一、电动式影像切片机的应用研究（论文文献综述）
王宝剑[1]（2021）在《基于“阳化气，阴成形”理论研究TGF-β1/Smads影响黄韧带肥厚的机制及模型的建立》文中进行了进一步梳理黄韧带肥厚（Ligamentum flavum hypertrophy,LFH）是退行性腰椎管狭窄症（Degenerative Lumbar Spinal Stenosis,DLSS）的主要病理表现之一。黄韧带（ligamentum flavum,LF）位于上、下椎板之间,从颈椎延伸至骶椎,起到保护和稳定脊柱的作用。黄韧带在纤维化过程中一方面是其自身体积发生增厚的改变,另一方面是其自身弹性的下降在脊柱后伸时出现皱褶、折叠,使椎管容积减小,导致马尾神经、神经根的受压和缺血缺氧。与此同时,肥厚黄韧带中增多的炎性介质会透过硬脊膜而扩撒至神经根,易造成神经根的炎症及水肿。另外,炎性介质还可以激活多种纤维化因子的表达而加速纤维化的进程。因此黄韧带炎症与纤维化的病理改变共同参与、相互影响而导致了 DLSS腰腿痛、间歇性跛行的症状。在退行性脊柱疾病的促炎细胞因子中,IL-1β、TNF-α是最主要的参与者,其在肥厚黄韧带中的高表达已得到初步证实,另外TGF-β 1/Smads被认为是引起纤维化的最重要的信号传导通路,它在各种组织与器官的纤维化和瘢痕组织纤维性修复过程中有着核心的推动作用。但目前关于黄韧带炎性或纤维化信号通路的研究较少。至于Smads通路是否可以介导TGF-β1致使细胞外基质沉积而导致黄韧带的肥厚,以及IL-1β、TNF-α和TGF-β 1/Smads通路中的相关原件与黄韧带厚度、纤维化程度的具体相关性尚未见报道。而在中医机制方面,“阳化气,阴成形”理论对黄韧带肥厚的病机阐明具有重要指导作用,该理论与现代医学“炎症-纤维化”的病理机制相契合。但目前尚无从该角度探讨黄韧带肥厚的报道。黄韧带肥厚动物模型的建立是研究退行性脊柱疾病的基础,也是探索黄韧带增厚机制、发现药物潜在治疗靶点的前提。但极少数研究涉及腰椎黄韧带肥厚动物模型的制作,对于该动物模型目前仍存在争议。实验一基于“阳化气,阴成形”理论研究IL-1β、TNF-α和TGF-β1/Smads在LFH中的表达及相关性目的:通过对比增厚黄韧带与未增厚黄韧带的纤维化程度以及IL-1β、TNF-α和TGF-β 1/Smads通路相关原件的表达水平,探索黄韧带厚度与纤维化程度和以上原件表达的具体相关性,初步证实Smads通路可以介导TGF-β1致使细胞外基质沉积而导致黄韧带肥厚。从“阳化气,阴成形”理论角度阐述黄韧带肥厚的中医病机,以期为中医药干预黄韧带“炎症-纤维化”病理过程提供理论支持。方法:（1）在取得医学伦理批准和患者知情同意的前提下,在临床手术中收集废弃的DLSS组增厚黄韧带和腰椎间盘突出症（Lumbar disc herniation,LDH）组未增厚黄韧带,各25例。（2）通过MRI测量两组黄韧带的厚度并对比其差异。（3）对两组标本组织进行HE染色组织学观察。（4）进行Masson三色法染色后,通过纤维化分级标准以及弹性纤维-胶原纤维比值来对比两组黄韧带总体与各层（腹侧层、中间层、背侧层）纤维化程度的差异。（5）免疫组化法检测两组黄韧带IL-1β、TNF-α、TGF-β 1/Smads（TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7）、collagen Ⅰ（Col 1）、collagen Ⅲ（Col 3）的定位、半定量表达。（6）Real-Time PCR 法检测两组黄韧带 IL-1β、TNF-α、TGF-β1/Smads（TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7）、Col1 和 Col 3 mRNA 的定量表达。（7）相关性研究:通过pearson相关与线性回归分析明确DLSS组黄韧带的厚度与其各层纤维化程度、mRNA表达的具体相关性。结果:（1）DLSS 组的黄韧带厚度为 5.13±0.80mm,大于 LDH 组 3.52±0.67mm（p<0.01）。（2）HE染色下,LDH组的未增厚黄韧带弹性纤维呈直线状,排列紧密且整齐,表面光滑连续,以弹性纤维为主,含有少量胶原纤维,细胞数目较少。DLSS组增厚的黄韧带纤维呈波浪状,排列紊乱、疏松,弹性纤维减少,胶原纤维含量增加,成纤维细胞增多。（3）DLSS组的总体纤维化分级为2.44±0.31级,高于LDH组的1.62±0.22级（p<0.05）;DLSS组腹侧层、中间层、背侧层的纤维化分级均高于LDH组（p<0.05或p<0.01或p<0.001）;DLSS组腹侧层、中间层、背侧层的纤维化分级是逐渐递增的,即腹侧层<中间层<背侧层（p<0.05或p<0.01）;DLSS组的弹性纤维-胶原纤维面积比值为1.85±0.54,低于LDH组的2.92±0.37（p<0.01）;DLSS组腹侧层、中间层、背侧层的弹性-胶原纤维比值均低于LDH组（p<0.05或p<0.01）;DLSS组腹侧层、中间层、背侧层的弹性-胶原纤维比值是逐渐递减的,即腹侧层>中间层>背侧层（p<0.05或p<0.01）。（4）免疫组化:DLSS 组的 IL-1 β、TNF-α、TGF-β 1、p-Smad2/3、Col 1和Col 3的蛋白表达均高于LDH组（p<0.05或p<0.01或p<0.001）。DLSS组的Smad7的蛋白表达低于LDH组（p<0.01）。（5）Real-Time PCR:DLSS 组 IL-1β、TNF-α、TGF-β1、Smad2、Smad3、Col 1 和 Col 3 的 mRNA 表达高于 LDH 组（p<0.05 或 p<0.01 或 p<0.001）。DLSS 组 Smad7 的 mRNA 表达低于 LDH 组（p<0.05）;DLSS 组的 IL-1β、TGF-β1、Smad2、Smad3、Col 1和Col 3的mRNA表达在背侧层最高,腹侧层最低,有从背侧层向腹侧层逐渐递减的趋势。Smad7的mRNA表达在背侧层最低,腹侧层最高,有从背侧层向腹侧层逐渐递增的趋势。（6）在DLSS组中,黄韧带腹侧层、中间层以及背侧层的纤维化分级随着黄韧带的厚度的增加而升高。各层的相关系数r分别为0.54,0.73,0.84,说明黄韧带的厚度与背侧层纤维化分级的相关程度最高。黄韧带腹侧层、中间层以及背侧层的弹性纤维-胶原纤维比随着黄韧带的厚度的增加而降低。各层的相关系数r分别为-0.62,-0.72,-0.81,说明黄韧带的厚度与背侧层弹性-胶原纤维比值的相关程度最高。（7）在DLSS组中,黄韧带厚度与背侧层TGF-β 1 mRNA表达的相关程度最高,其次依次为IL-1 β、Col 1等;黄韧带厚度与中间层IL-1 β mRNA表达的相关程度最高,其次依次为Smad7、TGF-β 1等;黄韧带厚度与腹侧层TGF-β 1 mRNA表达的相关程度最高,其次依次为为IL-1 β、Col 3等。结论:（1）相较于未增厚黄韧带,肥厚黄韧带中TGF-β1、Smad2、Smad3（或p-Smad2/3）、Col 1和Col3的mRNA和蛋白均呈高表达,Smad7的mRNA和蛋白呈低表达。初步证实Smads通路可以介导TGF-β1致使细胞外基质沉积而导致黄韧带肥厚。（2）在肥厚黄韧带中,背侧层的纤维化程度大于中间层和腹侧层。其厚度也与各层的纤维化程度呈正线性相关,且以背侧层相关性最高,中间层次之,最后是腹侧层。在肥厚黄韧带中,IL-1β、TNF-α、TGF-β1、Smad2、Smad3、Col 1和Col 3 mRNA表达均高于中间层和腹侧层,Smad7 mRNA表达低于中间层和腹侧层。其厚度也与各层的mRNA表达呈正线性（或负线性）相关,且以背侧层相关性最高,中间层次之,最后是腹侧层。说明黄韧带炎症与纤维化的严重程度由背侧向腹侧逐渐递减,其病理改变可由背侧向腹侧逐渐发展。（3）结合“阳化气,阴成形”理论认为,黄韧带在增龄、急性创伤、慢性劳损等因素作用下易出现微损伤,并诱导了局部炎症反应,当机体处于“阴平阳秘”的生理状态时,这种损伤尚能引发适度的炎症反应,以及正常的纤维化修复和瘢痕的形成,而当机体处于阴阳失衡、阳不化气状态时,持续的炎症反应使细胞因子、趋化因子等代谢产物长期聚集于黄韧带局部,形成了炎症微环境,从而诱发了过度的纤维化修复和瘢痕的形成。该中医理论与现代医学中炎症反应诱发过度的纤维化修复和瘢痕形成的理论相类似。实验二基于三种造模方法诱导大鼠黄韧带肥厚动物模型的建立与评价目的:建立一种新的黄韧带肥厚大鼠模型,并将其与人肥厚黄韧带组织进行比较、评估。同时,探讨腰椎活动范围的增加所诱发黄韧带增厚的机制。方法:（1）将72只大鼠分为A假手术组（切开皮肤等组织后缝合）、B肌肉切除组（切除L5-L6椎旁肌肉）、C骨关节切除组（切除L5-L6棘突和棘上韧带,磨除L5/6双侧关节突关节的一半,关节囊不做缝合处理）以及D肌肉+骨关节切除组（B+C混合）共4组,于造模后的4w、8w、12w共3个时间点取材。（2）通过对黄韧带的HE染色和Masson染色,测量L5/6节段黄韧带总体和背侧层的厚度以及弹性纤维-胶原纤维的比值。（3）通过X线片测量屈曲和背伸位时L5/6节段的活动范围和椎间隙高度。（4）通过免疫组化、免疫印迹、Real-Time PCR法检测黄韧带中炎性因子(IL-1β、TNF-α、TGF-β1/Smads通路相关原件和Col 1、Col 3的表达。（5）将大鼠黄韧带与人肥厚黄韧带的退变程度进行比较、评估。结果:（1）HE染色与黄韧带厚度的测量:三种造模方法均可以引起黄韧带厚度的增加,其中以肌肉+骨关节切除法最明显,其次为骨关节切除法,最后为肌肉切除法。12w时肌肉+骨关节切除组黄韧带的整体厚度是假手术组的1.35倍,骨关节切除组是假手术组的1.14倍,肌肉切除组是假手术组的1.06倍。但三种造模方法均不能引起黄韧带宽度的额外增加。12w时肌肉+骨关节切除组黄韧带背侧层厚度是假手术组的2.09倍,骨关节切除组是假手术组的1.26倍,肌肉切除组是假手术组的0.96倍。三种造模方法中只有骨关节切除法和肌肉+骨关节切除法可以引起黄韧带背侧层厚度及其所占比例的增加,其中以肌肉+骨关节切除法最为明显,其次为骨关节切除法。（2）Masson染色与纤维化程度:三种造模方法均可以引起黄韧带的弹性-胶原纤维比值的下降,其中以肌肉+骨关节切除法最为明显,其次为骨关节切除法,最后为肌肉切除法。12w时肌肉+骨关节切除组黄韧带的弹性-胶原纤维比是假手术组的0.43倍,骨关节切除组是假手术组的0.66倍,肌肉切除组是假手术组的0.95倍。（3）影像学测量:三种造模方法均可以造成屈曲位椎间隙后方高度和活动范围的增加,其中以肌肉+骨关节切除法最明显,骨关节切除法次之,最后是肌肉切除法。（4）免疫组化、免疫印迹、Real-Time PCR:①免疫组化结果显示,肌肉+骨关节切除组所产生的 IL-1 β、TNF-α、TGF-β 1、p-smad2/3、Col 1 和 Col 3的蛋白表达量最多,Smad7的表达量最少,其次为骨关节切除法,最后为肌肉切除法;②免疫印迹结果显示,肌肉+骨关节切除组所产生的IL-1 β、TNF-α、TGF-β1和Col 1的蛋白表达量最多,其次为骨关节切除法,最后为肌肉切除法;③Real-Time PCR结果显示,肌肉+骨关节切除组所产生的IL-1 β、TNF-α、TGF-β1、Smad2、Smad3、Col1和Col 3的mRNA表达量最多,其次为骨关节切除法,最后为肌肉切除法。（5）造模术后12w时假手术组的弹性-胶原纤维的比值为2.79,将其与实验一中数据比较,其退变程度类似于人未增厚的黄韧带（2.92）;肌肉切除组的弹性-胶原纤维的比值为2.65,退变程度仍接近人未增厚的黄韧带（2.92）;骨关节切除组的弹性-胶原纤维的比值为1.84,退变程度接近人轻度肥厚的黄韧带（1.66-2.23）;肌肉+骨关节切除组的弹性-胶原纤维的比值为1.19,退变程度与人中度肥厚的黄韧带相近（1.08-1.66）。结论:（1）建立了一种新的黄韧带肥厚大鼠模型,其退变程度可能类似于人类中度肥厚的黄韧带。（2）三种造模方法均能引起黄韧带退变与增厚,其程度依次为肌肉+骨关节切除法>骨关节切除法>肌肉切除法。（3）在大鼠模型中,黄韧带背侧层的增厚占比例最高,这可能是由于背侧层在屈曲位受到更大的应力导致的。说明机械应力可能是诱发或加速黄韧带增厚的重要因素。（4）腰椎屈曲范围的增加所引发的机械应力可导致黄韧带中炎性因子TNF-α、IL-1 β的高表达,并诱导TGF-β 1/Smads通路致使细胞外基质沉积而导致黄韧带肥厚。
