肠道环境条件下消化效果较好,即PSPC在体内的主要消化吸收器官为肠道。
尹明[4]（2021）在《原花青素缓解工业大麻镉胁迫机理分析》文中研究表明重金属镉污染是目前我国最严重的环境污染之一,因镉离子极易转移到人类食物链中而被重视。工业大麻（Cannabis Sativa L.）,大麻科大麻属,一年生草本经济作物,在纺织、造纸、药品、保健等方面具有重要作用,其生长周期短、耐性强、生物量大、且不易将重金属带入人类食物链,因此被应用于修复重金属污染土壤。本研究团队前期发现工业大麻在遭受镉胁迫后,其植株内部会产生大量原花青素,用于缓解植株的镉胁迫。本论文通过测定不同处理环境下的工业大麻的生理指标、抗氧化物质活性、差异基因的表达、差异代谢物的含量与原花青素关键基因过表达后拟南芥的抗逆性,来探究原花青素如何缓解工业大麻遭受的镉毒害。主要实验结果如下:1、对比不同处理下工业大麻的生长形态与抗氧化物质的活性,结果显示:工业大麻在镉处理后叶片出现明显的发黄与卷曲,根部变短变少。预处理外源原花青素后,植株所遭受的镉毒害得到了明显的缓解。预处理外源原花青素也可以显着缓解工业大麻叶片中SOD、GSH下降的幅度。结果表明,预处理外源原花青素可有效缓解工业大麻遭受的镉毒害。2、对比不同处理下工业大麻转录组差异基因的分布,结果显示:镉处理组对比对照组有4341个差异基因、原花青素处理组对比对照组有497个差异基因、原花青素预处理组对比镉处理组有1102个差异基因。对当前差异基因功能进行功能富集分析,结果表明:三个处理主要改变了工业大麻谷胱甘肽代谢、苯丙烷类生物与光合作用等代谢途径中的基因表达。3、对比不同处理下工业大麻代谢组差异代谢物的分布,结果显示:镉处理组对比对照有28个差异代谢物、原花青素处理组对比对照有8个差异代谢物、原花青素预处理组对比镉处理组有13个差异代谢物。对当前差异代谢物功能进行富集分析,结果表明:三个处理主要改变了工业大麻苯丙氨酸、维生素代谢与类胡萝卜素合成等代谢途径中的代谢物含量。4、将差异基因与差异代谢物进行联合分析,结果显示:外源原花青素与镉离子会同时作用于EDS1基因,使植株产生大量水杨酸。植株利用原花青素与水杨酸通过光合作用、次级代谢物合成、抗氧化物质合成等相关途径来缓解镉胁迫给植株带来的影响。5、构建工业大麻原花青素合成关键基因Cs ANR与Cs LAR的过表达拟南芥植株,并测定不同镉处理浓度的种子萌发率,并对比不同镉浓度水培下拟南芥的表型变化。结果显示:Cs LAR转基因植株耐镉能力强于Cs ANR转基因植株与野生型拟南芥植株。
张俊康[5]（2021）在《McWRKY71调控海棠花青素和原花青素的生物合成应答臭氧胁迫的分子机制》文中提出臭氧（O3）污染在全世界许多地区普遍发生,O3胁迫给植物造成了一系列氧化损伤,严重威胁到植物的生长发育。花青素和原花青素是广泛存在于植物中的一种次级代谢物,在植物体内起到抗氧化的作用,可以清除植物体内多余的活性氧,起到保护植物的作用。WRKY家族是植物所特有的一个转录因子家族,在植物生长与调控非生物胁迫应答中起到了重要作用,但是关于O3胁迫下的WRKY基因是如何参与调控花青素和原花青素合成来抵御O3胁迫的分子机制尚不明确。本研究以‘红久’海棠（Malus‘Hongjiu’crabapple）为试验材料,进行了转录组测序,发现了转录因子McWRKY71被O3所诱导,随后进行了功能验证,互作基因的筛选以及下游靶基因的鉴定,主要结果如下:1.O3胁迫下,海棠叶片有明显的红褐色伤斑,NBT染色发现ROS积累,且随着缓解时间的延长,其抗氧化酶活性先升高后降低,MDA含量一直升高。花青素和原花青素的含量均显着升高,在胁迫后第12h达到最高值,利用q RT-PCR检测花青素合成结构基因表达水平,发现在胁迫后第12h,McCHI,McANS,McF3H和McANR的表达量也显着上调并达到最高值,随后降低。2.O3处理过表达McWRKY71的苹果愈伤和转GFP载体的愈伤组织,在胁迫后第20天,转基因的苹果愈伤拥有更高的抗氧化酶活性,其MDA含量低于对照,NBT染色发现转基因的苹果愈伤中的ROS积累显着低于对照。过表达McWRKY71还会促进苹果愈伤中花青素和原花青素的积累,结构基因Md ANS、Md CHI、Md ANR和Md UFGT表达水平显着升高。3.酵母双杂交和Pull-down分析表明McWRKY71能够与McMYB12互作形成异源二聚体。4.通过酵母单杂交、EMSA实验验证了McWRKY71与McANR的启动子的W-BOX元件结合,进而促进苹果愈伤组织中原花青素的积累。本研究证明了McWRKY71作为花青素和原花青素的正向调节因子,参与调控花青素和原花青素的积累以提高苹果属植物对O3胁迫的抵抗能力,为WRKY转录因子在调控海棠花青素和原花青素积累应答O3胁迫方面提供了新的发现。
王闫宇[6]（2021）在《紫大薯粗提物对H2O2诱导IPEC-J2细胞氧化损伤的预保护与作用机制研究》文中认为我国是最大的猪肉消耗国,也是最大的猪肉生产国,生猪养殖是我国畜牧业的主要支柱之一。在生猪养殖过程中,断奶仔猪换饲是养殖过程中的重中之重,换饲过程中环境（如温度、湿度、环境微生物等）的改变极易诱发仔猪氧化应激,致病微生物产生脂多糖（LPS）、H2O2等氧化因子,尤其能够引起肠道细胞氧化损伤,影响仔猪存活率和生产效率。原花青素和花青素作为目前研究广泛的天然绿色植物提取物,具有高效的抗氧化作用,且无毒无害等特性逐渐成为畜禽生产中抗生素类药品的绿色替代物。本试验选用海南省紫色大薯为原材料,提取纯化获得粗提物,建立猪肠道上皮细胞（IPEC-J2）的过氧化氢（H2O2）损伤模型,研究粗提物对H2O2诱导的IPEC-J2细胞的氧化损伤的抗氧化酶活力、膜转运蛋白相关基因表达以及NF-κB通路磷酸化水平的影响,探究粗提物对IPEC-J2细胞氧化应激的预保护作用,为开发利用海南紫大薯提供理论基础。论文主要由三组试验构成:试验一利用酸性乙醇溶剂萃取法提取海南紫大薯块茎中的生物活性物质,经过AB-8大孔树脂纯化,冻干获得粗提物粉末。以抗坏血酸（VC）为对照,测定粗提物和VC对DPPH清除率和IPEC-J2细胞存活率的影响。结果显示,粗提物中含有原花青素B2（1852.98 ng/mg）、原花青素B4（475.24 ng/mg）、芸香苷（352.08 ng/mg）、矢车菊素-3-半乳糖苷（212.96 ng/mg）等多种生物活性物质,其中还包括五种常见花青素。与VC相同浓度下,粗提物对DPPH的清除率较小,粗提物出现药理毒性的浓度为80μg/m L。试验二利用过氧化氢（H2O2）为氧化剂,构建IPEC-J2细胞的损伤模型。试验利用二因子随机试验方法设计,H2O2浓度设为0、40、80、120、160、200μmol/L,损伤时间设为2、4、6、8、10 h,用CCK-8法测定各组细胞存活率。在此基础上,设计H2O2浓度为0、80、120、160μmol/L,损伤时间为4、6、8、10 h,测定抗氧化酶活性。结果显示:H2O2浓度120μmol/L,损伤时间为8 h时,细胞存活率降低至约70%,细胞产生明显氧化应激反应,可作为氧化损伤模型的适宜条件。试验三在试验一和试验二基础上,确定海南紫大薯粗提物作用总时长为16 h,其中损伤前预处理时间为8h,设定H2O2损伤模型为阴性对照组,VC（50μg/m L）为阳性对照组,粗提物浓度设为25、50、75μg/m L三个处理组。利用试剂盒测定细胞抗氧化酶活力,荧光定量PCR（q PCR）法测定细胞NF-κB、GSH-Px、SOD1、SOD2、SGLT1、GULT2基因表达量和Western Blot法测定细胞NF-κB磷酸化通路蛋白表达水平。结果显示,海南紫大薯粗提物对IPEC-J2细胞有良好的预保护效果,提高细胞总抗氧化能力（T-AOC）和过氧化氢酶（CAT）活力,提高过氧化物歧化酶（T-SOD）及其基因表达量,降低细胞丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力及其基因表达量,刺激提高葡萄糖转运蛋白SGLT1基因表达、降低GULT2基因表达,促进花青素进入细胞,粗提物浓度为50μg/m L时能够最有效抑制IκB和P65蛋白磷酸化,减少细胞氧化应激。综上所述,海南紫大薯粗提物对H2O2诱导损伤的IPEC-J2细胞有良好的预保护作用,能够有效提高细胞抗氧化酶活力,其作用机制可能是原花青素和花青素类物质通过葡萄糖转运白蛋白主动运输进入细胞内,通过改变IκB和P65蛋白磷酸化两种途径减少NF-κB信号通路磷酸化,降低细胞氧化损伤程度,因此紫大薯在实际饲养生产中可作为天然抗氧化剂添加使用,且本试验粗提物最佳使用浓度为50μg/m L。