宋扬扬[2]（2021）在《针刺提高脑梗死溶栓安全性的RhoA/ROCK信号通路机制及临床效应观察》文中指出目的:（1）在脑梗死模型大鼠中明确针刺提高脑梗死rt-PA静脉溶栓安全性的效应并探讨针刺调控RhoA/ROCK信号通路的机制。（2）在临床验证和观察针刺提高脑梗死患者rt-PA静脉溶栓安全性的效应,以期为广大脑梗死患者赢得更多的救治机会,为提高脑梗死溶栓安全性这一难题提供新思路、新方法。方法:一、实验研究:实验一、针刺提高脑梗死模型大鼠rt-PA静脉溶栓安全性的效应研究:将SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、4.5h溶栓组、针刺+4.5h溶栓组。采用改良自体血栓栓塞法制备脑梗死大鼠模型,4.5h溶栓组、针刺+4.5h溶栓组在脑梗死模型成功后的4.5h予rt-PA静脉溶栓;针刺+4.5h溶栓组在4.5h rt-PA静脉溶栓治疗后立刻予醒脑开窍针法进行针刺干预,留针30min,每日1次,7次为1疗程,治疗1个疗程;假手术组、模型组在脑梗死模型成功后的4.5h注射生理盐水;假手术组、模型组和4.5h溶栓组只给予相同的固定。观察针刺对各组大鼠神经行为学评分、脑梗死体积百分比、血红蛋白含量、EB含量和脑含水量百分比的影响。实验二、针刺提高脑梗死模型大鼠溶栓安全性的RhoA/ROCK信号通路机制研究:采采用和实验一相同的模型、分组及干预方法,用Western blot检测RhoA/ROCK信号通路指标（RhoA、ROCK2、MLC）及BBB结构相关蛋白（Claudin5、ZO-1、Occludin）的表达,用 Real-time PCR 检测 RhoA、ROCK2 mRNA表达,用免疫荧光检测ZO-1、Claudin5以及MMP9蛋白的表达。二、临床观察:将脑梗死予rt-PA静脉溶栓的80例患者随机分为观察组和对照组,每组40例。对照组仅予4.5h溶栓时间窗内rt-PA静脉溶栓治疗,观察组在rt-PA静脉溶栓之后立刻给予醒脑开窍针刺法治疗,留针30min,每日针刺1次,7次为1疗程,连续治疗2个疗程,两个疗程之间间隔1天。比较两组患者的总有效率,NIHSS评分,sICH发生率,不良事件发生率,sICH相关指标（TC、LDL-C、MPV、PLT、D-二聚体、纤维蛋白原、CRP）,依从性。结果:一、实验研究1.针刺提高脑梗死模型大鼠rt-PA静脉溶栓安全性的效应研究（1）神经行为学评分:与模型组相比,4.5h溶栓组和针刺+4.5h溶栓组神经行为学评分均降低（P<0.05）。与4.5h溶栓组相比,针刺+4.5h溶栓组神经行为学评分降低（P<0.01）。（2）脑梗死体积百分比:与模型组相比,4.5h溶栓组、针刺+4.5h溶栓组脑梗死体积百分比均减小（P<0.01）。与4.5h溶栓组相比,针刺+4.5h溶栓组梗死体积百分比减小（P<0.05）。（3）BBB通透性:与模型组相比,4.5h溶栓组EB含量升高（P<0.01）,针刺+4.5h溶栓组EB含量降低（P<0.01）。与4.5h溶栓组相比,针刺+4.5h溶栓组EB含量降低（P<0.01）。（4）脑含水量百分比:与模型组相比,4.5h溶栓组和针刺+4.5h溶栓组脑含水量百分比均降低（P<0.01）。与4.5h溶栓组相比,针刺+4.5h溶栓组脑含水量百分比降低（P<0.05）。（5）脑出血性转化:与模型组相比,4.5h溶栓组血红蛋白含量升高（P<0.01）,针刺+4.5h溶栓组血红蛋白含量差异无统计学意义（P>0.05）。与4.5h溶栓组相比,针刺+4.5h溶栓组血红蛋白含量降低（P<0.01）。2.针刺提高脑梗死模型大鼠溶栓安全性的RhoA/ROCK信号通路机制研究（1）RhoA/ROCK信号通路指标:与模型组相比,4.5h溶栓组RhoA、ROCK2蛋白及mRNA表达均升高（P<0.01）;针刺+4.5h溶栓组RhoA、ROCK2蛋白及mRNA表达均降低（P<0.01）。与4.5h溶栓组相比,针刺+4.5h溶栓组RhoA、ROCK2蛋白及mRNA表达均降低（P<0.01）。与模型组相比,4.5h溶栓组MLC蛋白表达升高（P<0.05）,针刺+4.5h溶栓组MLC蛋白表达降低（P<0.05）;与4.5h溶栓组相比,针刺+4.5h溶栓组MLC蛋白表达降低（P<0.01）。（2）MMP9蛋白表达:与模型组相比,4.5h溶栓组MMP9蛋白表达升高（P<0.05）,针刺+4.5h溶栓组MMP9蛋白表达降低（P<0.05）。与4.5h溶栓组相比,针刺+4.5h溶栓组MMP9蛋白表达降低（P<0.01）。（3）ZO-1、Claudin5、Occludin蛋白表达:与模型组相比,4.5h溶栓组ZO-1、Claudin5、Occludin 蛋白表达均降低（P<0.05,P<0.05,P<0.01）,针刺+4.5h溶栓组ZO-1、Claudin5、Occludin蛋白表达均升高（P<0.05,P<0.05,P<0.01）。与 4.5h 溶栓组相比,针刺+4.5h 溶栓组 ZO-1、Claudin5、Occludin蛋白表达均升高（P<0.01）。二、临床观察1.两组治疗后总有效率的比较观察组总有效率为95%,对照组为88.57%,观察组高于对照组（P<0.05）。2.两组治疗后NIHSS评分的比较治疗后观察组和对照组NIHSS评分均较本组治疗前降低（P<0.05）,且观察组低于对照组（P<0.05）。3.两组sICH发生率的比较观察组sICH发生率为0%,对照组为10%,观察组低于对照组（P<0.05）。4.两组不良事件发生率的比较观察组不良事件发生率为0%,对照组为12.5%,观察组低于对照组（P<0.05）。5.两组sICH相关指标的比较治疗后观察组和对照组LDL-C水平、MPV和CRP水平与本组治疗前相比均降低（P<0.05）。治疗后观察组D-二聚体水平低于本组治疗前（P<0.05）。治疗后观察组PLT与纤维蛋白原水平均高于对照组（.P<0.05）,观察组D-二聚体、CRP水平低于对照组（P<0.05）。6.两组依从性的比较两组均完成临床观察,依从性均为100%（P>0.05）。结论:1.针刺可改善脑梗死大鼠溶栓后神经功能,减小脑梗死体积,减轻脑水肿程度,减轻溶栓后BBB破坏的加重和减少HT的发生,达到提高溶栓疗效和安全性的效应。2.针刺可通过抑制RhoA/ROCK信号通路途径、有效保护BBB,以提高脑梗死大鼠rt-PA静脉溶栓安全性。3.针刺及时介入可提高脑梗死患者rt-PA静脉溶栓的疗效,降低sICH的发生率,提高溶栓安全性。为临床提高脑梗死溶栓安全性的难题提供了新的思路和方法。
吴慧[3]（2021）在《ClinproTMXT保护膜对牙釉质脱矿的预防和再矿化作用的体外研究》文中研究表明目的:玻璃离子长效保护膜(ClinproTMXT Varnish)是一种新一代的光固化树脂改性的玻璃离子聚合物,其辅助再矿化和增强牙釉质预防的作用效果尚未明确,值得通过模拟真实的临床状况进一步研究。本研究通过扫描电镜观察、显微硬度测定及钙磷元素分析,结合体外p H循环实验模型,比较ClinproTMXT Varnish与临床上常用的氟制剂多乐氟对于牙釉质脱矿的预防和再矿化的作用效果。方法:选择青岛大学附属青岛市市立医院12-21岁因正畸治疗减数拔除的双尖牙122颗,超声清洗,去除软组织,截除牙根,制成4 mm×4 mm×3 mm的釉质块,随机选取2个进行扫描电镜（SEM）观察作为健康对照,其余用于两部分实验。（1）釉质脱矿预防实验（实验A）:选择60个釉质块,随机分为3组（n=20）,A1组全部釉质块按照厂家提供的使用方法涂布ClinproTMXT Varnish（酸蚀15 s,去除酸蚀剂,气枪吹干,用小毛刷在开窗区均匀涂一薄层材料,光照固化25 s）;A2组为阳性对照组,用多乐氟反复涂擦1 min;A3组为阴性对照组,不做任何处理。预处理完成后,分别将三组样本静置于人工唾液中;（2）釉质再矿化实验（实验B）:另取60个釉质块,预先置于人工脱矿液中脱矿72 h,待脱矿完成后随机分为3组（B1、B2、B3）（n=20）,处理方法同釉质脱矿预防实验各组。前期处理后的实验A、B共六组样本模拟口腔环境,均经人工脱矿液和人工唾液交替p H循环处理30 d。后期采用SEM观察釉质表面超微结构,显微硬度计测定釉质表面显微硬度（SMH）变化,X能谱分析仪分析釉质表面钙磷元素含量。SPSS 26.0软件包对数据进行统计学分析。结果:（1）釉质脱矿预防实验:扫描电镜观察结果显示,健康对照的牙釉质表面平坦均匀,釉质脱矿预防实验后的ClinproTMXT Varnish组牙釉质表面呈现釉柱间质增宽,无明显蜂窝状结构,表层基本完整;阳性对照组牙釉质表面可见大量片状沉积物,蜂窝结构部分被覆盖,可见较清晰的釉柱间质形态;阴性对照组组釉质表面明显凸凹不平,可见少量不规则沉积物,表现为典型的釉质脱矿的蜂窝状改变。显微硬度测量结果显示组间分析可见,釉质脱矿预防实验后的ClinproTMXT Varnish组与多乐氟组间的显微硬度值无显着差异（p=0.071）,均高于阴性对照组组（p<0.05）;各组间实验前、后的显微硬度差值ΔSMH两两比较,A1组
高松坤[4]（2021）在《体感诱发电位特征分析在颈髓损伤与疾病中的应用：动物实验研究》文中指出颈脊髓损伤是一种致残率高、预后较差的疾病,随着经济发展,交通运输业、建筑业的持续发展和我国人口老龄化的加剧,颈脊髓损伤的发病率有逐年升高的趋势。体感诱发电位在临床上用来辅助脊髓疾病的诊断和术中脊髓功能监测。（1）目的:针对脊髓型颈椎病制作了大鼠颈髓慢性压迫模型分析,分析行为学、体感诱发电位和组织病理学随压迫时间的变化。方法:建立了大鼠C5节段慢性颈髓压迫模型,72只雌性SD大鼠随机平均分为实验组和对照组,在压迫1周、2周、4周、8周、12周、24周时行行为学评分、体感诱发电位、组织病理学评估。结果:在压迫1周时BBB评分最低,随着压迫时间逐渐升高,在压迫4周后达到平台期;SEP幅值在压迫1周时最低,随着压迫时间逐渐幅值逐渐恢复,压迫4周后逐渐稳定;脊髓前角运动神经元在压迫2周时最少,脊髓后索髓鞘蓝染强度在压迫1周、2周、12周、24周时均小于对照组,脊髓前索髓鞘蓝染强度在术后4周、8周、12周、24周时均小于对照组。结果显示本模型在建模成功后1周-2周神经损伤最严重,4周后神经功能逐渐稳定,4周-8周为稳定期,8周-24周大鼠自发性恢复达到平台期,基本恢复至正常水平。结论:本模型脊髓损伤在研究治疗时机的最佳观察窗口在压迫后4周内,研究脊髓损伤神经修复的最佳观察窗口在4-6周,大鼠损伤后6-8周成为研究干预方法的效果观察期,SEP可作为评价脊髓损伤程度的指标。（2）目的:在大鼠慢性颈髓模型上模拟不同减压时间行为学、SEP和组织病理学减压前后的变化。方法:在大鼠慢性颈髓压迫模型的基础上,通过取出压迫材料模拟手术减压,45只雌性SD大鼠随机分为减压组每组10只,不减压组和对照组各5只,分别在压迫1周、2周、3周、4周时进行模拟减压,在减压术后4周行行为学、体感诱发电位、组织病理学评估。结果:在压迫1周时减压,BBB评分较减压前改善,压迫2周时减压BBB评分较减压前无差别;在压迫1周时减压SEP幅值较减压前升高,在压迫2周时减压后相比压迫1周、对照组幅值降低;在压迫1周时减压脊髓后索髓鞘染色强度较减压前增大,在压迫2周时减压脊髓前角运动神经元较减压前减少,相比压迫1周时减压损伤侧前角运动神经元和后索髓鞘染色强度降低。结论:在压迫1周时减压可改善脊髓功能和脊髓病理损伤,在压迫2周时减压其效果较1周时减压差,提示早期减压可促进脊髓功能恢复和改善脊髓病理损伤。（3）目的:对比SEP时频分析在大鼠颈髓压迫、挫伤、牵拉损伤模型的时频成分（TFCs）分布特征。方法:分别建立大鼠颈髓C5节段压迫损伤、挫伤、牵拉损伤模型,每组各10只,对照组10只,在损伤后行正中神经SEP数据采集,采集的SEP信号进行时频分析,提取TFCs分布区域进行分析。结果:取最大的成分为主成分,挫伤组主成分在潜伏期相较对照组明显延长,挫伤组相较压迫损伤组主成分潜伏期延长,各组SEP主成分在频率分布上无明显差异,挫伤组主成分能量值相较对照组降低;其他成分为次成分,比较各组次成分PDF（概率密度函数）分布,标记概率密度最高的三个位置为S1、S2、S3,各组S1、S2、S3有着相似的位置分布,在S1挫伤组、牵拉损伤组潜伏期较对照组延长,3个损伤组频率均低于对照组,在S2挫伤组、牵拉损伤组潜伏期较对照组延长,各组频率相差不大,在S3压迫组、挫伤组潜伏期较对照组明显延长,3个损伤组频率均高于对照组,结论:压迫损伤组、挫伤组、牵拉损伤组的TFCs存在差异特征。综上,本模型脊髓损伤在研究治疗时机的最佳观察窗口在压迫后4周内,研究脊髓损伤神经修复的最佳观察窗口在4-6周,大鼠损伤后6-8周成为研究干预方法的效果观察期,早期减压可促进脊髓功能恢复和改善脊髓病理损伤,SEP可作为评价脊髓损伤程度的指标,不同损伤模式的SEP时频成分存在差异特征。
赵明[5]（2021）在《钙响应因子CaRF在小胶质细胞介导慢性低灌注性脑白质损伤中的作用与机制研究》文中进行了进一步梳理血管性认知功能障碍（vascular cognitive impairment,VCI）是引起痴呆的病因之一,目前发病率已仅次于阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）。随着2020年12月我国第七次人口普查登记完毕,我国人口总量已接近零增长,同时由于医疗条件的改善以及生活水平提高,人口呈现老龄化的趋势将在短时间内不可逆转,如何积极应对这一影响民生的问题则成为重中之重。由于VCI包含从轻度认知损害到痴呆的整个过程,因此了解疾病的病理发生机制和及时进行有效干预是预防VCI进展加重的有效手段。脑灌注不足是导致VCI和痴呆发生的重要因素,脑灌注减少与痴呆的严重程度具有显着的相关性,并且这种脑血流低灌注的降低与磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）T2序列下脑白质高信号（white matter hypertension,WMH）的严重性有关。这些白质变化的存在和严重程度,特别是额叶中的白质改变则是影响认知功能和痴呆症的重要决定因素,然而这种低灌注引起的白质损伤产生的病理机制仍未完全阐明,并且尚无有效药物来针对这一过程进行有效的干预。因此,深入研究这一病理过程的发病机制,并找到治疗慢性低灌注引起脑白质损伤的有效靶点将为治疗VCI和严重痴呆提供新的希望。小胶质细胞是广泛存在于大脑中的固有免疫细胞,一旦脑实质受到外界刺激或损伤,小胶质细胞在多种因素作用下被迅速活化,同其他免疫细胞一起参与调控神经炎症反应,修复受损的组织。在慢性脑血流低灌注的动物模型中,小胶质细胞在大脑低灌注早期即可出现增殖现象,从静息状态转变为激活状态且这种改变贯穿于慢性灌注不足的整个阶段。通过去除小胶质细胞或诱导小胶质细胞向抑炎表型转化能够促进胼胝体部位的再髓鞘化,增加白质部位的完整性,进而改善认知功能,这表明通过调控小胶质细胞的不同表型可以作为治疗低灌注性认知功能损害的一种有效手段。但引起小胶质细胞表型改变的具体原因仍不十分明确,需要了解并找到能够调控这小胶质细胞定向转化的关键靶点。钙响应因子（calcium response factor,Ca RF）是一种具有转录功能的钙反应蛋白,能够在神经元中发挥转录因子的作用,主要在脑中和性腺中表达,并且在人类和动物中具有高度的保守性。我们的前期研究表明Ca RF与同源盒基因（MSX3）一样在不同表型的小胶质细胞中具有差异表达的特点,能够在抑炎表型的小胶质细胞中出现高表达趋势,提示其也同样具有改变小胶质细胞活化状态的潜在可能性。那么,Ca RF是否能够通过小胶质细胞介导慢性低灌注脑白质损伤,目前尚未见相关的研究报道。本研究运用多种实验方法,验证了Ca RF在慢性低灌注脑白质损伤模型及WMH患者中通过调节小胶质细胞表型来影响脑白质损伤及认知功能的作用,为后期研究Ca RF在小胶质细胞表型调控的信号通路打下了坚实的基础,也为临床上VCI病变或痴呆条件下探索与设计理想的神经免疫疗法开拓了新的思路。研究取得的主要结果如下:一、构建慢性低灌注动物模型:双侧颈总动脉狭窄（bilateral common carotid artery stenosis,BCAS）及其对认知功能和脑白质的影响1、BCAS模型在吸入性麻醉手术过程中具有较好的术后存活率;2、前循环脑血流量（cerebral blood flow,CBF）在术后即刻（57.73%±20.06）和术后30天（82.05%±7.9）均显着低于术前CBF,呈慢性低灌注状态;3、BCAS模型存在学习能力下降和空间记忆力障碍的认知功能异常;4、BCAS小鼠胼胝体、纹状体均出现一定程度的脱髓鞘改变,且随时间延长髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein,MBP）和髓鞘相关糖蛋白（myelin associated glycoprotein,MAG）表达不断减少。二、钙响应因子Ca RF在BCAS模型中的表达模式1、Ca RF在BCAS胼胝体的小胶质细胞中表达减少。2、小胶质细胞在BCAS第7天表现出显着促炎表型的同时其中Ca RF表达显着减少,在第14天表现出抑炎性表型的同时Ca RF表达较前有所升高,在第30天则表现出单纯增殖状态,表型无明显改变。三、条件性敲除小胶质细胞中Ca RF加重BCAS的认知功能障碍和脑白质损伤1、条件性敲除CX3CR1细胞中Ca RF能够引起小鼠记忆再提取障碍、胼胝体髓鞘的丢失和MBP/MAG蛋白的减少,而这种损伤在BCAS中更加显着。2、髓鞘超微结构在慢性低灌注中受到损伤。3、缺少Ca RF导致胼胝体中小胶质细胞激活和促炎表型的转化。四、Ca RF干预的小胶质细胞能够保护少突胶质前体细胞（oligodendrocyte precursor cell,OPCs）和神经元的突触1、小胶质细胞中过表达Ca RF的条件上清具有促进OPCs分化成熟并且降低OPCs凋亡的作用。2、小胶质细胞中缺少Ca RF后导致了体内前额叶皮层（medial prefrontal cortex,m PFC）神经元突触蛋白的减少,而在BCAS的环境中进一步增加了突触的损伤。五、以Ca RF为靶点对小胶质细胞进行的药物筛选及地加瑞克对BCAS的保护作用1、利用FDA认证的1959个化合物干预原代培养的小胶质细胞,发现地加瑞克能够在RNA水平和蛋白水平共同升高小胶质细胞中的Ca RF。2、地加瑞克在BCAS中能够改善小鼠的认知功能,0.2mg的剂量组在学习和工作记忆过程中表现出较好的治疗效果。3、地加瑞克能够减轻慢性低灌注引起的脱髓鞘损伤、保护神经元轴突的完整性、恢复m PFC的突触蛋白表达和树突棘的数量。六、Ca RF在慢性低灌注WMH患者中具有的诊断价值1、慢性低灌注WMH组年龄、高血压、MOCA评分是WMH的独立危险因素。2、WMH患者外周血单核巨噬细胞中Ca RF水平显着下调,与TNF-α和IL-1β的表达呈现显着负相关性,而与ARG-1呈现显着正相关性。3、Ca RF与WMH等级具有显着的负相关性,Ca RF具有单独作为诊断和预测WMH的效能和优势。通过以上结果,本课题研究得出以下结论:1、Ca RF通过小胶质细胞参与了慢性低灌注脑白质损伤的过程,Ca RF的减少或丢失会促进小胶质细胞向炎性表型转化,造成胼胝体脱髓鞘和认知功能障碍。2、Ca RF具有调控小胶质细胞促进OPCs分化成熟和减少凋亡的能力,小胶质细胞中缺少Ca RF可引起小鼠m PFC神经元突触蛋白的减少,在BCAS的环境中更为显着。3、地加瑞克能够升高小胶质细胞中Ca RF的表达,保护BCAS胼胝体脱髓鞘损伤,增加m PFC神经元树突棘的数量,以及改善BCAS小鼠的认知功能。4、慢性低灌注WMH患者外周血单核巨噬细胞中Ca RF表达下降,且Ca RF具有单独作为预测和诊断WMH的效能和优势。
平少华[6]（2021）在《雷洛昔芬治疗前交叉韧带切断联合卵巢切除诱导的大鼠骨关节炎的实验研究》文中指出第一部分联合应用前交叉韧带切断术和卵巢切除术建立大鼠骨关节炎模型的实验研究目的:评价卵巢切除术（Ovariectomy,OVX）联合前交叉韧带切断术（Anterior cruciate ligament transection,ACLT）建立大鼠绝经后骨关节炎（Osteoarthritis,OA）模型的有效性,为绝经后骨关节炎的相关基础研究提供理想的动物模型。方法:1.48只12周龄雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠被随机分为4组:sham组,ACLT组、OVX组和ACLT+OVX组,每组12只,各组又分为病理学观察亚组和影像学分析亚组,每个亚组6只。ACLT组接受右膝ACLT手术,OVX组接受双侧OVX手术,ACLT+OVX组同时接受ACLT和OVX手术,sham组接受假手术操作。2.造模8周后,收集所有大鼠的右膝关节标本,对影像学分析亚组标本的胫骨平台软骨面进行宏观评分后置于75%乙醇中固定,然后应用微型CT（Micro-computed tomography,micro-CT）进行软骨下骨的检测分析。病理学观察亚组标本经固定、脱钙、包埋和切片后,采用甲苯胺蓝染色法进行染色,然后应用国际骨关节炎研究协会（Osteoarthritis Research Society International,OARSI）评分法进行评分以评价软骨退变情况。结果:1.宏观评分结果:sham组胫骨平台关节面光滑有光泽,关节囊结构正常。OVX组的关节面基本光滑,但色泽略暗。ACLT组的内侧胫骨平台软骨面表层可见软骨侵蚀,光泽度变差,呈浅灰白色,周围关节囊和软组织可见肥厚增生。然而,ACLT+OVX组的软骨损伤程度更为严重,侵蚀达软骨深层,残面呈灰白色,色泽差,表面可见溃疡面,周围关节囊组织增厚明显。宏观评分结果显示ACLT组的评分显着高于sham组（P<0.005）,但低于ACLT+OVX组（P<0.005）。OVX组和sham组的评分差异不明显（P>0.05）。2.甲苯胺蓝染色及OARSI评分结果:甲苯胺蓝染色结果显示,sham组的关节软骨表面光滑,结构层次清晰,软骨细胞排列规整,基质着色均匀,潮线结构清晰,半月板形态正常。OVX组软骨表面可观察到轻微不平整,软骨细胞排列基本正常,基质染色略浅于sham组,潮线结构较清晰,半月板形态正常。ACLT组可见软骨浅层侵蚀和深达中层的裂缝,周围软骨细胞数量减少,损伤区基质染色变浅,潮线结构欠清晰,半月板碎裂。然而,ACLT+OVX组可见更为广泛的、深达软骨深层的侵蚀和裂缝,局部可见软骨下骨板塌陷,软骨细胞显着减少,基质染色变浅,潮线不清晰,半月板崩解、移位。ACLT组的OARSI评分显着高于sham组（P<0.005）,但低于ACLT+OVX组（P<0.005）,OVX组和sham组的评分无显着差异（P>0.05）。3.Micro-CT分析结果:ACLT组的Tb.Th显着低于sham组,而SMI高于sham组（P值均<0.05）,OVX组的BMD、BV/TV和Tb.Th显着低于sham组,而SMI显着高于sham组（P值均<0.05）。然而,与其他三组相比,ACLT+OVX组的BMD、BV/TV和Tb.N明显降低,SMI和Tb.Sp显着增高（P值均<0.05）,而Tb.Th显着低于sham组（P<0.001）。第二部分雷洛昔芬对前交叉韧带切断联合卵巢切除诱导的大鼠骨关节炎防治作用的研究目的:本研究探讨雷洛昔芬（Raloxifene,RAL）对卵巢切除术（Ovariectomy,OVX）联合前交叉韧带切断术（Anterior cruciate ligament transection,ACLT）诱导的大鼠绝经后骨关节炎（Osteoarthritis,OA）的防治效果。方法:1.12周龄的雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠共60只,随机分为5组:sham组,ACLT组、OVX组、ACLT+OVX组和RAL组（ACLT+OVX+RAL）,每组12只,又分为病理学观察和影像学分析两个亚组,每个亚组6只。2.ACLT组接受右膝ACLT手术,OVX组接受双侧OVX手术,ACLT+OVX组和RAL组同时接受ACLT和OVX手术,sham组接受假手术操作。RAL组大鼠从造模72h后开始每天予以RAL灌胃治疗,剂量为6.25mg/kg,每周测量体重并调整药量,其他组给予等体积的蒸馏水作为安慰剂治疗,疗程12周。3.12周后,收集各组的右膝关节标本,对影像学分析亚组标本的胫骨软骨面进行宏观评分,然后于75%乙醇中固定,并应用微型CT（Micro-computed tomography,micro-CT）检测软骨下骨。病理学观察亚组标本经固定、脱钙、包埋和切片后以甲苯胺蓝染色液染色,应用国际骨关节炎研究协会（Osteoarthritis Research Society International,OARSI）评分法评价软骨损伤情况。采用免疫组织化学法测定软骨中的II型胶原（Type II collagen,Col-II）和聚集蛋白聚糖（Aggrecan,AGG）的积分光密度值（Integratal optical density,IOD）以评价表达水平。结果:1.宏观评分结果:sham组的软骨面光滑完整,光泽度好,关节囊与软骨界限清楚。OVX组的关节面基本光滑,但光泽较sham组差。