俞超楠[7]（2021）在《原花青素减轻NaF所致小鼠MLO-Y4骨细胞损伤研究》文中认为目的 氟是人体必需的微量元素之一,适量的氟对人体骨骼、牙齿的生长和形成具有促进作用。然而当氟摄入平衡失调时,机体代谢和生理功能都会受到影响,尤其是高剂量氟会引发氟中毒,并导致氟斑牙和氟骨症。骨细胞是成熟骨组织中的主要细胞,由骨母细胞转化而来。研究表明,骨细胞通过影响破骨细胞和成骨细胞的分化和成熟来完成骨重塑的过程,是骨重构的核心调控者。目前与氟中毒有关的基础研究主要集中在成骨和破骨细胞,而关于氟化物对骨细胞功能影响的研究相对较少。与此同时,研究表明抗氧化剂可显着促进骨形成并抑制骨吸收过程,具有修复因过量氟化物所致骨组织细胞损伤的潜力。原花青素具有很强的抗氧化活性,且对许多急性和慢性疾病具有预防和控制作用。本论文以氟化钠（NaF）诱导损伤MLO-Y4骨细胞,模拟高剂量氟导致的氟中毒,建立氟中毒症体外细胞模型,并利用该模型探究原花青素对NaF诱导MLO-Y4骨细胞损伤的保护机制。方法 1.将不同浓度NaF（0.2、0.5、1.0、2.5和5 mM）作用于MLO-Y4骨细胞48 h后,利用相差显微镜观察NaF对骨细胞形态的影响;钙黄绿素乙酰甲酯（Calcein-AM）染色和细胞计数试剂（CCK-8）法检测NaF对MLO-Y4骨细胞活性的影响;经自噬检测试剂（CYTO-ID）和吖啶橙（AO）染色并采用流式细胞术检测骨细胞自噬和酸性自噬泡水平;采用碘化丙啶（PI）染色并经流式细胞术检测NaF对骨细胞的细胞周期和细胞增殖的影响;采用蛋白质印迹法（Western Blot）测定NaF对MLO-Y4骨细胞自噬相关Beclin-1,轻链3（LC3）,核孔糖蛋白（P62）,磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）蛋白信号通路和细胞增殖相关的增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白信号表达的影响。2.MLO-Y4骨细胞采用原花青素（1、3、10、30、100μM）预保护2h后,再与2.5 mM NaF共孵育48 h,随后采用如前所述方法检测原花青素对NaF所致骨细胞细胞活性、自噬和细胞增殖改变的影响。结果 1.形态学观测结果显示:1 mM以上的NaF能显着改变MLO-Y4骨细胞形态。CCK-8实验结果表明,1 mM以上的NaF呈剂量依赖性显着抑制MLO-Y4骨细胞的活性。流式细胞术结果表明NaF显着诱导MLO-Y4骨细胞自噬水平上调和细胞内酸性自噬泡数量增加,并显着抑制骨细胞增殖。Western Blot实验结果显示,与对照组相比,2.5 mM NaF诱导Beclin-1,LC3,p62,p-mTOR蛋白表达上调,mTOR蛋白表达下调;此外,2.5 mM NaF还导致PCNA蛋白表达下调。进一步提示NaF染毒可导致骨细胞自噬流受损和增殖抑制。2.给予不同浓度原花青素（1、3、10、30、100μM）干预后,形态学观测结果显示:与2.5 mM NaF模型组相比,3 μM、10 μM和30μM原花青素对MLO-Y4骨细胞的保护有一定效果,活细胞数有上升趋势;CCK-8实验结果表明,3 μM、10μM和30μM原花青素能显着提升NaF所致的MLO-Y4骨细胞细胞活性,其中10 μM原花青素的保护作用最为显着;流式细胞术结果表明原花青素能显着抑制NaF诱导的MLO-Y4骨细胞自噬流受阻,且对NaF所致的细胞增殖抑制有显着促进作用。Western Blot实验结果表明,与2.5mMNaF模型组相比,原花青素使Beclin-1,LC3,p62,p-mTOR蛋白表达下调,mTOR蛋白表达上升;此外,原花青素使PCNA蛋白表达上升。提示原花青素对NaF诱导的骨细胞自噬流受阻和增殖抑制有修复作用。结论 NaF可以诱导MLO-Y4骨细胞数量和细胞活性下降,造成细胞自噬流阻滞并抑制细胞增殖,对MLO-Y4骨细胞造成损伤。原花青素可减轻NaF所致的MLO-Y4骨细胞损伤,其机制可能与其减轻自噬流受损和缓解细胞增殖抑制相关。
张莉[8]（2021）在《原花青素接枝壳聚糖负载GO功能包装膜的研究》文中研究说明传统的食品包装材料主要是以纸、塑料和铝箔等柔性材料为基础材料经过复合加工而成的复合膜。随着我国森林覆盖面积的减少以及石油等不可再生资源的消耗,能源短缺带来的问题日益严重。纸质包装成型过程添加的添加剂及塑料复合过程中使用的粘合剂,易在食品包装过程中受热老化裂解释放有害物质到食品中影响人们的身体健康。在回收利用过程中,纸质覆膜材料难以分离再利用造成的资源浪费以及石油基塑料难以降解产生的“白色污染”,严重危害环境健康。此外,传统纸质和塑料包装的功能如抗氧化性能、抑菌性能等相对有限。因此,生产一种可以替代传统塑料的绿色环保的功能性包装材料十分重要。壳聚糖是自然界存在的唯一的碱性多糖,其来源广泛,具有良好的成膜性能、抑菌性能、抗氧化性能和生物相容性。因此采用绿色可降解的天然抗菌材料—壳聚糖制备包装材料符合可持续发展的战略要求,能够解决环境与资源危机,将很好的解决以上问题。本文以壳聚糖为原材料,采用TEMPO-漆酶氧化体系催化原花青素接枝壳聚糖,将氧化石墨烯负载到原花青素接枝壳聚糖膜,制成原花青素接枝壳聚糖负载氧化石墨烯功能性包装膜。原花青素的高抗氧化活性和特殊的pH响应性能、氧化石墨烯优良的阻隔性能能够极大地提高壳聚糖基抗菌保鲜膜的性能,拓宽了其应用领域,可以达到抗菌和延长食品保存期的目的。首先通过溶液浇铸法制备了壳聚糖原花青素共混膜（C-CS-PC膜）。研究了不同原花青素添加量对膜的力学性能、热稳定性能、抗氧化性能、抑菌性能、阻隔性能和pH响应性能等的影响。研究结果表明:壳聚糖与原花青素质量比为40:3时制备的C-CS-PC膜的综合性能最优。拉伸强度达到89.4 MPa,较CS-control膜提高了 29.9%。C-CS-PC-3膜的水蒸气透过量为728.68 g·m-2·d-1和氧气透过量为 1011 cm3·m-2·d-1·bar-1,较 CS-control 膜分别降低了 28.04%和 40.84%。C-CS-PC 膜对大肠杆菌和黑曲霉的抑菌效果较为明显,金黄色葡萄球菌次之,对根霉的抑菌效果最差。C-CS-PC膜的DPPH清除率达到82.35%,比CS-control膜的DPPH自由基清除率提高了 49.90%,ABTS+自由基清除率提高了 51.11%,抗氧化性能提高。FT-IR分析结果表明,壳聚糖和原花青素二者在复合成膜过程中没有产生新的基团,更多的是以分子间氢键交联。TG和DSC结果表明,C-CS-PC的热稳定性能提高。在不同的酸性或者碱性环境下,C-CS-PC膜的颜色发生明显改变,具有良好的pH响应性能。本文研究了 TEMPO-漆酶氧化体系催化壳聚糖C6位接枝原花青素的机理。对漆酶作用于原花青素的不同时间的中间产物进行了 HPLC-MS测试,确定最佳的加入时间为30-60 min。通过对接枝衍生物进行FT-IR和NMR测试,原花青素成功接枝到壳聚糖C6位,并且壳聚糖的抑菌结构单元（-NH3）得以保护。通过元素分析C/N,计算得出原花青素接枝壳聚糖衍生物（CS/PC-grafting）的取代度为35.67%。CS/PC-grafting对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别由8.2和6.7 mm提高至15.2和11.0 mm,抑菌活性提高约85.36%和64.18%。对黑曲霉的抑菌圈直径由7.6 mm提高至10.7 mm,抑菌活性提高约40.79%。抗氧化活性测试结果表明,CS/PC-grafting对DPPH和ABTS+自由基具有显着的清除作用。CS/PC-grafting的DPPH 清除率达到 88.63%,较 CS-control 提高了 190.02%;G-CS/PC 的 ABTS+自由基清除率达到86.33%,提高了 156.55%。本文采用喷涂法成功将氧化石墨烯负载到原花青素接枝壳聚糖膜,制备了具有三明治结构的原花青素接枝壳聚糖负载氧化石墨烯功能性复合膜（GO-G-CS/PC膜）。通过对GO-G-CS/PC膜复合膜的物理性能、阻隔性能、抗氧化性能、抑菌性能以及pH响应性能进行了表征和测试,结果表明:GO-G-CS/PC膜的透明度由壳聚糖纯膜的82.0%下降至28.8%,具有良好的阻光性能。GO-G-CS/PC膜较CS-control膜溶解度下降31.44%。GO-G-CS/PC膜的拉伸强度和断裂伸长率分别为82.65 MPa和5.34%,具有较强的力学强度和柔韧性。GO-G-CS/PC膜的水蒸气透过量由CS-control膜的1011.67g·m-2·d-1 下降至 432.18 g·m-2·d-1,下降了 57.28%。GO-G-CS/PC 膜的氧气透过量为 563.64 cm3.m-2.d-1.bar-1,较 CS-control 膜下降了 68.51%。