ACLT组的内侧胫骨平台软骨面后部可见深达中层的侵蚀,伴有软骨褪色,光泽度明显变差,周围软组织增生肥厚。而ACLT+OVX组的软骨损伤更为严重,软骨失去光泽,可见大面积侵蚀达深层软骨,可见边缘软骨增生和后部软骨有全层缺损区,周围关节囊明显增生肥厚。RAL组的关节软骨侵蚀程度和光泽度明显好于ACLT+OVX组。ACLT组和ACLT+OVX组的宏观评分都显着地高于sham组（P<0.005）,但ACLT+OVX组高于ACLT组（P<0.005）,而RAL组评分显着低于ACLT+OVX组（P<0.005）。OVX组和sham组的评分未见显着性差异（P>0.05）。2.甲苯胺蓝染色及OARSI评分结果:sham组软骨表面光滑,结构清晰,软骨细胞排列整齐,基质着色均匀,潮线结构清晰,半月板形态正常。OVX组软骨表面可观察到轻微褶皱,软骨细胞排列基本正常,基质着色略浅,潮线较清晰。ACLT组可见软骨侵蚀达中层,并可见接近深层的裂缝,损伤区软骨细胞减少,基质染色明显变浅,潮线不清晰,半月板可见断裂。ACLT+OVX组可见软骨全层磨损,软骨下骨外露,其表层可见小缺损区域,内有纤维组织填充,半月板毁损。RAL组软骨侵蚀明显轻于ACLT+OVX组,潮线较清晰,而软骨下骨形态以及半月板损伤程度也明显好于ACLT+OVX组。ACLT组的OARSI评分均显着高于sham组（P<0.005）而明显低于ACLT+OVX组（P<0.005）,RAL组评分显着低于ACLT+OVX组（P<0.001）。OVX组和sham组的OARSI评分无显着差异（P>0.05）。3.免疫组化结果:ACLT组Col-II（P<0.005）和AGG（P<0.05）表达水平显着低于sham组,而ACLT+OVX组的Col-II（P<0.05）和AGG（P<0.05）表达水平显着低于ACLT组。RAL组Col-II（P<0.001）和AGG（P<0.05）水平显着高于ACLT+OVX组。OVX组的Col-II和AGG表达水平较sham组有降低趋势,但未见显着性差异（P>0.05）。4.Micro-CT分析结果:ACLT组的Tb.Th（P<0.05）显着低于sham组而SMI（P<0.005）明显高于sham组。与sham组相比,OVX组的BMD（P<0.01）、BV/TV（P<0.005）和Tb.Th（P<0.05）显着降低,而SMI（P<0.001）显着升高。然而,与ACLT组、OVX组和sham组相比较,ACLT+OVX组的BMD,BV/TV,Tb.Th和Tb.N均显着降低,而SMI和Tb.Sp显着增高（P值均<0.05）。RAL组的BMD（P<0.01）、BV/TV（P<0.001）和Tb.N（P<0.05）显着高于ACLT+OVX组,而SMI（P<0.001）和Tb.Sp（P<0.05）低于ACLT+OVX组。第三部分雷洛昔芬治疗前交叉韧带切断联合卵巢切除诱导的大鼠骨关节炎的作用机制研究目的:本研究对雷洛昔芬（Raloxifene,RAL）治疗卵巢切除术（Ovariectomy,OVX）联合前交叉韧带切断术（Anterior cruciate ligament transection,ACLT）诱导的大鼠骨关节炎（Osteoarthritis,OA）的效应机制进行探讨,为临床应用RAL治疗绝经后OA提供理论支持。方法:1.12周龄雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠30只,随机分为5组:sham组,ACLT组、OVX组、ACLT+OVX组和RAL组（ACLT+OVX+RAL）,每组6只。2.ACLT组的右膝予以ACLT手术,OVX组予以双侧OVX手术,ACLT+OVX组和RAL组同时予以ACLT和OVX手术,而sham组予以假手术操作。造模72h后,RAL组每天接受剂量为6.25mg/kg的RAL灌胃治疗,每周根据体重调整给药量,其他组以等体积的蒸馏水作为安慰剂,治疗12周后取材。3.收集所有大鼠的右膝关节,经过固定、脱钙、包埋和切片处理后,采用免疫组织化学染色分析软骨中X型胶原（Type X collagen,Col-X）、含凝血酶敏感素基序的整合素和金属蛋白酶5（A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs-5,ADAMTS-5）、基质金属蛋白酶13（Matrix metalloproteinase-13,MMP-13）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,caspase-3）、转化生长因子β1（Transforming growth factor-beta 1,TGF-β1）和软骨下骨中I型胶原（Type I collagen,Col-I）的积分光密度值（Integratal optical density,IOD）以评价表达水平。此外,采用抗酒石酸酸性磷酸酶（Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP）染色法对软骨下骨区域的破骨细胞数量进行分析。结果:1.免疫组化结果:ACLT组MMP-13、ADAMTS-5、COL-X、caspase-3和TGF-β1的表达水平均显着高于sham组（P值均<0.05）,但明显低于ACLT+OVX组（P值均<0.05）。而RAL组的上述因子表达水平均显着低于ACLT+OVX组（P值均<0.05）。OVX组的MMP-13和TGF-β1表达水平高于sham组（P值均<0.05）但低于ACLT+OVX组（P值均<0.05）,其他因子水平较sham组有升高趋势,但无统计学差异（P值均>0.05）。此外,OVX组的Col-I表达水平显着低于sham组（P<0.001）,但高于ACLT+OVX组（P<0.001）,而RAL组的Col-I表达水平显着高于ACLT+OVX组（P<0.001）。ACLT组的Col-I表达水平与sham组未见显着性差异（P>0.05）。2.TRAP染色结果:ACLT组和sham组软骨下骨的破骨细胞数量无差异（P>0.05）。OVX组的破骨细胞数量高于sham组（P<0.05）,但是低于ACLT+OVX组（P<0.001）。而与ACLT+OVX组相比,RAL组的破骨细胞数量显着减少（P<0.001）。结论:1.大鼠ACLT+OVX模型表现出极为严重的软骨退变、软骨下骨骨吸收和微结构损伤,具有类似人类绝经后骨质疏松性OA的病理变化特点,可做为绝经后OA相关研究的模型。2.RAL的早期干预具有减轻软骨和软骨下骨损伤的双重保护作用,从而有效地延缓ACLT联合OVX诱导的大鼠OA病程进展,提示RAL具有防治绝经后OA的临床应用潜力。3.RAL可能通过抑制TGF-β1和caspase-3的过度表达来延缓ACLT联合OVX诱导的大鼠OA软骨损伤,并通过抑制破骨细胞的活性来改善软骨下骨健康。
李田宽[7]（2020）在《协同功能微泡构建及其在非小细胞肺癌治疗中的应用》文中进行了进一步梳理研究背景:在世界范围内,肺癌的发病率和死亡率均是排在第一位,肺癌的主要类型是非小细胞肺癌（NSCLC）。以PD1/PD-L1等免疫检查点抑制剂（ICIs）目前已成为肺癌治疗领域最热门的抗肿瘤药物,ICIs通过降低肿瘤细胞免疫逃逸能力而治疗肿瘤。大量的临床试验结果显示免疫疗法已经成为与化疗、放疗等同样有效的治疗晚期非小细胞肺癌的手段,ICIs已被NCCN指南推荐为晚期肺癌的一线治疗方法。临床证据表明,化疗药物联合PD1/PD-L1检查点抑制剂的治疗效果优于单一药物治疗。然而,除了PD1/PD-L1检查点抑制剂的心脏毒性外,联合用药还会加重血液学毒性、肝毒性和神经毒性。因此,需要适当的给药系统来减少这两种药物的不良影响。本课题中,我们首先合成了在DTX的磷脂微泡,并在微泡表面连接anti PD-L1抗体,主动和被动靶向作用下,化疗药物在肿瘤细胞内内大量富集,促进肿瘤细胞凋亡并抑制跨越肿瘤细胞周期;在皮下瘤模型的基础上,我们建立了小鼠肺内肿瘤模型,验证了在低频超声的作用下,新型多功能微泡对小鼠肺部原位肿瘤的治疗效果。我们构建了肺癌不完全消融皮下瘤模型,将微泡用于微波不完全消融后的残余病灶的治疗,验证了此协同功能超声微泡对于微波不完全消融后残余病灶的控制效果和作用机制。第一部分协同功能微泡构建及其对肺癌细胞的作用目的:构建负载多西他赛（DTX）和anti-PD-L1 mAb的协同功能磷脂微泡（PDMs）并研究该微泡对肺癌细胞的杀伤作用。方法:通过薄膜水化法制备了负载多西他赛和anti-PD-L1 mAb的磷协同功能磷脂微泡。通过电镜和激光共聚焦显微镜对微泡的形态进行观察,通过马尔文激光粒度分析仪检测粒径和Zeta电位,通过高效液相色谱方法检测微泡中的多西他赛包封率及载药率。我们同时检测了多西他赛的释放曲线,并对微泡的在体外和体内的成像能力进行了检测。通过微泡溶血实验和小鼠生化指标评估了微泡的生物安全性。通过激光共聚焦显微镜观察并流式细胞仪检测了,负载anti-PD-L1 mAb微泡对肺癌细胞的摄取药物的影响。通过流式细胞术检测了鼠源的LLC细胞、人源的NCI-H460、NCI-1299和A549细胞表面的PD-L1的表达情况,通过CCK-8方法检测了微泡对几种细胞肺癌细胞的杀伤作用与PD-L1表达的关系。通过流式细胞术检测了微泡促进LLC肿瘤细胞凋亡的能力和细胞周期抑制能力。结果:负载多西他赛和anti-PD-L1 mAb的协同功能磷脂微泡具有较好的形态,粒径666.4±35.9 nm,包封率为57.34±2.61%,载药率为4.45±0.91%。超声作用下,微泡内的多西他赛释放速度明显提高,在微泡外连接anti-PD-L1 mAb对多西他赛的药物释放没有影响。激光共聚焦显微镜下显示荧光标记抗体的结合在微泡表面。超声成像下微泡有较好的增强效果,增强效果不受搭载药物和抗体的影响。体外实验证明微泡不会产生溶血效应,微泡对小鼠的生化指标无明显影响,对重要器官无明显损害。激光共聚焦显微镜和流式细胞术显示载有anti-PD-L1抗体的微泡能促进肺癌细胞对药物的吸收,低频超声击破微泡可以进一步增加肺癌细胞对药物的吸收。CCK-8实验显示负载了anti-PD-L1 mAb的微泡对肿瘤细胞增殖的抑制能力与肿瘤细胞表面PD-L1表达呈正相关,而低频超声辐照则增强了对肿瘤细胞的抑制作用。流式检测了微泡对肿瘤细胞凋亡的影响,结果显示超声辐照联合anti-PD-L1 mAb使肺癌细胞总凋亡比例最高,同时,anti-PD-L1 mAb的靶向作用和低频超声辐照可以增强多西他赛对肿瘤细胞周期的抑制作用。结论:通过薄膜水化法合成的负载多西他赛和anti-PD-L1 mAb的协同功能磷脂微泡具有较好的成像能力,在低频超声作用下可以迅速释放药物,具有较好的生物安全性。该微泡可以促进肺癌细胞对药物的吸收,负载多西他赛和anti-PD-L1 mAb的磷脂微泡对肿瘤细胞增殖有更强的抑制作用,在低频超声作用下能促进肺癌细胞的凋亡并能更好的抑制细胞周期。第二部分协同功能微泡（PDMs）对肺癌模型的治疗效果评价目的:建立小鼠肺癌皮下瘤模型及原位瘤模型,评估协同功能微泡对两种肺癌模型的治疗治疗效果。方法:建立小鼠肺癌皮下瘤模型,在微泡上搭载亲脂荧光探针DiR,分别标记多西他赛微泡（DMs）,载多西他赛和anti-PD-L1 mAb的协同功能微泡（PDMs）,对比不同方法下（游离的DiR、DiR-DMs或DiR-PDMs经尾静脉注射,DiR-PDMs联合低频超声）在肿瘤部位的富集情况,评估了协同功能磷脂微泡超声击破后在药物肿瘤部位的富集能力,并通过活体成像对富集DiR的重要器官的进行成像观察组织分布。采用对照组（注射PBS）、Free DTX（注射游离DTX溶液）、Free combo（注射游离DTX和anti-PD-L1 mAb）、DMs、PDMs,协同治疗组（PDMs+US）不同治疗方法对小鼠皮下瘤模型进行治疗,观察了小鼠的体重、肿瘤大小、生存期差异,对肿瘤标本进行TUNEL和免疫组化染色（CD31、Ki67）、检测了肿瘤样本中CD4+、CD8+T淋巴细胞的改变,通过western blot方法对肿瘤组织中Cleaved-caspase 3、Cleaved-caspase 8、Cleaved-caspase 9,通过ELISA方法对TNF-α,TGF-βand VEGF进行了检测。在DSA引导下经过肺穿刺建立了小鼠肺肺内肿瘤模型,采用上述不同方案进行治疗,通过CT进行随访,观察肿瘤体积、小鼠体重、生存期的变化。结果:与游离DiR和DiR-DMs相比,DiR-PDMs在体内和体外的肿瘤组织中均表现出增强的信号,而在低频超声下这种信号强度进一步增强。