SEM 扫描结果表示GO-G-CS/PC膜中氧化石墨烯层与G-CS/PC层紧密结合,结构最为致密。GO-G-CS/PC膜复合膜热稳定性提高,GO-G-CS/PC膜最大失重速率温度提高至282℃,600℃时膜的残余重量为36.65%。氧化石墨烯和原花青素的协同作用,使得GO-G-CS/PC膜的抗氧化性能最好,其DPPH和ABTS+自由基清除率分别达到了80.23%和85.65%。GO-G-CS/PC膜对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和黑曲霉的抑菌圈直径提高至15.3 mm、13.3 mm和15.5 mm,抑菌性能明显提高。GO-G-CS/PC膜具有肉眼看见的pH响应性能。本文以奶酪为包装对象,对一个储存周期（30天）内奶酪的感官评价、pH值、菌落总数、过氧化值和色度等指标进行了测试。结果表明:GO-G-CS/PC膜对奶酪的保鲜效果优于其他4种包装膜,感官评价最高。在储存第30天时,奶酪的过氧化值为1.65 meq/Kg,较PE膜包装的奶酪降低了 25.33%,低于CS-control膜24.65%,能够延缓奶酪的氧化变质。GO-G-C S/PC膜包装的奶酪的菌落总数较小,能够有效防止奶酪被微生物腐败。GO-G-CS/PC膜包装的奶酪一级反应动力学方程为P=1.22 e0.0095t（5℃）和P=1.757e0.0194t（25℃）,较PE膜分别延长奶酪保存103天和43天。GO-G-CS/PC膜具有高抗氧化、阻隔和抑菌性能,可以作为一种优良的乳制品包装材料。
李丹丹[9]（2020）在《锌指蛋白PuC3H35调控大青杨根部应答干旱胁迫的机制研究》文中研究说明树木在森林生态系统中具有重要的经济和生态价值。干旱是影响树木生长和发育较严重的逆境因子之一。了解树木如何响应干旱,分析树木抗旱分子机制,培育抗旱新品种对未来林业的发展具有重要意义。树木根系在干旱胁迫应答过程中起着十分重要的作用,根系对干旱胁迫的响应主要包括一系列根系形态特征以及生理、生化和分子水平的变化。已有研究表明锌指蛋白转录因子在植物生长、发育、形态建成以及逆境应答中起着不同的调控作用。目前对抗旱机理的研究多数集中在地上部分,对根系的研究较少。本研究以大青杨（Populus ussuriensis）根部为研究对象,开展了 CCCH型锌指蛋白基因PuC3H35调控根部应答干旱胁迫分子机制的研究。（1）克隆全长大青杨CCCH型锌指蛋白PuC3H35,PuC3H35基因的开放阅读框为2133 bp,编码710个氨基酸,其编码的蛋白具有2个串联CCCH motifs,并含有核定位序列（NLS）、核输出信号（NES）和2个ANK蛋白。进化树分析发现PuC3H35基因属于Ⅸ亚族的第2小亚类。亚细胞定位结果发现PuC3H35蛋白定位于细胞核中;转录自激活实验发现PuC3H35具有转录激活活性,并且其转录激活区位于390-449 aa和615-710 aa 处。（2）实时荧光定量PCR（qRT-PCR）结果表明,PuC3H35基因在大青杨根中表达量最高,在茎中最低,呈现显着的组织特异性,同时对PEG6000胁迫具有响应,在根中的诱导表达显着高于叶片。对PuC3H35基因启动子驱动GUS基因转基因大青杨的GUS染色实验发现,正常培养条件下,发现只在根部可看到明显的染色现象,渗透胁迫后,GUS染色在根中颜色更深,叶片染色很浅,与定量结果一致。（3）分别获得了PuC3H35过表达（PuC3H35-OE）和抑制表达（PuC3H35-SRDX）大青杨转基因株系。对组培苗进行6%PEG6000渗透胁迫后发现,与野生型大青杨（WT）相比,PuC3H35-OE株系的根系更发达,根部电导率（EL）、丙二醛（MDA）和活性氧（ROS）含量少,相反,与WT相比,PuC3H35-SRDX株系根部生物量小、EL、MDA和ROS含量高。对土培苗的干旱胁迫实验后发现,在长期干旱胁迫后,与WT相比,过表达株系的根部发达,木质化程度提高,而抑制表达株系根部生长受到抑制,木质化程度低。这些结果表明干旱胁迫时,PuC3H35锌指蛋白转录因子能够通过提高根部清除ROS的能力和提高根部木质化程度来抵御干旱胁迫。（4）对正常生长和6%PEG6000胁迫7天的WT和PuC3H35-OE株系根部进行转录组测序,正常生长条件下有1488个差异基因（DEGs）,其中PuC3H35-OE株系中有893个基因上调表达,595个基因下调表达;当干旱胁迫后共有1282个差异基因,其中PuC3H35-OE株系551个基因上调表达,731个基因下调表达。对差异基因进行GO功能注释发现,这些差异基因很多与代谢途径相关如类黄酮代谢过程、次生代谢过程、原花青素生物合成途径、木质素生物途径。同时与植物防胁迫和防御反应相关的GO terms如激素代谢途径、脱落酸信响应、水分运输、以及细胞分裂、细胞对过氧化氢的反应等都具有差异基因的显着富集。（5）染色质免疫共沉淀、酵母单杂交和凝胶迁移实验验证了 PuC3H35蛋白可以与原花青素合成途径中的花青素还原酶（PuANR）基因和木质素生物合成调控基因PuEARL11的启动子区相结合,从而直接调控这两个基因的表达。（6）PuANR过表达（PuANR-OE）株系促进了干旱胁迫下根部原花青素的积累和降低了根部的ROS水平,提高了转基因株系的抗旱能力,而PuANR抑制表达（PuANR-RNAi）株系降低了干旱胁迫下根部原花青素的积累,提高了根部的ROS水平,降低了转基因株系的抗旱性。同样,PuEARL11过表达株系（PuEARL11-OE）促进了干旱胁迫下根部木质素合成,提高了转基因株系的抗旱性,而该基因的RNAi抑制表达株系降低了转基因株系的木质素含量和抗旱性。综上所述,在干旱胁迫下,PuC3H35能够通过促进根部原花青素的合成,降低胁迫后根部产生的ROS,另一方面通过促进根部木质素合成来提高根部木质化程度,两种机制相辅相成,共同作用最终提高大青杨的抗旱性。本研究为理解杨树根系抗旱响应的分子机制提供了新的思路,为杨树遗传改良奠定了理论基础。
白雪[10]（2020）在《四季秋海棠叶片在低温和高光胁迫下次生花色素苷生物合成相关基因以及物质的研究》文中指出花色素苷是使植物组织由红变紫的主要物质。它们常会因各种环境胁迫在植物叶片上合成和积累,因此被称为植物胁迫的“指示物”。影响叶片中花色素苷合成的因素有很多,如温度、光周期和激素等等。通过转录组测序技术的发展,我们可以进一步探索低温、强光诱导下花色素苷合成机理。本研究以四季秋海棠‘超级奥林匹克’的叶片为研究材料,在理想条件下对四季秋海棠叶片进行两种不同胁迫条件下（正常生长条件CK、高光条件HL和低温条件LT）处理。并从实验测定的数据中发现,低温和高光胁迫处理在诱导花色素苷合成相关的结构基因（PAL、C4H、4CL、CHI、CHS、F3H、ANS、ANR、LAR、UFGT、DFR、F3’H）表达的同时,转录基因（MYB、MYC、BHLH、WD40）也有相应的应激表达,同时发现转运基因GST在胁迫条件下也有相应的表达变化。另外发现,与花色素苷相关次生代谢物质在胁迫条件下也有一定的含量表达变化。因此用标准曲线法方法对其相关物质（PA、查尔酮、二氢槲皮素）进行了测定和分析。并对低温和高光不同胁迫处理下相关结构基因和转录基因进行q RT-PCR分析。（1）低温胁迫下显着增加花色素苷含量,通过对花色素苷的生物合成路径上相关基因的研究,对照组基因表达量几乎不变,前期关键花色素苷合成基因（PAL、C4H、4CL、CHS）都在3h后有相对表达量,5h时已经出现差异性显着表达;对于中期、后期基因（CHI、、F3H、ANS、ANR、LAR、UFGT、DFR、F3’H）,低温胁迫下1d之前已经开始表达,可以得出这几种结构因子响应低温胁迫下花色素苷的合成;持续低温胁迫下12条调控基因（MYB、MYC、BHLH、WD40）也出现了相应基因表达量的变化,因此可以推断出,四季秋海棠绿叶品种中花色素苷的积累在低温条件下,它需要有结构与调控基因两种类型的基因来影响叶片花色素苷的合成代谢。（2）高光胁迫处理下花色素苷含量显着积累增加,同理通过花色素苷的生物合成路径上相关基因的研究,对照组基因表达量几乎不变,前期关键花色素苷合成基因（PAL、C4H、4CL、CHS）都在9h时达到了基因表达量的峰值,对于中期、后期基因（CHI、、F3H、ANS、ANR、LAR、UFGT、DFR、F3’H）也相应在9h处达到了相对表达量峰值;持续高光胁迫条件下12条调控基因（MYB、MYC、BHLH、WD40）,出现相对增高表达的变化。可以推断出在高光胁迫处理下花色素苷的积累与结构和调控基因也存在着密不可分的联系;也初步推断出在四季秋海棠叶片中低温花色素苷合成途径相较于高光下花色素苷的合成途径较为复杂。（3）在低温胁迫和高光胁迫处理下,GST基因的相对表达水平发生改变,相对表达水平始于3h。可以推断,在低温和强光下秋海棠叶片中进行的的花色素苷合成,与转运基因GST也存在着密切联系。（4）低温（15/5℃）和高光(600μmolm-2s-1)对四季秋海棠叶片花色素苷的积累均有明显的促进作用,且具有明显的表型变化特征。通过对叶片胁迫处理后,测定了原花青素、查尔酮、二氢槲皮素和花色素苷四个生理指标,用以分析胁迫作用下物质含量的变化与花色素苷合成。结果表明,常温对照组中这四种含量几乎没有变化,而在实验组（低温诱导和高光诱导）中,原花青素、查尔酮、二氢槲皮素这三个物质含量先于花色素苷积累,作为代谢途径上次生代谢产物,可推测出环境胁迫下这三种物质含量变化和花色素苷含量积累密切相关。
二、原花青素的研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、原花青素的研究进展（论文提纲范文）
（1）原花青素的研究进展（论文提纲范文）
| 1 原花青素的提取方法 |
| 1.1 溶剂提取法 |
| 1.2 酶提取法 |
| 1.3 超临界CO2提取法 |
| 1.4 辅助提取方法 |
| 1.4.1 超声波辅助提取 |
| 1.4.2 微波辅助提取 |
| 2 原花青素的分离纯化 |
| 2.1 柱层析法 |
| 2.2 膜分离法 |
| 2.3 高速逆流色谱 |
| 3 原花青素的含量测定方法 |
| 3.1 盐酸-正丁醇法 |
| 3.2 香草醛法 |
| 3.3 DMAC法 |
| 3.4 高效液相色谱法 |
| 4 原花青素药理活性 |
| 4.1 清除自由基及抗氧化活性 |
| 4.2 抗炎 |
| 4.3 降血糖、降血脂 |
| 4.4 抗癌、抗肿瘤 |
| 5 小结与展望 |
（2）黑果腺肋花楸原花青素的提取，抗氧化及其抑菌活性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英汉缩略词表 |
| 第一章 前言 |
| 1.1 黑果腺肋花楸的研究现状 |
| 1.1.1 黑果腺肋花楸的生理学特征 |
| 1.1.2 黑果腺肋花楸的化学成分 |
| 1.1.3 黑果腺肋花楸的药理作用 |
| 1.2 原花青素的研究进展 |
| 1.2.1 原花青素的结构 |
| 1.2.2 原花青素的生物活性 |
| 1.2.3 原花青素的提取方法 |
| 1.3 水果鲜切保鲜的研究现状 |
| 1.4 本文研究目的及研究内容 |
| 第二章 低共熔溶剂提取黑果腺肋花楸原花青素的正交试验 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 药品、试剂与仪器 |
| 2.2.2 低共熔溶剂的制备 |
| 2.2.3 原花青素含量的测定 |
| 2.2.4 单因素试验 |
| 2.2.5 正交试验 |
| 2.2.6 黑果腺肋花楸原花青素提取物的纯化实验 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 低共熔溶剂的制备结果 |
| 2.3.2 原花青素标准曲线的绘制 |
| 2.3.3 单因素试验结果 |
| 2.3.4 正交试验结果 |
| 2.3.5 黑果腺肋花楸原花青素提取物纯化后的纯度 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 黑果腺肋花楸原花青素的抗氧化实验 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 药品、试剂与仪器 |
| 3.2.2 黑果腺肋花楸原花青素对DPPH自由基的清除作用 |
| 3.2.3 黑果腺肋花楸原花青素对OH~-自由基的清除作用 |
| 3.2.4 黑果腺肋花楸原花青素对O~(2-)自由基的清除作用 |
| 3.2.5 黑果腺肋花楸原花青素对ABTS自由基的清除作用 |
| 3.2.6 黑果腺肋花楸原花青素的总还原能力 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 黑果腺肋花楸原花青素对DPPH自由基的清除率 |
| 3.3.2 黑果腺肋花楸原花青素对OH-自由基的清除率 |
| 3.3.3 黑果腺肋花楸原花青素对O~(2-)自由基的清除率 |
| 3.3.4 黑果腺肋花楸原花青素对ABTS自由基的清除率 |
| 3.3.5 黑果腺肋花楸原花青素的总还原能力测定 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 黑果腺肋花楸原花青素的抑菌活性研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 药品、试剂与仪器 |
| 4.2.2 定性抑菌性能研究 |
| 4.2.3 最小抑菌浓度(MIC)的测定 |
| 4.2.4 生长抑制曲线 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 定性抑菌性能研究 |
| 4.3.2 最小抑菌浓度(MIC)的确定 |
| 4.3.3 生长抑制曲线的绘制 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 黑果腺肋花楸提取物在鲜切水果保鲜上的应用 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.1 药品、试剂与仪器 |
| 5.2.2 水果的处理 |
| 5.2.3 鲜切苹果失重率测定 |
| 5.2.4 鲜切苹果硬度的测定 |
| 5.2.5 鲜切苹果色差的测定 |
| 5.2.6 鲜切苹果糖度的测定 |
| 5.2.7 鲜切苹果MDA含量的测定 |
| 5.2.8 鲜切苹果细菌总数的测定 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 鲜切苹果失重率的测定 |
| 5.3.2 鲜切苹果硬度的测定 |
| 5.3.3 鲜切苹果色差值的测定 |
| 5.3.4 鲜切苹果糖度的测定 |
| 5.3.5 鲜切苹果MDA含量的测定 |
| 5.3.6 鲜切苹果细菌总数测定 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（3）花生红衣中原花青素的提取纯化及其生物活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 花生红衣概述 |
| 1.1.1 花生红衣中的成分 |
| 1.1.2 花生红衣中的原花青素 |
| 1.2 原花青素概述 |
| 1.2.1 原花青素的结构 |
| 1.2.2 原花青素的性质 |
| 1.2.3 原花青素的功能特性 |
| 1.2.4 原花青素的测定 |
| 1.2.5 原花青素的提取纯化 |
| 1.3 研究目的与意义 |
| 1.4 研究内容 |
| 1.5 技术路线 |
| 第2章 超声辅助提取花生红衣原花青素 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 材料与试剂 |
| 2.1.2 仪器与设备 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 PSPC的提取方法 |
| 2.2.2 原花青素提取率的测定 |
| 2.3 原花青素提取率的计算 |
| 2.4 正交试验优化花生红衣中原花青素提取工艺 |
| 2.5 结果与分析 |
| 2.5.1 单因素试验 |
| 2.5.2 正交试验优化提取工艺 |
| 2.6 本章小结 |
| 第3章 花生红衣原花青素的纯化及成分分析 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 原料与试剂 |
| 3.1.2 仪器与设备 |
| 3.2 研究方法 |
| 3.2.1 原花青素提取液的制备 |
| 3.2.2 原花青素的检测 |
| 3.2.3 原花青素分离纯化的研究 |
| 3.2.4 PSPC成分分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 大孔树脂的筛选 |
| 3.3.2 动态吸附曲线 |
| 3.3.3 上样浓度对大孔树脂吸附原花青素的影响 |
| 3.3.4 上样流速对大孔树脂吸附原花青素的影响 |
| 3.3.5 洗脱液浓度对大孔树脂解吸原花青素的影响 |
| 3.3.6 洗脱流速对大孔树脂解吸原花青素的影响 |
| 3.3.7 PSPC的成分分析 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 花生红衣原花青素生物活性研究 |
| 4.1 试验材料 |
| 4.1.1 材料与试剂 |