DiR-PDMs联合低频超声在第1小时即可是肿瘤内达到最大药物浓度,单纯DiR-PDMs注射药物浓度在第6小时达到最大值,游离DiR和DiR-DMs在肿瘤内的富集程度始终较低。在皮下瘤模型中,PDMs联合US照射组的存活率最高,且对肿瘤生长抑制效果最好,单独使用PDMs的治疗效果优于自由药物组合,排在第二位。协同治疗比化疗有更明显的疗效,DMs对肿瘤体积抑制和生存率的治疗效果略有改善,组间体重差异不明显。在肿瘤组织免疫组化染色中,联合治疗组中TUNEL凋亡率最高,CD31、Ki67最低。PDMs联合US照射组肿瘤样本中浸润的CD4+、CD8+T细胞比例和数量最多,凋亡通道蛋白cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 8、cleaved-caspase 9表达也最高。同时,PDMs联合US照射组有最高的TNF-α和最低的TGF-β、VEGF。通过CT评估,结果显示联合治疗组有最低的肿瘤生长速度,最长的生存期和最好的生存状态。结论:皮下瘤模型显示,协同功能磷脂微泡联合超声可以促进药物更快地在肿瘤富集并获得最高的药物浓度,产生最好的治疗效果。该治疗方案在,肺内肿瘤模型中也能起到同样的治疗效果。第三部分协同功能微泡（PDBMs）对肺癌不完全消融模型的治疗效果评价目的:建立小鼠肺癌不完全消融模型,评估协同功能微泡对肺癌不完全消融模型的治疗效果。方法:通过薄膜水化法制备了负载多西他赛、Bindarit和anti-PD-L1 mAb的磷协同功能磷脂微泡（PDBMs）。通过电镜、紫外光谱仪检测了微泡的形态、光谱等指标,采用高效液相色谱方法测试了微泡中的多西他赛、Bindarit的包封率和载药率。通过动物生化指标和重要脏器的HE染色切片评估了微泡的生物安全性。采用45°C 15min为不完全微波消融组（iMWA）,65°C 15min为完全消融组,通过流式细胞术检测了微波消融+PDBMs对肺癌细胞凋亡的影响。通过激光共聚焦显微镜和流式细胞术检测了微波消融+PDBMs对肺癌表达单核细胞趋化蛋白-1（CCL2、MCP-1）、钙网蛋白（CRT）、PD-L1的影响。将微波消融+PDBMs治疗后的肺癌细胞与DC细胞在Transwell小室内孵育,通过流式细胞术检测微波消融+PDBMs治疗后的肺癌细胞对小鼠骨髓来源DC细胞（BMDCs）活化的影响。将微波消融+PDBMs治疗后的肺癌细胞、BMDCs、T淋巴细胞共同孵育,通过流式细胞术检测Ki67和Granzyme B评价T淋巴细胞的增殖能力和杀伤能力。通过标本、活体肿瘤探索了构建不完全消融的微波参数。构建小鼠肺癌不完全消融模型并随机分为五组:对照组（Control）,不完全消融组（iMWA）,iMWA+DTX组,iMWA+Bindarit组,iMWA+PDBMs,随访肿瘤体积、计算生存时间并检测肺转移灶的数量。将组织标本通过TUNEL染色评价治疗不同方法对肿瘤凋亡的影响,通过Ki67染色评价肿瘤组织内的增殖能力。通过流式细胞术评价肿瘤组织内CD4+和CD8+T细胞比例,以及Treg细胞的比例。检测肿瘤组织内TGF-β、VEGF、IL-10细胞因子的水平。结果:我们成功合成了负载多西他赛、Bindarit和anti-PD-L1 mAb的磷协同功能微泡。电镜下微泡呈现规则的圆形,紫外光谱显示PDBMs的波形,HPLC检测结果显示PDBMs中DTX的包封率为35.56±5.86%,载药率为4.25±0.67%,Bindarit的包封率为37.85±6.75%,载药率为4.67±0.53%。经尾静脉注射PDBMs每七天一次,总共五次,生化指标随访均在正常范围内,心、肝、脾、肺、肾HE染色未见异常。完全消融组（c MWA）促进肺癌细胞凋亡的作用最强,iMWA、iMWA+DTX组、iMWA+Bindarit组和iMWA+PDBMs引起肺癌细胞总凋亡比例在40%50%之间。将干预后的各组通过共聚焦显微镜和流式细胞术检测CCL2表达,结果显示,c MWA组最弱,iMWA组较对照组CCL2表达上升,iMWA+DTX组与对照组无明显统计学差异,在Bindarit的作用下iMWA+Bindarit组和iMWA+PDBMs的CCL2表达下降。通过共聚焦和流式细胞术对治疗后肺癌细胞检测发现不完全消融后肺癌CRT表达上升,DTX、Bindarit和anti-PD-L1 mAb对CRT表达无明显影响,不完全消融、DTX、Bindarit对肺癌细胞表达PD-L1无明显影响。在对DC活化检测方面,iMWA+PDBMs组DC激活比例增加,同时DC的IL-12p70分泌也相应增加;在T淋巴细胞活化方面,iMWA+PDBMs相较其他组可以增强CD8+T细胞的增殖能力和Granzyme B的表达量。我们建立了不完全消融模型,五组治疗方案中,iMWA+PDBMs可以明显降低消融后肿瘤生长速度,延长生存期,减少转移结节数目。消融后肿瘤组织TUNEL染色和Ki67免疫组化结果显示,iMWA+PDBMs组肿瘤内比例最高,增殖能力最弱。对肿瘤组织进行流式细胞术检测结果显示,iMWA+PDBMs组CD4+和CD8+T细胞比例上升,其中CD8+T细胞上升更明显,Treg比例下降。对肿瘤内细胞因子检测显示,微波消融后TGF-β、VEGF上升,协同微泡治疗后肿瘤内TGF-β、VEGF、IL-10下降。结论:协同功能微泡PDBMs具有很好的生物安全性,协同功能微泡可以抑制肺癌细胞CCL2的表达,提高DC细胞和T淋巴细胞的活化比例,降低肺癌不完全消融灶的生长速率和肺转移灶数量并延长小鼠的生存期。协同功能微泡PDBMs对肺癌消融后的治疗具有很高的潜在应用价值。
纪伟伟[8]（2020）在《新型电极材料及其在锂离子储能器件的应用》文中研究指明锂离子储能器件中锂离子电容器、锂离子电池等各自都有独特的优势,从而成为化学电源的研究热点。电极材料是化学电源的重要组成部分,石墨烯作为锂离子电容器的正极材料和锂离子电池电极材料的添加剂,以及特殊结构的氧化物作为锂离子电池的负极材料受到广泛关注,具有广阔应用前景。本文的研究主体主要有硼掺杂的自支撑石墨烯锂离子电容器正极材料、硅-石墨烯复合锂离子电池负极材料、中空纳米Ti O2和碳氮共掺的核壳多孔纳米Ti O2的锂离子电池负极材料,以及石墨烯材料掺杂锂离子电池的负极材料,探索了这些新型电极材料以及其在锂离子储能器件的性能。首先研究了石墨烯基锂离子电容器,以石墨烯作为正极材料,由于其存在长期循环中容量不可逆的问题,因此掺杂修饰改性成为研究热点。基于等离子体增强化学气相沉积法（PECVD）,实现石墨烯电极的硼掺杂,常温下采用乙硼烷和氢气作为混合气体,在高频电场作用下辉光产生各种活性硼等离子体（BHx,x=0-3）,与具有丰富官能团和3D网络空间的石墨烯电极发生反应,优化工艺,最终得到常温下、辉光功率100W和辉光时间1min时制备的硼掺杂石墨烯电极具有最高的放电比容量140 m Ah g-1和超过99.6%的库伦效率,比原始石墨烯提高了28.9%。石墨烯和硅进行复合作为锂离子电池的负极,用于解决硅材料在循环中出现的体积变化问题。基于PECVD,以硅烷和氢气作为前驱体,辉光产生各种含硅的活性等离子体,与自支撑石墨烯电极反应,制备硅-石墨烯复合电极,最终得到硅量为12nm时,复合电极的首圈放电容量比原始电极提高了30%,且循环350圈时容量保持率仍有66.3%。氧化物负极材料在安全性的锂离子电池中具有重要的研究意义。基于模板法和空气中高温煅烧法,研究了中空结构纳米Ti O2作为锂离子电池的负极材料,得到中空多孔纳米Ti O2,具有丰富的比表面,为锂储存提供了大量的空间。优化工艺,最终利用PVP（K30）和PMMA微球模板在空气中经过600℃的煅烧,得到的中空纳米Ti O2具有最佳的电化学性能,放电比容量达到165.7 m Ah g-1和循环200圈容量保持率达到94.5%。核壳结构材料由于结构的高稳定性在锂离子电池中有重要研究价值。基于溶胶-凝胶、冷冻干燥和氩气中高温煅烧,得到核壳结构稳定的杂化复合材料C-N@MP-Ti O2,其以原位生成的氮掺杂碳为核心,周围均匀分布的纳米多孔Ti O2颗粒为外壳。优化工艺,得到了高比表面积318 m2 g-1和平均孔径6.8 nm的C-N@MP-Ti O2材料,电流密度为0.1 A g-1时,其初始放电容量达到360 m Ah g-1,循环350次后,容量保持率达97%;5 A g-1时,仍有173.6 m Ah g-1的容量,具有优异的倍率性能;此外,20 A g-1时的可逆容量可达172.2 m Ah g-1,且能长期循环100圈以上。利用（氧化）石墨烯作为添加剂加入到杂化复合材料C-N@MP-Ti O2的制备中,经过水热、高温煅烧,通过石墨烯的自组装形成连续导电网络,最终得到的复合材料在大电流密度5 A g-1时,放电比容量达到212 m Ahg-1,循环300圈容量保持率几乎达到100%。
黄慜璐[9]（2020）在《鼠自体组织神经导管修复坐骨神经缺损的实验研究》文中研究指明第一部分小鼠骨骼肌神经导管促进坐骨神经损伤修复的机制研究目的:骨骼肌神经导管可以促进小鼠坐骨神经损伤修复,然而作用机制尚不明确。本研究旨在探索其促进周围神经修复的机制以及观察导管管壁内活细胞对神经再生的正向促进作用。方法:体外实验部分:1)对骨骼肌神经导管的原材料——小鼠腹外斜肌薄片修剪后进行贴壁培养,4天后行免疫荧光染色分析从肌肉中迁移增殖的细胞种类;2)肌源性干细胞条件培养分化检测,从C57BL/6小鼠骨骼肌中分离培养肌源性干细胞,将肌源性干细胞与损伤后的小鼠坐骨神经匀浆上清液共培养,研究其分化趋势;3)对腹外斜肌薄片在体外进行辐照（细胞抑制）、脱细胞（细胞灭活）处理,观察肌源性细胞的增殖和迁移特性变化。体内实验,为探讨导管内肌源性细胞的作用,将实验动物分为未处理骨骼肌神经导管组、辐照神经导管组以及脱细胞神经导管组,每组16只C57BL/6小鼠。将腹外斜肌修剪为带有骨骼肌肌纤维的肌外膜薄片,卷曲后制备为中空的骨骼肌神经导管,第一组无特殊处理,第二组导管经辐照处理,第三组导管经脱细胞处理,采用3种7mm长度的导管桥接小鼠5 mm坐骨神经缺损。于术后8周、12周,采用免疫荧光染色和透射电镜对再生神经组织进行评价。利用小鼠足印分析、腓肠肌湿重检测和腓肠肌切片染色,评价神经功能及靶器官的恢复程度。另取C57BL/6小鼠,每组3只,于术后7天经心脏行埃文斯蓝-明胶血管灌注染色,评价各组再生神经组织中段血管早期重建情况。结果:1.将小鼠腹外斜肌薄片贴壁培养后,迁移增殖的细胞中包含成纤维细胞、肌源性细胞、干细胞。2.骨骼肌中的肌源性干细胞在体外损伤神经的微环境下,可以向雪旺细胞方向分化。3.脱氧胆酸钠和混合酶对腹外斜肌进行脱细胞处理可在有效破坏细胞核、破坏细胞活性以及抑制细胞迁移的同时,维持组织结构完整性;辐照可以有效抑制腹外斜肌内细胞的增殖与迁移。4.无特殊处理、辐照后或脱细胞后的腹外斜肌均可以制备为中空导管状结构作为神经导管。5.体内实验结果表明:神经导管桥接坐骨神经缺损术后8周和12周,骨骼肌神经导管组在大体外观、轴突髓鞘分布均匀程度、有髓神经纤维数目以及改善腓肠肌萎缩方面明显优于辐照组和脱细胞组。导管管壁内活性细胞可分化为雪旺样细胞参与辅助小鼠坐骨神经再生。6.神经导管桥接坐骨神经缺损术后7天骨骼肌神经导管管壁内血管已经出现再通,再生组织内血管密度显着高于辐照组、脱细胞组。但术后8周、12周中晚期时间点观察骨骼肌神经导管组、辐照组、脱细胞组的神经导管表面均存在密集的血管分布,再生组织中段横截面血管密度差异无统计学意义。结论:研究结果揭示了损伤后神经产生的微环境可能对肌源性干细胞起到诱导分化作用。骨骼肌神经导管修复小鼠坐骨神经缺损效果优于辐照后的骨骼肌神经导管以及脱细胞后的骨骼肌神经导管,表明骨骼肌内中的活性细胞参与并正向促进小鼠坐骨神经再生。骨骼肌神经导管的另一优势在于早期管壁内血管再通,以及内部血管的新生,为神经再生创造了良好的血运和环境。本研究为合理、高效地利用肌源性组织促进周围再生提供一种新方法,同时扩展了肌源性组织促进再生的相关机制。第二部分富血小板纤维蛋白膜神经导管对小鼠坐骨神经损伤修复的实验研究目的:富血小板纤维蛋白是新一代血小板纤维蛋白凝胶制品,具有良好的促进组织再生潜能。目前尚无研究将膜片状富血小板纤维蛋白制备成神经导管,用于周围神经损伤修复。本研究的目的是探讨富血小板纤维蛋白膜神经导管对周围神经修复的作用。方法:采集供体SD大鼠中5 ml血液进行离心,取中间凝胶状富血小板纤维蛋白,用金属压膜盒将凝胶状的纤维蛋白压制成致密薄膜状。膜片状富血小板纤维蛋白卷曲可制备成为中空神经导管。将24只BALB/c裸小鼠随机分为3组进行研究（每组8只）。在小鼠右侧坐骨神经制造5 mm神经离断性损伤后,接受富血小板纤维蛋白膜神经导管移植治疗组作为实验组,接受自体神经移植治疗组作为阳性对照组,接受聚氨酯导管治疗组作为阴性对照组。采用免疫荧光染色法和透射电镜对再生神经进行组织学分析;对坐骨神经靶器官腓肠肌测量湿重并对腓肠肌切片进行马松三色染色,观察腓肠肌萎缩恢复程度。结果:成功制备富血小板纤维蛋白膜神经导管,扫描电镜下显示膜状的富血小板纤维蛋白表面布满交错的纤维,形成网状结构。通过评价再生组织中段免疫组织切片中的有髓神经纤维数量、神经纤维直径、髓鞘厚度,以及靶器官腓肠肌的恢复程度,发现小鼠坐骨神经损伤修复术后12周,富血小板纤维蛋白膜神经导管组有髓神经纤维数量（p<0.0001）、神经纤维直径（p=0.0052）、髓鞘厚度（p=0.0038）、腓肠肌萎缩恢复程度均明显优于聚氨酯导管组（p<0.01）。富血小板纤维蛋白膜神经导管组的再生轴突数量较自体神经移植组少（p<0.05）,髓鞘厚度稍低（p=0.0129）,而神经纤维直径、腓肠肌恢复程度方面与金标准自体神经移植相似,差异无统计学意义。结论:研究显示膜片状富血小板纤维蛋白可以制备成中空神经导管,该神经导管桥接小鼠坐骨神经缺损后可以促进周围神经再生。有望今后应用于临床创伤修复中。