| 4.1.2 仪器与设备 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.2.1 自由基清除能力测定 |
| 4.2.2 抗脂质氧化研究 |
| 4.2.3 抑制酶活性研究 |
| 4.2.4 体外消化研究 |
| 4.3 结果分析 |
| 4.3.1 原花青素对DPPH自由基的清除能力 |
| 4.3.2 原花青素对ABTS自由基的清除能力 |
| 4.3.3 PSPC对冷藏猪肉酸价的影响 |
| 4.3.4 PSPC对冷藏猪肉POV的影响 |
| 4.3.5 PSPC对冷藏猪肉TBA值的影响 |
| 4.3.6 PSPC对α-Glu活性的抑制效果 |
| 4.3.7 PSPC对α-Amy活性的抑制效果 |
| 4.3.8 PSPC在模拟胃环境中的消化结果 |
| 4.3.9 PSPC在模拟肠道环境中的消化结果 |
| 4.4 本章小结 |
| 第5章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
| 一、作者简历 |
| 二、硕士期间发表的论文 |
（4）原花青素缓解工业大麻镉胁迫机理分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 主要符号对照表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 土壤镉污染现状与危害 |
| 1.1.1 土壤镉污染现状 |
| 1.1.2 土壤镉污染危害 |
| 1.2 工业大麻现状 |
| 1.2.1 工业大麻简介 |
| 1.2.2 工业大麻镉污染修复 |
| 1.3 植物耐镉机理研究进展 |
| 1.4 施加外源物质缓解植物镉胁迫进展研究 |
| 1.4.1 施加不同外源物质缓解镉胁迫的研究进展 |
| 1.4.2 施加外源原花青素缓解植物镉胁迫的研究进展 |
| 1.5 原花青素合成途径及关键酶基因 |
| 1.6 转录组应用于非生物胁迫的研究进展 |
| 1.7 代谢组应用于非生物胁迫的研究进展 |
| 1.8 研究背景、目的与意义 |
| 第二章 外源原花青素对工业大麻镉毒害的缓解作用 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验处理 |
| 2.1.3 试验方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 不同处理环境对工业大麻的生长影响 |
| 2.2.2 原花青素对镉胁迫下大麻的GSH影响 |
| 2.2.3 原花青素对镉胁迫下大麻的SOD影响 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 不同处理环境工业大麻幼苗的转录组测定 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 试验处理 |
| 3.1.3 转录组测定及分析流程 |
| 3.1.4 转录组验证 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 测序数据统计 |
| 3.2.2 序列质控与转录本的组装 |
| 3.2.3 基因注释分析 |
| 3.2.4 基因表达量分析 |
| 3.2.5 差异基因的确定 |
| 3.2.6 差异基因的GO、KEGG富集分析 |
| 3.2.7 差异基因参与植物激素、抗氧化性、基因家族的表达分析 |
| 3.2.8 转录组差异基因的q PCR验证 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 不同处理环境工业大麻幼苗的代谢组测定 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验材料 |
| 4.1.2 试验处理 |
| 4.1.3 组学测定及分析流程 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 原始数据预处理与主成分分析 |
| 4.2.2 代谢组差异代谢物的确定 |
| 4.2.3 差异代谢物的富集分析 |
| 4.3 讨论 |
| 第五章 工业大麻ANR与 LAR基因的克隆及功能分析 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验材料 |
| 5.1.2 菌种与载体 |
| 5.1.3 目的基因的获得与生物信息学分析 |
| 5.1.4 克隆载体的构建 |
| 5.1.5 表达载体的构建与转化 |
| 5.1.6 拟南芥的种植与转化 |
| 5.1.7 转基因拟南芥的耐逆性实验 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 表达载体的构建与基因的生信分析 |
| 5.2.2 转基因T1 代拟南芥的验证 |
| 5.2.3 转基因T3 代拟南芥的耐性验证 |
| 5.3 讨论 |
| 第六章 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（5）McWRKY71调控海棠花青素和原花青素的生物合成应答臭氧胁迫的分子机制（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 植物响应臭氧胁迫的研究进展 |
| 1.1.1 臭氧胁迫对植物的影响 |
| 1.1.2 植物对臭氧胁迫的响应 |
| 1.2 花青素及原花青素的研究进展 |
| 1.2.1 花青素及原花青素的功能 |
| 1.2.2 花青素及原花青素合成的结构基因 |
| 1.2.3 调控花青素及原花青素合成的转录因子 |
| 1.3 花青素和原花青素与植物抗逆研究进展 |
| 1.4 WRKY转录因子研究进展 |
| 1.4.1 WRKY参与植物逆境胁迫 |
| 1.4.2 WRKY调控花青素和原花青素的合成 |
| 1.5 研究目的及意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 菌株 |
| 2.1.3 载体 |
| 2.1.4 引物 |
| 2.1.5 生化试剂药品 |
| 2.1.6 培养基配方 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 臭氧胁迫处理海棠 |
| 2.2.2 臭氧胁迫处理‘王林’苹果愈伤组织 |
| 2.2.3 活性氧染色 |
| 2.2.4 抗氧化酶活性测定 |
| 2.2.5 MDA含量测定 |
| 2.2.6 花青素含量的测定 |
| 2.2.7 原花青素含量的测定 |
| 2.2.8 基因组DNA提取 |
| 2.2.9 总RNA的提取 |
| 2.2.10 反转录试验 |
| 2.2.11 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) |
| 2.2.12 基因克隆 |
| 2.2.13 克隆产物胶回收 |
| 2.2.14 连接克隆载体 |
| 2.2.15 大肠杆菌感受态(DH5α)的转化 |
| 2.2.16 菌落PCR验证与测序 |
| 2.2.17 提取质粒 |
| 2.2.18 载体和质粒双酶切 |
| 2.2.19 连接表达载体 |
| 2.2.20 构建表达载体 |
| 2.2.21 农杆菌感受态(LBA4404)的转化 |
| 2.2.22 大肠杆菌感受态BL21(DE3)的转化 |
| 2.2.23 苹果‘王林’愈伤组织转化实验 |
| 2.2.24 酵母转化实验 |
| 2.2.25 蛋白相关的实验 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 臭氧胁迫对‘红久’海棠的影响 |
| 3.1.1 臭氧胁迫对‘红久’海棠叶片表观及活性氧的影响 |
| 3.1.2 臭氧胁迫对‘红久’海棠抗氧化酶活性及MDA含量的影响 |
| 3.1.3 臭氧胁迫对‘红久’海棠花青素及原花青素含量的影响 |
| 3.1.4 臭氧胁迫对‘红久’海棠花青素及原花青素结构基因的影响 |
| 3.2 臭氧胁迫的转录组测序分析 |
| 3.2.1 转录组结果分析 |
| 3.2.2 qRT-PCR与转录组相关性分析 |
| 3.3 WRKY71 的克隆与蛋白序列和进化树分析 |
| 3.4 过表达McWRKY71 对苹果愈伤组织抗臭氧能力的影响 |
| 3.5 过表达McWRKY71 对苹果愈伤组织花青素和原花青素含量的影响 |
| 3.6 McWRKY71 互作蛋白的验证 |
| 3.7 McWRKY71 绑定启动子的验证 |
| 4 讨论 |
| 4.1 臭氧胁迫能促进‘红久’海棠ROS的积累以及抗氧化酶活性的增加 |
| 4.2 臭氧胁迫促进‘红久’海棠花青素和原花青素的积累 |
| 4.3 McWRKY71 调控花青素和原花青素积累增强‘红久’海棠抵抗臭氧胁迫能力 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
（6）紫大薯粗提物对H2O2诱导IPEC-J2细胞氧化损伤的预保护与作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 文献综述 |
| 1 海南紫大薯资源概述 |
| 2 原花青素与花青素 |
| 2.1 来源与种类 |
| 2.2 原花青素和花青素的提取和纯化方法 |
| 2.2.1 原花青素和花青素提取方法 |
| 2.2.2 原花青素和花青素纯化方法 |
| 2.3 生物学功能 |
| 2.3.1 抗氧化功能 |
| 2.3.2 抗炎功能 |
| 2.3.3 抗菌功能 |
| 2.3.4 抗癌功能 |
| 2.3.5 其他生物学功能 |
| 3 畜禽应用及其作用机理 |
| 4 研究目的和意义 |
| 试验一 海南紫大薯花青素粗提物的制备与作用效果测定 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要试剂与仪器设备 |
| 1.2 试验材料 |
| 1.3 试剂配制 |
| 1.4 试验方法 |
| 1.4.1 花青素粗提物的提取 |
| 1.4.2 花青素粗提物的纯化 |
| 1.4.3 花青素粗提物结构分析 |
| 1.4.4 粗提物与VC的自由基清除等效试验 |
| 1.4.5 IPEC-J2 细胞培养 |
| 1.4.6 CCK-8 法测定细胞存活率 |
| 1.5 数据处理 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 紫大薯粗提物组成成分 |
| 2.2 DPPH自由基清除率 |
| 2.3 粗提物对IPEC-J2 细胞的毒性测定 |
| 2.4 VC对 IPEC-J2 细胞存活率的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 试验二 构建H_2O_2诱导IPEC-J2 细胞系氧化损伤模型 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 IPEC-J2 细胞培养 |
| 1.2.2 H_2O_2工作液配制 |
| 1.2.3 试验设计 |
| 1.3 测定指标 |
| 1.3.1 细胞存活率 |
| 1.3.2 抗氧化指标 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 H_2O_2浓度和作用时间对IPEC-J2 细胞相对存活率的影响 |
| 2.2 H_2O_2浓度和作用时间对IPEC-J2 细胞抗氧化指标的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 试验三 紫大薯粗提物对IPEC-J2 细胞氧化损伤的预保护作用 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 IPEC-J2 细胞培养 |
| 1.2.2 试验设计 |
| 1.2.3 样品采集 |
| 1.2.4 抗氧化功能测定 |
| 1.2.5 荧光定量PCR |
| 1.2.6 Western blot法检测细胞NF-κB信号通路蛋白表达 |
| 1.2.7 数据处理 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 粗提物预保护条件下IPEC-J2 细胞抗氧化功能的变化 |
| 2.2 粗提物对H_2O_2损伤IPEC-J2 细胞预保护下基因表达的影响 |
| 2.3 粗提物对H_2O_2诱导损伤IPEC-J2 细胞氧化损伤的蛋白表达水平的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附表1 H_2O_2浓度和作用时间对IPEC-J2 细胞抗氧化指标的影响 |
| 附表2 紫大薯粗提物对H_2O_2损伤IPEC-J2 细胞预保护下抗氧化功能的影响 |
| 致谢 |
（7）原花青素减轻NaF所致小鼠MLO-Y4骨细胞损伤研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 NaF对MLO-Y4骨细胞的损伤研究 |
| 一、材料与方法 |
| (一) 实验材料 |
| 1. 细胞 |
| 2. 主要实验试剂 |
| 3. 主要仪器设备 |
| 4. 主要试剂配制 |
| (二) 实验方法 |
| 1.细胞常规培养 |
| 2.NaF诱导MLO-Y4骨细胞损伤模型的建立 |
| 3.倒置显微镜下观察不同浓度NaF对MLO-Y4骨细胞形态的影响 |
| 4.钙黄绿素乙酿甲酯（Calcein-AM)染色法观察不同浓度NaF对MLO-Y4骨细胞活性的影响 |
| 5.细胞计数试剂（CellCountingKit-8, CCK-8)法测定NaF对MLO-Y4骨细胞活性的影响 |
| 6.自嗤检测试剂（Green detection reagent, CYTO-ID)染色法流式细胞术检测NaF对骨细胞自噬作用 |
| 7.吖啶橙（Acridine Orange, AO)荧光染色法流式细胞术检测NaF对骨细胞的酸性囊泡细胞器（acidic vesicle organelles，AVO)的作用 |
| 8.碘化丙啶（Propidiumlodide，PI)染色法流式细胞术检测NaF对骨细胞的细胞周期和细胞增殖的作用 |
| 9.蛋白质印迹（Western Blot)法测定NaF对MLO-Y4骨细胞损伤在细胞自噬、増殖相关通路的影响 |
| 10. 统计方法 |
| 二、实验结果 |
| (一) 光学显微镜观察不同浓度NaF对MLO-Y4骨细胞形态的影响 |
| (二) Calcein-AM染色法荧光显微镜观察不同浓度NaF对MLO-Y4骨细胞活性的影响 |
| (三) CCK-8法测定不同浓度NaF对MLO-Y4骨细胞活性的影响 |
| (四) 不同浓度NaF对MLO-Y4骨细胞自噬作用的影响 |
| (五) 不同浓度NaF对MLO-Y4骨细胞AVO数量的影响 |
| (六) 不同浓度NaF对MLO-Y4骨细胞增殖作用的影响 |
| (七) 不同浓度NaF对MO-Y4骨细胞自噬、增殖相关蛋白信号通路的影响 |
| 三、分析与讨论 |
| 第二部分 原花青素对NaF所致MLO-Y4骨细胞损伤的保护作用及其机制 |
| 一、材料与方法 |
| (一) 实验材料 |
| 1. 细胞 |
| 2. 主要实验试剂 |
| 3. 主要仪器设备 |
| 4. 主要试剂配制 |
| (二) 实验方法 |
| 1. 细胞培养 |
| 2. CCK-8法测定不同浓度原花青素对MLO-Y4骨细胞活性的影响 |
| 3. 倒置显微镜下观察不同浓度原花青素对NaF诱导MLO-Y4骨细胞形态的影响 |
| 4. Calcein-AM染色法观察不同浓度原花青素对NaF诱导MLO-Y4骨细胞活性的影响 |
| 5. CCK-8法测定不同浓度原花青素对NaF诱导MLO-Y4骨细胞活性的影响 |
| 6. CYTO-ID染色法流式细胞术检测原花青素对NaF诱导MLO-Y4骨细胞自噬的作用 |
| 7. PI染色法流式细胞术检测原花青素对NaF诱导MLO-Y4骨细胞细胞周期和细胞增殖的作用 |
| 8. Westem Blot法测定原花青素对NaF所致MLO-Y4骨细胞损伤在细胞自噬、增殖相关通路的影响 |
| 9. 统计方法 |
| 二、实验结果 |
| (一) 不同浓度原花青素对MLO-Y4骨细胞活性的影响 |
| (二) 光学显微镜观察不同浓度原花青素对NaF诱导MLO-Y4骨细胞形态的影响 |
| (三) Calcein-AM染色法荧光显微镜观察不同浓度原花青素对NaF诱导MLO-Y4骨细胞活性的影响 |
| (四) 不同浓度原花青素对NaF诱导MLO-Y4骨细胞活性的影响 |
| (五) 不同浓度原花青素对NaF诱导MLO-Y4骨细胞自噬作用的影响 |
| (六) 不同浓度原花青素对NaF诱导MLO-Y4骨细胞增殖作用的影响 |
| (七) 不同浓度原花青素对NaF诱导MLO-Y4骨细胞在自噬、增殖相关蛋白信号通路的影响 |
| 三、分析与讨论 |
| 四、不足与展望 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 文献综述 原花育素对地方性振中毒症作用的研究进展 |