尧林鹏[10]（2020）在《伊文思蓝坏死亲和性的多模态影像学实验研究及其机制探讨》文中研究说明研究背景:坏死亲和性化合物是一类能够利用生物体内坏死组织暴露的大量靶点,特异性地与其结合并浓聚于坏死组织的物质。通过特异性靶向坏死组织,坏死亲和性化合物已被用于坏死相关疾病的诊断和检测,如心肌梗死范围的精确定量、组织活性的评价、肿瘤治疗后的疗效评估等。此外,坏死亲和性化合物标记上放射性核素在实体肿瘤的治疗方面也展现出巨大的潜力。众多坏死亲和性化合物中,金丝桃素及其放射性标记物的研究最为广泛。然而,由于金丝桃素水溶性差、易自聚以及光毒性等缺陷,一定程度上限制了其发展和临床转化。因此,寻找一种药代动力学分布好、生物安全性高的坏死亲和性化合物成为新的研究方向。伊文思蓝（Evans Blue,EB）,是一种人工合成的双偶氮类染料,其作为生物染料和诊断剂已有很悠久的历史。由于其白蛋白结合特性及荧光特性,EB已被广泛应用于生物医学中,包括孕妇和婴幼儿的血容量测定。近期有研究发现EB和油红-碘油溶液（RIO）的多重染色可用于风险心肌中梗死心肌的识别,表明EB可能具有坏死亲和特性。此外,由于EB的结构易折断和易螯合,基于EB和EB衍生物合成的大量示踪剂已应用于临床当中。因此,探究EB的坏死亲和特性及其靶向坏死的机制有利于开发EB的新用途,EB的生物安全性及其多模态成像表明其在临床转化方面具有巨大的潜能。研究目的:本文拟从活体、组织和细胞层面探究EB及放射性标记的EB示踪剂（131I-EB）的坏死亲和特性,并阐述其靶向坏死的机制。研究方法:1.通过建立大鼠再灌注部分肝梗死模型、兔VX2肿瘤自发性坏死模型和斑马鱼肌肉坏死模型等多种动物坏死模型,静脉注射EB溶液后荧光成像探究EB靶向坏死组织的分布情况。2.采用Iodogen氧化法制备131I-EB,利用SPECT成像、荧光成像、伽马计数和放射自显影等技术在大鼠再灌注部分肝梗死模型上探究其生物学分布和坏死亲和特性。3.诱导组织和细胞坏死,通过孵育结合血清白蛋白的EB溶液后荧光成像,从组织层面和细胞层面探究EB的坏死亲和特性。4.通过坏死细胞孵育EB溶液后共聚焦拍照,探究EB的细胞内定位;利用光谱学实验研究EB与DNA或蛋白质之间的相互作用;通过蛋白电泳和质谱分析探究EB与靶向蛋白的结合情况。研究结果:1.成功建立大鼠再灌注部分肝梗死模型、兔VX2肿瘤自发性坏死模型和斑马鱼肌肉坏死模型等多种动物坏死模型,静脉注射EB溶液24 h后,EB能够选择性积聚在坏死的肝脏组织、坏死的肿瘤组织和坏死的肌纤维中,与正常组织的摄取差异具有统计学意义。2.采用Iodogen氧化法成功制备131I-EB,标记率高达97%。SPECT成像可见坏死肝脏区域放射性摄取逐渐浓聚,伽马计数、放射自显影和体外荧光成像均显示坏死肝脏和正常肝脏之间131I-EB的摄取差异具有统计学意义。3.组织和细胞孵育EB溶液后荧光成像显示坏死肝脏组织可见红色荧光,正常肝脏组织未见红色荧光;坏死细胞显示出强烈的红色荧光,存活细胞几乎未见红色荧光。4.共聚焦拍照显示红色荧光主要位于坏死细胞的细胞核内,核仁最强;光谱学实验显示EB不会与DNA结合,而与蛋白质发生相互作用;蛋白电泳和质谱分析显示坏死组织和坏死细胞中EB结合的蛋白质主要是白蛋白。结论:1.建立大鼠再灌注部分肝梗死模型、兔VX2肿瘤自发性坏死模型和斑马鱼肌肉坏死模型等多种动物坏死模型可作为坏死亲和性化合物研究的基础平台。2.本研究从活体、组织和细胞三个层面均证实了EB具有坏死亲和特性,靶向坏死的机制与坏死细胞内暴露的DNA无关,与暴露的大量蛋白质结合相关。3.Iodogen氧化法制备131I-EB的标记过程简单有效,标记率高。研究表明131I-EB同EB一样具有坏死亲和特性,作为一种多模态的坏死靶向探针在坏死靶向成像和实体肿瘤治疗方面具有广阔前景。
二、电动式影像切片机的应用研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、电动式影像切片机的应用研究（论文提纲范文）
（1）基于“阳化气，阴成形”理论研究TGF-β1/Smads影响黄韧带肥厚的机制及模型的建立（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 黄韧带肥厚的机制及动物模型建立的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 TGF-β1/Smads信号通路与纤维化 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 基于“阳化气,阴成形”理论研究IL-1β、TNF-α和TGF-β1/Smads在LFH中的表达及相关性 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 标本收集 |
| 1.2 纳入与排除标准 |
| 1.3 影像学测量 |
| 1.4 主要器械、设备、试剂等 |
| 1.5 手术方式 |
| 1.6 标本的取材、运输等标准操作规程 |
| 1.7 HE染色与组织形态学观察 |
| 1.8 Masson染色与纤维化观察 |
| 1.9 免疫组化法检测两组黄初带IL-lp、TNF-α、TGF-β1/Smads (TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7)、Col1和Col3蛋白的定位、半定量表达 |
| 1.10 实时焚光聚合酶链式反应（Real-Time PCR)检测IL-1β、TNF-α、TGF-β1/Smads (TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7)、Col1、Col3&mRNA表达 |
| 1.11 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般资料 |
| 2.2 HE染色结果 |
| 2.3 Masson染色结果 |
| 2.4 免疫组化结果 |
| 2.5 Real-Time PCR结果 |
| 2.6 DLSS组内黄韧带厚度和各层纤维化分级的相关性分析 |
| 2.7 DLSS组内黄韧带厚度和各层弹性-胶原纤维比的相关性分析 |
| 2.8 DLSS组内黄韧带厚度和各层mRNA表达的相关性分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 炎症与纤维化是黄韧带肥厚的主要病理机制 |
| 3.2 黄韧带背侧层是退变的起点 |
| 3.3 基于“阳化气,阴成形”理论探讨黄韧带“炎症-纤维化”病理过程 |
| 3.4 基于“阳化气,阴成形”理论探讨DLSS的中医药治疗 |
| 3.5 其他 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 实验二 基于三种造模方法诱导大鼠黄韧带肥厚动物模型的建立与评价 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要器械、设备、试剂等 |
| 1.3 实验动物的分组与取材 |
| 1.4 实验动物的造模 |
| 1.5 影像学测量 |
| 1.6 HE染色与大鼠黄韧带厚度的测量 |
| 1.7 Masson染色与大鼠黄韧带纤维化观察 |
| 1.8 免疫组化法检测各组黄初带IL-1β、TNF-α、TGF-β1/Smads (TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7)、Col1、Col3蛋白的定位、半定量表达 |
| 1.9 免疫印迹法定性、半定量分析IL-1β、TNF-α、TGF-β1和Coll蛋白在各组黄韧带内表达 |
| 1.10 Real-Time PCR检测 IL-1β、TNF-α、TGF-β1/Smads (TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7)、Col1、Col3的mRNA表达 |
| 1.11 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 HE染色与大鼠黄韧带厚度的结果 |
| 2.2 Masson染色与大鼠黄韧带纤维化的结果 |
| 2.3 影像学测量结果 |
| 2.4 免疫组化结果 |
| 2.5 免疫印迹结果 |
| 2.6 Real-Time PCR结果 |
| 2.7 大鼠黄韧带与人增厚黄韧带的比较 |
| 2.8 模型成功率 |
| 3 讨论 |
| 3.1 大鼠黄韧带肥厚模型的建立方法 |
| 3.2 大鼠黄韧带肥厚的病理表现 |
| 3.3 机械应力是诱发或加速黄韧带肥厚的重要因素 |
| 3.4 基于“阳化气,阴成形”理论探讨大鼠黄韧带增厚模型的建立 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 不足与展望 |
| 创新点 |
| 致谢 |
| 附件 |
（2）针刺提高脑梗死溶栓安全性的RhoA/ROCK信号通路机制及临床效应观察（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词对照表(按在文中出现的先后排序) |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1.脑梗死流行病学资料 |
| 2.现代医学对脑梗死发病原因及机制的认识 |
| 3.中医对脑梗死(中风)病名及病因病机的认识 |
| 3.1 中风病名的历史沿革 |
| 3.2 病因病机 |
| 4.脑梗死治疗 |
| 4.1 现代医学治疗 |
| 4.2 中医治疗 |
| 5.针刺治疗脑梗死机制 |
| 6.本研究科学假说形成的理论依据 |
| 6.1 脑梗死溶栓疗法的优势及存在的并发症 |
| 6.2 脑梗死后BBB的破坏是溶栓并发症发生的病理基础 |
| 6.3 有效防控溶栓后BBB破坏的加重是减少溶栓并发症发生的前提 |
| 6.4 调控RhoA/ROCK信号通路是减轻溶栓后BBB损伤加重的关键路径 |
| 6.5 针刺是减轻溶栓后BBB损伤的有效途径 |
| 6.6 “针刺抑制RhoA/ROCK信号通路减少脑梗死rt-PA静脉溶栓所致的HT发生”科学假说的提出 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一、针刺提高脑梗死模型大鼠溶栓安全性的效应研究 |
| 1.材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要仪器及设备 |
| 1.3 主要试剂 |
| 2.方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 改良的大鼠自体血栓栓塞型模型制备 |
| 2.3 激光多普勒血流仪监测脑血流量 |
| 2.4 干预方法 |
| 2.5 神经行为学评分 |
| 2.6 脑梗死体积测定 |
| 2.7 BBB通透性的测定 |
| 2.8 脑含水量的测定 |
| 2.9 脑出血性转化的测定 |
| 2.10 统计学方法 |
| 2.11 技术路线图 |
| 3.结果 |
| 3.1 模型制备过程中的脑血流量变化 |
| 3.2 各组大鼠神经行为学评分的比较 |
| 3.3 各组大鼠脑梗死体积的比较 |
| 3.4 各组大鼠BBB通透性的比较 |
| 3.5 各组大鼠脑含水量的比较 |
| 3.6 各组大鼠脑出血性转化的比较 |
| 4.小结 |
| 实验二、针刺提高脑梗死模型大鼠溶栓安全性的RhoA/ROCK信号通路机制研究 |
| 1.材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要仪器及设备 |
| 1.3 主要试剂 |
| 2.方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 改良的大鼠自体血栓栓塞型模型制备 |
| 2.3 激光多普勒血流仪监测脑血流量 |
| 2.4 干预方法 |
| 2.5 Western Blot检测 |
| 2.6 Real-time PCR检测 |
| 2.7 免疫荧光检测 |
| 2.8 统计学方法 |
| 2.9 技术路线图 |
| 3.结果 |
| 3.1 各组大鼠RhoA蛋白和mRNA表达的比较 |
| 3.2 各组大鼠ROCK2蛋白和mRNA表达的比较 |
| 3.3 各组大鼠MLC蛋白表达的比较 |
| 3.4 各组大鼠MMP9蛋白表达的比较 |
| 3.5 各组大鼠ZO-1蛋白表达的比较 |
| 3.6 各组大鼠Claudin5蛋白表达的比较 |
| 3.7 各组大鼠Occludin蛋白表达的比较 |
| 4.小结 |
| 第三部分 临床研究 针刺提高脑梗死患者溶栓安全性的临床效应观察 |
| 1 临床资料 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 剔除标准 |
| 1.6 中止标准 |
| 2.方法 |
| 2.1 样本量估算 |
| 2.2 病例分组 |
| 2.3 治疗方法 |
| 2.4 观察指标 |
| 2.5 统计学处理 |
| 2.6 技术路线图 |
| 3.结果 |
| 3.1 基线比较 |
| 3.2 治疗后两组患者临床疗效比较 |
| 3.3 治疗前后NIHSS评分比较 |
| 3.4 治疗后sICH发生率比较 |
| 3.5 治疗后不良事件发生率比较 |
| 3.6 治疗前后sICH相关指标 |
| 3.7 依从性比较 |
| 4.小结 |
| 第四部分 讨论 |
| 1.脑梗死模型及评价指标选择依据 |
| 1.1 脑梗死模型选择 |
| 1.2 脑梗死模型评价指标选择 |
| 2.溶栓时间的选择依据 |
| 3.sICH观察时机的选择 |
| 4.治疗手段选择的思考 |
| 4.1 针刺联合溶栓药物的选择依据 |
| 4.2 醒脑开窍针刺法选择依据 |
| 5.RhoA/ROCK信号通路与脑梗死rt-PA静脉溶栓安全性的关系 |
| 6.针刺提高脑梗死模型大鼠溶栓安全性的效应分析 |
| 7.针刺提高脑梗死模型大鼠溶栓安全性的RhoA/ROCK信号通路机制研究 |
| 8.针刺提高脑梗死患者溶栓安全性临床效应的分析 |
| 9.本研究的创新性 |
| 10.不足与展望 |
| 10.1 不足 |
| 10.2 展望 |
| 第五部分 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 NIHSS评分量表 |
| 攻读博士学位期间研究成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（3）ClinproTMXT保护膜对牙釉质脱矿的预防和再矿化作用的体外研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 1.正畸后白斑的介绍 |
| 2.正畸后白斑的检测方法 |
| 3.正畸后白斑的预防和治疗 |
| 第一部分 Clinpro~(TM)XT Varnish对釉质脱矿的预防作用的体外研究 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验材料及仪器 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 釉质块制备 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 数据处理 |
| 2.结果 |
| 2.1 扫描电镜观察 |
| 2.2 釉质表面显微硬度结果 |
| 2.3 釉质表面钙磷比分析 |
| 3.讨论 |
| 3.1 人工唾液在釉质脱矿研究中的作用 |
| 3.2 体外p H循环模型的实验设计 |
| 3.3 SEM形貌及钙磷比的分析 |
| 3.4 显微硬度的结果分析 |
| 4.小结 |
| 第二部分 Clinpro~(TM)XT Varnish对釉质脱矿再矿化作用的体外研究 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验材料及仪器 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 釉质块制备 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 数据处理 |
| 2.结果 |
| 2.1 扫描电镜观察 |
| 2.2 釉质表面显微硬度结果 |
| 2.3 釉质表面钙磷比分析 |
| 3.讨论 |
| 3.1 SEM形貌及钙磷比的分析 |
| 3.2 显微硬度的结果分析 |
| 3.3 釉质脱矿再矿化实验与釉质脱矿预防实验的结果分析 |
| 3.4 玻璃离子保护膜在牙釉质脱矿的预防和再矿化作用的优越性 |
| 3.5 不足和展望 |
| 4.小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 综述 正畸后白斑的研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 病例报告 |
| 1.丝圈式间隙保持器 |
| 2.乳牙的活髓切断术 |
| 3.乳牙的活髓切断术 |
| 4.牙根未发育完成的根尖周炎 |
| 5.乳磨牙牙髓炎 |
| 6.乳前牙透明冠 |
| 7.根尖周炎 |
| 讨论1 |
| 参考文献 |
| 8.前牙瓷贴面修复 |
| 9.嵌体修复 |
| 10.阻生齿拔除 |
| 11.前牙外伤 |
| 12.乳牙预成冠修复 |
| 13.树脂充填 |
| 14.前牙美学修复 |
| 15.浅龋 |
| 16.楔状缺损 |
| 17.前方牵引矫治前牙反 |
| 讨论2 |
| 参考文献 |
| 18.慢性牙周炎 |
| 19.固定矫治 |
| 20.固定矫治 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
（4）体感诱发电位特征分析在颈髓损伤与疾病中的应用：动物实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写对照一览表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1.颈髓损伤 |
| 1.1.1.脊髓型颈椎病 |
| 1.2.颈脊髓损伤动物模型 |
| 1.2.1.颈脊髓挫伤模型 |
| 1.2.2.颈脊髓压迫损伤模型 |
| 1.2.3.颈脊髓牵拉损伤模型 |
| 1.2.4.颈脊髓切割损伤模型 |
| 1.2.5.模型动物的选择 |
| 1.2.6.模型动物的行为学评估 |
| 1.3.脊髓损伤的体感诱发电位评价 |
| 1.3.1.体感诱发电位 |
| 1.3.2.体感诱发电位的波形 |
| 1.3.3.体感诱发电位成分的起源 |
| 1.3.4.体感诱发电位的时频分析 |
| 1.4.本课题的研究内容 |
| 第2章 大鼠慢性颈髓压迫损伤模型的建立及病理评估 |
| 2.1.引言 |
| 2.2.材料与方法 |
| 2.2.1.实验动物 |
| 2.2.2.实验材料与仪器 |
| 2.2.3.压迫材料的制备 |
| 2.2.4.实验分组 |
| 2.2.5.大鼠的麻醉 |
| 2.2.6.大鼠慢性颈髓压迫损伤模型的建立 |
| 2.2.7.大鼠行为学评分 |
| 2.2.8.体感诱发电位检测 |
| 2.2.9.脊髓取材与固定 |
| 2.2.10.脊髓切片组织学染色 |
| 2.2.11.图像分析及统计学处理 |
| 2.3.实验结果 |
| 2.3.1.术后一般情况 |
| 2.3.2.大鼠行为学评分结果 |
| 2.3.3.大鼠损伤侧SEP潜伏期和幅值分析 |
| 2.3.4.大鼠组织学结果 |
| 2.4.讨论 |
| 2.4.1.颈髓压迫损伤动物模型的研究现状 |
| 2.4.2.本研究动物模型的研究方法 |
| 2.4.3.压迫时间与BBB评分的变化 |
| 2.4.4.压迫时间与SEP潜伏期和波幅的变化 |
| 2.4.5.压迫时间与组织病理学的变化 |
| 2.4.6.本研究动物模型的不足 |
| 2.5.本章小结 |
| 第3章 大鼠慢性颈髓压迫损伤模型模拟在不同减压时间点的疗效研究 |
| 3.1.前言 |
| 3.2.对象与方法 |
| 3.2.1.实验对象 |
| 3.2.2.实验仪器与试剂 |
| 3.2.3.实验分组与流程 |
| 3.2.4.大鼠的麻醉 |
| 3.2.5.造模手术 |
| 3.2.6.减压手术 |
| 3.2.7 .大鼠行为学评分 |
| 3.2.8.体感诱发电位检测 |
| 3.2.9.脊髓取材及固定 |
| 3.2.10.脊髓切片组织学染色 |
| 3.2.11.图像分析及统计学处理 |
| 3.3.实验结果 |
| 3.3.1.术后一般情况 |
| 3.3.2.大鼠行为学评分结果 |
| 3.3.3.大鼠损伤侧SEP潜伏期和幅值分析 |
| 3.3.4.大鼠组织学结果 |
| 3.4 .讨论 |
| 3.4.1.不同减压时间点BBB评分的变化 |
| 3.4.2.不同减压时间点SEP潜伏期和幅值的变化 |
| 3.4.3.不同减压时间点组织病理学的变化 |
| 3.4.4.脊髓型颈椎病的术后预后因素 |
| 3.4.5.本研究的不足 |
| 3.5.本章小结 |
| 第4章 大鼠颈髓不同模式损伤的SEP特征分析 |
| 4.1.前言 |
| 4.2.对象与方法 |
| 4.2.1.实验对象 |
| 4.2.2.实验试剂及器械 |
| 4.2.3.大鼠的麻醉 |
| 4.2.4.大鼠压迫损伤模型的建立 |
| 4.2.5.大鼠挫伤模型的建立 |
| 4.2.6.大鼠牵拉损伤模型的建立 |
| 4.2.7.SEP数据采集 |
| 4.2.8.SEP时频分析 |
| 4.3.实验结果 |
| 4.3.1.主成分分析 |
| 4.3.2.次成分分析 |
| 4.4.讨论 |
| 4.5.本章小结 |
| 第5章 全文总结与展望 |
| 5.1.主要研究工作总结 |
| 5.2.本研究的主要创新点 |
| 5.3.展望 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的论文和己授权专利 |
| 致谢 |
（5）钙响应因子CaRF在小胶质细胞介导慢性低灌注性脑白质损伤中的作用与机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 慢性低灌注模型BCAS及其对认知功能和脑白质的影响 |
| 一、前言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第二部分 钙响应因子CaRF在 BCAS模型中对脑白质病理发生的作用 |
| 一、前言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第三部分 条件性敲除小胶质细胞中CaRF对 BCAS的作用 |
| 一、前言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第四部分 CaRF干预的小胶质细胞对少突胶质前体细胞和神经元的影响 |
| 一、前言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第五部分 以CaRF为靶点进行的小分子药物筛选及其对BCAS的作用 |
| 一、前言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第六部分 CaRF分子在慢性低灌注脑白质高信号患者中的作用 |
| 一、前言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 参考文献 |
| 附录 FDA认证小分子化合物库 |