| 参考文献 |
（8）原花青素接枝壳聚糖负载GO功能包装膜的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 壳聚糖 |
| 1.2.1 壳聚糖的分子结构 |
| 1.2.2 壳聚糖的性能 |
| 1.2.3 壳聚糖在食品保鲜中的应用 |
| 1.3 原花青素 |
| 1.3.1 原花青素分子结构 |
| 1.3.2 原花青素的性能 |
| 1.3.3 原花青素在食品保鲜中的作用 |
| 1.4 氧化石墨烯 |
| 1.4.1 氧化石墨烯的分子结构 |
| 1.4.2 氧化石墨烯的性能 |
| 1.4.3 氧化石墨烯在食品保鲜中的作用 |
| 1.5 壳聚糖的改性方法 |
| 1.5.1 化学法 |
| 1.5.2 物理法 |
| 1.5.3 生物法 |
| 1.6 多功能包装膜的成膜方式及应用 |
| 1.6.1 成膜方式 |
| 1.6.2 多功能膜的应用 |
| 1.7 本论文的研究目的、意义及内容 |
| 1.7.1 目的和意义 |
| 1.7.2 研究内容 |
| 1.7.3 技术路线 |
| 1.8 参考文献 |
| 第二章 壳聚糖-原花青素高抗氧化抑菌共混膜的研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与仪器 |
| 2.2.1 主要材料 |
| 2.2.2 主要仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 壳聚糖-原花青素共混膜的制备 |
| 2.3.2 C-CS-PC膜的表征与测试 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 FT-IR分析 |
| 2.4.2 XRD分析 |
| 2.4.3 透光率和雾度分析 |
| 2.4.4 溶胀度和溶解度分析 |
| 2.4.5 力学性能分析 |
| 2.4.6 阻隔性能分析 |
| 2.4.7 热学性能分析 |
| 2.4.8 抑菌性能分析 |
| 2.4.9 抗氧化性能分析 |
| 2.4.10 pH响应性能分析 |
| 2.4.11 SEM分析 |
| 2.5 本章小结 |
| 2.6 参考文献 |
| 第三章 TEMPO-漆酶氧化体系催化原花青素接枝壳聚糖反应机理研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 材料与仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 漆酶作用于原花青素最佳时间及中间产物结构的确定 |
| 3.3.2 原花青素接枝壳聚糖衍生物的制备 |
| 3.3.3 原花青素接枝壳聚糖衍生物的表征与测试 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 漆酶改性原花青素中间产物表征和最佳反应时间的确定 |
| 3.4.2 原花青素接枝壳聚糖衍生物结构分析 |
| 3.5 本章小结 |
| 3.6 参考文献 |
| 第四章 原花青素接枝壳聚糖负载氧化石墨烯多功能膜的制备及性能研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 材料与仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 原花青素接枝壳聚糖负载氧化石墨烯多功能膜(GO-G-CS/PC)的制备 |
| 4.3.2 GO-G-CS/PC的表征与测试 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 物理性能分析 |
| 4.4.2 XRD分析 |
| 4.4.3 阻光性能 |
| 4.4.4 力学性能分析 |
| 4.4.5 阻隔性能分析 |
| 4.4.6 TG分析 |
| 4.4.7 抗氧化性分析 |
| 4.4.8 抑菌性能测试 |
| 4.4.9 pH响应性能 |
| 4.4.10 SEM分析 |
| 4.5 本章小结 |
| 4.6 参考文献 |
| 第五章 原花青素接枝壳聚糖负载GO功能膜在奶酪包装中的应用 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料 |
| 5.2.1 材料与仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 奶酪样品的预处理 |
| 5.3.2 感官评价测试 |
| 5.3.3 色度测试 |
| 5.3.4 pH值测定 |
| 5.3.5 过氧化值测试 |
| 5.3.6 菌落总数测试 |
| 5.3.7 货架寿命评价 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 感官评价 |
| 5.4.2 菌落总数测试 |
| 5.4.3 pH值测试 |
| 5.4.4 颜色测试 |
| 5.4.5 过氧化值测试 |
| 5.4.6 货架寿命评价 |
| 5.5 本章小结 |
| 5.6 参考文献 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 全文总结 |
| 6.2 论文的创新点 |
| 6.3 论文的不足之处与展望 |
| 攻读博士学位期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（9）锌指蛋白PuC3H35调控大青杨根部应答干旱胁迫的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 植物对干旱胁迫的响应机制 |
| 1.2.1 渗透调节 |
| 1.2.2 抗氧化系统 |
| 1.2.3 植物激素 |
| 1.2.4 木质素 |
| 1.2.5 分子响应机制 |
| 1.3 干旱胁迫下根系的响应 |
| 1.4 CCCH锌指蛋白的研究进展 |
| 1.4.1 锌指蛋白简介 |
| 1.4.2 CCCH锌指蛋白结构 |
| 1.4.3 第Ⅸ亚族CCCH型锌指蛋白的生物学功能 |
| 1.5 研究的目的和意义 |
| 2 大青杨PuC3H3-基因和启动子的表达研究 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 菌株与载体 |
| 2.1.3 实验试剂(盒) |
| 2.1.4 溶液及培养基的配置 |
| 2.1.5 主要仪器设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 大青杨PuC3H35基因的克隆 |
| 2.2.2 大青杨PuC3H35基因表达模式分析 |
| 2.2.3 PuC3H35基因启动子的克隆及表达载体的构建 |
| 2.2.4 农杆菌介导法转化大青杨 |
| 2.2.5 PuC3H35基因启动子表达分析 |
| 2.2.6 PuC3H35基因启动子元件分析 |
| 2.2.7 PuC3H35基因生物信息学分析 |
| 2.2.8 PuC3H35亚细胞定位 |
| 2.2.9 PuC3H35转录活性分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 大青杨PuC3H35基因的获得 |
| 2.3.2 大青杨PuC3H35基因表达模式分析 |
| 2.3.3 大青杨PuC3H35启动子的获得及转基因检测 |
| 2.3.4 PuC3H35多列比对及结构分析 |
| 2.3.5 PuC3H35进化树分析 |
| 2.3.6 PuC3H35亚细胞定位 |
| 2.3.7 PuC3H35转录激活区的确定 |
| 2.4 本章小结 |
| 2.5 本章讨论 |
| 3 PuC3H35转基因植株的获得及功能分析 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 植物材料 |
| 3.1.2 菌株与载体 |
| 3.1.3 主要试剂(盒)及仪器 |
| 3.1.4 溶液及培养基的配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 PuC3H35过表达载体构建 |
| 3.2.2 pBI121-PuC3H35-SRDX表达载体构建 |
| 3.2.3 PuC3H35过表达及PuC3H35-SRDX表达载体遗传转化大青杨 |
| 3.2.4 PuC3H35转基因大青杨的筛选与检测 |
| 3.2.5 干旱胁迫下PuC3H35转基因组培苗抗旱生理分析 |
| 3.2.6 干旱胁迫下PuC3H35转基因大青杨土培苗生理分析 |