| 综述 脑白质高信号在诊断血管性认知功能障碍中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表论文和参加科研工作情况说明 |
| 致谢 |
（6）雷洛昔芬治疗前交叉韧带切断联合卵巢切除诱导的大鼠骨关节炎的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 联合应用前交叉韧带切断术和卵巢切除术建立大鼠骨关节炎模型的实验研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 雷洛昔芬对前交叉韧带切断联合卵巢切除诱导的大鼠骨关节炎防治作用的研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 雷洛昔芬治疗前交叉韧带切断联合卵巢切除诱导的大鼠骨关节炎的作用机制研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 雌激素及其替代药物治疗绝经后骨关节炎的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）协同功能微泡构建及其在非小细胞肺癌治疗中的应用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 主要英文缩略词注释表 |
| 绪论 |
| 文献综述一 具有免疫治疗作用的协同功能微泡研究进展 |
| 文献综述二 微波消融在肺癌的治疗中的研究进展 |
| 第一部分 协同功能微泡构建及其对非小细胞肺癌细胞的作用及其机制 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 实验材料 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 实验结果 |
| 1.5 讨论 |
| 第二部分 载多西他赛和anti-PD-L1 mAb的协同功能微泡在超声下协同治疗非小细胞肺癌 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.5 讨论 |
| 第三部分 载多西他赛、Bindarit和anti-PD-L1 mAb的协同功能微泡治疗肺癌微波消融残余灶 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.5 讨论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（8）新型电极材料及其在锂离子储能器件的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 锂离子电容器的概述 |
| 1.2.1 锂离子电容器的原理 |
| 1.2.2 锂离子电容器的正极材料 |
| 1.2.3 锂离子电容器的负极材料 |
| 1.2.4 锂离子电容器的电解质 |
| 1.3 锂离子电池的概述 |
| 1.3.1 锂离子电池的原理 |
| 1.3.2 锂离子电池的正极材料 |
| 1.3.3 锂离子电池的负极材料 |
| 1.3.4 锂离子电池的挑战 |
| 1.4 纳米多孔氧化物负极材料的研究进展 |
| 1.5 材料的表征与储能器件的测试 |
| 1.5.1 材料的表征 |
| 1.5.2 储能器件的测试 |
| 1.6 论文的选题依据及主要研究内容 |
| 1.6.1 论文的选题依据 |
| 1.6.2 论文的主要研究内容 |
| 第2章 柔性自支撑硼掺杂石墨烯电极的制备及应用 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 实验原料 |
| 2.2.2 仪器设备 |
| 2.3 硼掺杂石墨烯电极与器件的制备 |
| 2.3.1 自支撑石墨烯电极的制备 |
| 2.3.2 硼掺杂石墨烯电极的制备 |
| 2.3.3 锂离子电容器的制备 |
| 2.4 材料的表征与器件的测试 |
| 2.4.1 材料的表征 |
| 2.4.2 锂离子电容器的电化学性能测试 |
| 2.5 硼掺杂石墨烯电极的制备原理 |
| 2.6 辉光时间对电极和器件性能的影响 |
| 2.6.1 宏观图片及SEM的表征 |
| 2.6.2 EDS的表征 |
| 2.6.3 XPS的表征 |
| 2.6.4 接触角的表征 |
| 2.6.5 电化学性能的表征 |
| 2.7 衬底温度对电极和器件性能的影响 |
| 2.7.1 SEM的表征 |
| 2.7.2 XPS的表征 |
| 2.7.3 接触角的表征 |
| 2.7.4 EDS及 Raman的表征 |
| 2.7.5 电化学性能的表征 |
| 2.8 辉光功率对电极和器件性能的影响 |
| 2.8.1 XRD的表征 |
| 2.8.2 SEM的表征 |
| 2.8.3 EDS的表征 |
| 2.8.4 Raman的表征 |
| 2.8.5 XPS的表征 |
| 2.8.6 接触角的表征 |
| 2.8.7 电化学性能的表征 |
| 2.9 结论 |
| 第3章 柔性自支撑硅-石墨烯复合电极的制备及应用 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 实验原料 |
| 3.2.2 仪器设备 |
| 3.3 电极与器件的制备 |
| 3.3.1 自支撑硅-石墨烯复合电极的制备 |
| 3.3.2 锂离子电池的制备 |
| 3.4 材料的表征与器件的测试 |
| 3.4.1 材料的表征 |
| 3.4.2 器件的测试 |
| 3.5 结果与讨论 |
| 3.5.1 自支撑硅-石墨烯复合电极的制备原理 |
| 3.5.2 材料的表征 |
| 3.5.3 器件的电化学性能表征 |
| 3.6 结论 |
| 第4章 中空多孔纳米二氧化钛负极材料的制备及应用 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验原料与仪器设备 |
| 4.2.1 实验原料 |
| 4.2.2 仪器设备 |
| 4.3 材料与器件的制备 |
| 4.3.1 中空多孔纳米TiO_2材料的制备 |
| 4.3.2 器件的制备 |
| 4.4 材料的表征与器件的测试 |
| 4.4.1 材料的表征 |
| 4.4.2 器件的测试 |
| 4.5 结果与讨论 |
| 4.5.1 煅烧前和空气中煅烧后制备的材料的表征 |
| 4.5.2 不同系列PVP对中空多孔纳米TiO_2材料及器件的影响 |
| 4.5.3 不同退火温度对中空多孔纳米TiO_2材料及器件的影响 |
| 4.5.4 不同微球模板对中空多孔纳米TiO_2材料及器件的影响 |
| 4.6 结论 |
| 第5章 核壳多孔及碳氮共掺的二氧化钛负极材料的制备及应用 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.1 实验原料 |
| 5.2.2 仪器设备 |
| 5.3 材料与器件的制备 |
| 5.3.1 核壳多孔C-N@MP-TiO_2复合材料的制备 |
| 5.3.2 器件的制备 |
| 5.4 材料的表征与器件与测试 |
| 5.4.1 材料的表征 |
| 5.4.2 器件的测试 |
| 5.5 结果与讨论 |
| 5.5.1 核壳多孔C-N@MP-TiO_2复合材料的制备原理 |
| 5.5.2 不同微球模板对C-N@MP-TiO_2材料及器件性能的影响 |
| 5.5.3 不同浓度TBOT对 C-N@MP-TiO_2材料及器件性能的影响 |
| 5.5.4 退火温度对C-N@MP-TiO_2材料及器件性能的影响 |
| 5.5.5 退火时间对C-N@MP-TiO_2材料及器件性能的影响 |
| 5.5.6 PVP对复合材料及器件性能的影响 |
| 5.6 结论 |
| 第六章 (氧化)石墨烯/纳米二氧化钛复合材料的制备及应用 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 实验部分 |
| 6.2.1 实验原料 |
| 6.2.2 仪器设备 |
| 6.3 实验部分 |
| 6.3.2 材料的制备 |
| 6.3.3 器件的制备 |
| 6.4 材料的表征与器件的测试 |
| 6.4.1 材料的表征 |
| 6.4.2 器件的测试 |
| 6.5 结果与讨论 |
| 6.5.1 直接掺杂法制备graphene/C-TiO_2复合材料 |
| 6.5.2 水热法制备(氧化)石墨烯/C-TiO_2复合材料 |
| 6.5.3 高温煅烧法制备(氧化)石墨烯/C-TiO_2复合材料 |
| 6.6 结论 |
| 第7章 结论与展望 |
| 7.1 主要结论 |
| 7.2 创新点 |
| 7.3 展望 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参与科研情况说明 |
| 致谢 |
（9）鼠自体组织神经导管修复坐骨神经缺损的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 小鼠骨骼肌神经导管促进坐骨神经损伤修复的机制研究 |
| 前言 |
| 第一节 坐骨神经匀浆条件培养基对肌源性干细胞的诱导分化 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二节 骨骼肌神经导管、辐照导管和脱细胞导管对小鼠坐骨神经缺损修复的作用 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三节 骨骼肌神经导管的早期血运重建 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 第二部分 富血小板纤维蛋白膜神经导管对小鼠坐骨神经损伤修复的实验研究 |
| 前言 |
| 引言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 周围神经损伤修复中新生血管的作用 |
| 综述参考文献 |
| 附录 英文缩略语表 |
| 傅士期间已发表或待发表文章 |
| 致谢 |
（10）伊文思蓝坏死亲和性的多模态影像学实验研究及其机制探讨（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 伊文思蓝的坏死亲和性:在多种动物坏死模型中的实验研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分 ~(131)I-EB作为坏死靶向探针在大鼠再灌注部分肝梗死模型上的多模态影像学研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第三部分 伊文思蓝靶向坏死组织的机制探讨 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 综述 靶向坏死的分子成像和治疗策略 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简历及在学期间取得的科研成果 |
四、电动式影像切片机的应用研究（论文参考文献）
- [1]基于“阳化气，阴成形”理论研究TGF-β1/Smads影响黄韧带肥厚的机制及模型的建立[D]. 王宝剑. 中国中医科学院, 2021(02)
- [2]针刺提高脑梗死溶栓安全性的RhoA/ROCK信号通路机制及临床效应观察[D]. 宋扬扬. 南京中医药大学, 2021(01)
- [3]ClinproTMXT保护膜对牙釉质脱矿的预防和再矿化作用的体外研究[D]. 吴慧. 青岛大学, 2021
- [4]体感诱发电位特征分析在颈髓损伤与疾病中的应用：动物实验研究[D]. 高松坤. 北京协和医学院, 2021(02)
- [5]钙响应因子CaRF在小胶质细胞介导慢性低灌注性脑白质损伤中的作用与机制研究[D]. 赵明. 中国人民解放军海军军医大学, 2021(01)
- [6]雷洛昔芬治疗前交叉韧带切断联合卵巢切除诱导的大鼠骨关节炎的实验研究[D]. 平少华. 河北医科大学, 2021(02)
- [7]协同功能微泡构建及其在非小细胞肺癌治疗中的应用[D]. 李田宽. 东南大学, 2020(02)
- [8]新型电极材料及其在锂离子储能器件的应用[D]. 纪伟伟. 天津大学, 2020(01)
- [9]鼠自体组织神经导管修复坐骨神经缺损的实验研究[D]. 黄慜璐. 北京协和医学院, 2020(05)
- [10]伊文思蓝坏死亲和性的多模态影像学实验研究及其机制探讨[D]. 尧林鹏. 浙江大学, 2020(01)