| 3.2.7 石蜡切片 |
| 3.2.8 木质素含量的测定 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 过表达载体pBI121-PuC3H35-GFP的获得 |
| 3.3.2 pBI121-PuC3H35-SRDX(PuC3H35-SRDX)载体的获得 |
| 3.3.3 pBI121-PuC3H35和pBI121-PuC3H35-SRDX转化农杆菌 |
| 3.3.4 PuC3H35过表达转基因植株的筛选与检测 |
| 3.3.5 PuC3H35-SRDX转基因植株的筛选与检测 |
| 3.3.6 干旱胁迫后PuC3H35转基因大青杨组培苗生理分析 |
| 3.4 干旱胁迫后PuC3H35转基因土培苗表型观察及生理分析 |
| 3.4.1 短期干旱胁迫PuC3H5-OE和PuC3H5-SRDX株系的表型分析 |
| 3.4.2 长期干旱胁迫PuC3H5-OE和PuC3H5-SRDX株系的表型分析 |
| 3.5 本章小节 |
| 3.6 本章讨论 |
| 4 PuC3H35调控下游基因的分析 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 植物材料 |
| 4.1.2 药品及试剂(盒) |
| 4.1.3 实验仪器 |
| 4.1.4 药品配制 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 转录组测序 |
| 4.2.2 QRT-PCR验证转录组数据 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 转录组测序结果评估 |
| 4.3.2 差异基因的鉴定 |
| 4.3.3 GO分类结果 |
| 4.3.4 QRT-PCR验证转录组数据结果 |
| 4.4 本章小结 |
| 4.5 本章讨论 |
| 5 PuC3H35下游靶基因的筛选和验证 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.1.1 植物材料 |
| 5.1.2 菌株与载体 |
| 5.1.3 主要试剂及仪器 |
| 5.1.4 溶液及培养基的配制 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 染色质免疫共沉淀实验 |
| 5.2.2 酵母单杂交实验 |
| 5.2.3 凝胶迁移实验验证PuC3H35结合元件 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 PuC3H35下游基因启动子CT-rich元件预测 |
| 5.3.2 染色质免疫共沉淀验证PuC3H35下游靶基因 |
| 5.3.3 酵母单杂交实验结果分析 |
| 5.3.4 凝胶迁移实验结果分析 |
| 5.4 本章小结 |
| 5.5 本章讨论 |
| 6 PuANR和PuEARLI1基因功能的验证 |
| 6.1 实验材料 |
| 6.1.1 植物材料 |
| 6.1.2 载体与菌株 |
| 6.1.3 溶液及培养基的配制 |
| 6.1.4 实验仪器 |
| 6.2 实验方法 |
| 6.2.1 PuANR和PuEARLI1基因的克隆 |
| 6.2.2 PuANR和PuEARLI1表达载体的构建 |
| 6.2.3 PuANR和PuEARLI1过表达和抑制表达转基因株系的获得和检测 |
| 6.2.4 干旱胁迫下PuANR转基因组培苗表型和生理分析 |
| 6.2.5 干旱胁迫下PuEARLI1转基因组培苗表型和生理分析 |
| 6.3 结果与分析 |
| 6.3.1 PuANR和PuEARLI1基因的克隆 |
| 6.3.2 PuANR和PuEARLI1表达载体的构建 |
| 6.3.3 PuANR和PuEARLI1过表达和抑制表达转基因株系的获得及鉴定 |
| 6.3.4 干旱胁迫下PuANR转基因组培苗的表型和生化指标 |
| 6.3.5 干旱胁迫下PuEARLI1转基因表型和木质素含量的测定 |
| 6.4 本章小结 |
| 6.5 本章讨论 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 工作展望 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
| 博士学位论文修改情况确认表 |
（10）四季秋海棠叶片在低温和高光胁迫下次生花色素苷生物合成相关基因以及物质的研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| 1 文献综述 |
| 1.1 花色素苷简介 |
| 1.2 花色素苷与植物的逆境胁迫 |
| 1.3 基因与花色素苷的合成 |
| 1.3.1 结构基因与花色素苷的合成 |
| 1.3.2 调控基因与花色素苷的合成 |
| 1.3.3 GST与花色素苷的合成 |
| 1.4 原花青素研究进展 |
| 1.5 查尔酮的研究进展 |
| 1.6 二氢槲皮素的研究进展 |
| 1.7 转录组学研究 |
| 1.8 四季秋海棠简介 |
| 1.9 本文研究目的与意义 |
| 2 引言 |
| 3 材料与方法 |
| 3.1 试验材料及处理 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 材料处理 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 总RNA的提取和纯化 |
| 3.2.2 RNA质量及浓度检测与c DNA的合成 |
| 3.2.3 总RNA的提取和纯化 |
| 3.2.4 原花青素含量的测定 |
| 3.2.5 查尔酮含量的测定 |
| 3.2.6 二氢槲皮素含量的测定 |
| 3.2.7 花色素苷含量的测定 |
| 3.2.8 数据分析 |
| 4 结果与分析 |
| 4.1 低温和高光处理对四季秋海棠表型的影响 |
| 4.1.1 低温对四季秋海棠叶片表型影响 |
| 4.1.2 高光对四季秋海棠叶片表型影响 |
| 4.2 低温和高光对四季秋海棠次生代谢合成途径相关基因表达的影响 |
| 4.2.1 胁迫处理持续过程中相关结构基因基因表达量分析 |
| 4.2.1.1 低温处理持续过程中花色素苷结构基因的表达量的变化 |
| 4.2.1.2 高光处理持续过程中花色素苷结构基因的表达量的变化 |
| 4.2.2 胁迫处理持续过程中相关调控基因基因表达量分析 |
| 4.2.2.1 低温处理持续过程中花色素苷调控基因的表达量的变化 |
| 4.2.2.2 高光处理持续过程中花色素苷调控基因的表达量的变化 |
| 4.2.3 胁迫处理下GST基因表达分析 |
| 4.2.3.1 低温处理下GST基因的表达量的变化 |
| 4.2.3.2 高光处理下GST基因的表达量的变化 |
| 4.3 低温和高光处理不同时间点对四季秋海棠相关合成物质含量的影响 |
| 4.3.1 原花青素的含量的变化 |
| 4.3.2 查尔酮的含量的变化 |
| 4.3.3 二氢槲皮素的含量的变化 |
| 4.3.4 花色素苷的含量的变化 |
| 5 讨论 |
| 6 结论 |
| 参考文献 |
| 英文摘要 |
四、原花青素的研究进展（论文参考文献）
- [1]原花青素的研究进展[J]. 刘玟君,李金洲,陈子隽,黄周艳,陈勇. 湖北农业科学, 2021
- [2]黑果腺肋花楸原花青素的提取，抗氧化及其抑菌活性研究[D]. 张欣. 吉林大学, 2021(01)
- [3]花生红衣中原花青素的提取纯化及其生物活性研究[D]. 黄武. 塔里木大学, 2021(08)
- [4]原花青素缓解工业大麻镉胁迫机理分析[D]. 尹明. 中国农业科学院, 2021
- [5]McWRKY71调控海棠花青素和原花青素的生物合成应答臭氧胁迫的分子机制[D]. 张俊康. 山东农业大学, 2021(01)
- [6]紫大薯粗提物对H2O2诱导IPEC-J2细胞氧化损伤的预保护与作用机制研究[D]. 王闫宇. 海南大学, 2021(11)
- [7]原花青素减轻NaF所致小鼠MLO-Y4骨细胞损伤研究[D]. 俞超楠. 浙江中医药大学, 2021(02)
- [8]原花青素接枝壳聚糖负载GO功能包装膜的研究[D]. 张莉. 天津科技大学, 2021(08)
- [9]锌指蛋白PuC3H35调控大青杨根部应答干旱胁迫的机制研究[D]. 李丹丹. 东北林业大学, 2020(09)
- [10]四季秋海棠叶片在低温和高光胁迫下次生花色素苷生物合成相关基因以及物质的研究[D]. 白雪. 河南农业大学, 2020(04)